斑点免疫吸附试验诊断羊脑多头蚴病的研究

以原头节可溶性粗抗原经Sephadex G-200层析纯化抗原为包被抗原，兔抗羊IgG-HRP结合物为显色剂，建立检测羊脑多头蚴病血清抗体的Dot-ELISA，并以ELISA作平行对照。结果，粗抗原和层析纯化抗原检测86头份羊脑多头蚴病阳性血清，其敏感性分别为94．18％和93．02％，两种抗原的敏感性无显著差异；检测122头份绦虫蚴病阴性血清，18头份棘球蚴病阳性血清，35头份细颈囊尾蚴病阳性血清，其特异性分别为90．29％和95．43％。两种抗原的特异性差异显著。Dot-ELISA和ELISA两种方法的符合率为100％。层析纯化抗原比粗抗原的特异性有了明显提高，而敏感性没有降低。层析纯化抗原和操作术式都具有良好的重复性，Dot-ELISA和ELISA对比试验结果相近，且具简便、快速及不需要复杂设备等优点，是一种检测羊脑多头蚴病血清抗体的理想方法。     

Dot-ELISA检查香肠中沙门氏菌的研究

以硝酸纤维膜为固相载体，利用沙门氏菌多价血清和辣根过氧化物酶（HRP）标记制备的羊抗兔IgG，成功地建立对香肠的Dot-ELISA检查法，同时，采用常规分离培养鉴定技术作对照试验。结果显示，在86份香肠中，用Dot-ELISA检出沙门氏菌阳性为36份，阳性率为41．86％；而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性为34份，阳性率为39．53％，两种方法的阳性符合率为86．17％，经统计分析，t=0．3111，p〉0．05，两种方法差异不显著。     

Dot-ELISA检查香肠中沙门氏菌的研究

以硝酸纤维膜为固相载体,利用沙门氏菌多价血清和辣根过氧化物酶(HRP)标记制备的羊抗兔IgG,成功地建立对香肠的Dot-ELISA检查法,同时,采用常规分离培养鉴定技术作对照试验。结果显示,在86份香肠中,用Dot-ELISA检出沙门氏菌阳性为36份,阳性率为41.86%;而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性为34份,阳性率为39.53%,两种方法的阳性符合率为86.17%,经统计分析,t=0.311 1,p>0.05,两种方法差异不显著。     

几种淡水鱼血清免疫复合物的初步研究

采用SDS－PAGE技术和免疫酶斑点法（Dot-ELISA),对罗非鱼、草鱼、鲫、镛和鲤5种淡水鱼的血清免疫复合物（IC）进行了研究。结果表明，鲤科的4种鱼之间的电泳条带差异较小，丽鱼科的罗非鱼与鲤科的4种鱼之间的电泳条带有差异但较小。2％PEG能较好地沉淀5种鱼血清IC，且不同鱼血清IC含量有一定的差异。     

检测新城疫抗体的Dot-ELISA方法的建立及其与HI方法的比较研究

建立了检测鸡群中新城疫病毒(New Castle disease virus,NDV)血清抗体的Dot-ELISA方法,对Dot-ELISA的最佳反应条件进行了研究,初步确定了该方法的感染保护临界值为7log2。通过对大量临床血清样本的检测,表明Dot-ELISA与血凝抑制试验(HI)相比,具有敏感、特异和稳定性好的优点。     

斑点酶联免疫吸附试验诊断猪囊虫病的研究

通过Sephadex G-200层析提纯猪囊虫的囊液抗原和匀浆抗原,并以此抗原建立Dot-ELISA法来诊断猪囊虫病。该法在接到病料后1.5h内准确报告结果,结果判定不但简易直观,而且还可以作为技术资料长期保存。本法以硝酸纤维素膜作为载体,抗原用量、其他器材和试剂用量都大为减少,因而降低了检测成本。与四种寄生虫病(旋毛虫、弓形虫、细颈囊尾蚴、猪蛔虫)阳性血清不发生交叉反应。对按“四部”规程肉检确认为猪囊虫阴性血清42份,阳性血清17份,经 Dot-ELISA 法检测,其阴性符合率为95.24%,阳性符合率为100%,经三次重复,重复率为100%。对西宁市肉联厂的536份商品猪血清进行检测,其猪囊虫病阳性检出率为4.29%。试验结果证明,该法符合“简便、快速、敏感、准确、经济”的原则,尤其易于在基层推广应用。     

Dot-ELISA检测猪胴体中沙门氏菌的研究

应用Dot-ELISA法对西宁某猪屠宰点 85份猪胴体进行了沙门氏菌的检测 ,同时采用常规分离培养鉴定技术作对照实验。结果在 85份肉样中 ,Dot-ELISA检出沙门氏菌阳性 6 5份 ,阳性率为 76 .4 7% (6 5 /85 ) ;而常规分离培养鉴定技术检出沙门氏菌阳性 6 7份 ,阳性率为 78.82 % (6 7/85 ) ,此两种方法的阳性符合率为 86 .5 7%。经统计分析 ,两种方法差异不显著 (P >0 .0 5 )。     

应用Dot－ELISA快速检测传染性法氏囊病病毒

本文成功建立了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），应用于传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）的快速检测。该方法操作简便快速、特异性好、灵敏度高。同时对深圳某鸡场发生ＩＢＤ病料进行了病毒分离，用Ｄｏｒ－ＥＬＩＳＡ检测接种鸡胚的绒毛尿囊膜裂解上清呈强阳性反应。     

Dot-ELISA检测H9亚型禽流感病毒的研究

本研究采用兔抗H9亚型禽流感病毒（AIV）IgG包被于硝酸纤维素膜,酶标羊抗兔IgG作二抗,建立检测H9亚型AIV的Dot-ELISA法。经方阵试验确定兔抗AIV IgG工作浓度为1∶400,酶标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶400。作者建立的Dot-ELISA对AIV的最小检测量为3.35×10-9g。Dot-ELISA与HA和HI、AGP及病毒分离法相比,检测63份临床疑似H9亚型AIV病料,Dot-ELISA检出32份(57.14%),HA和HI检出15份(23.81%),AGP检出11份(17.46%),病毒分离检出38份(60.30%)。用抗H9亚型AIV阳性血清可以阻断Dot-ELISA阳性反应,诊断膜片与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒不出现阳性反应,证明Dot-ELISA特异性好。分别置室温(25 ℃左右)、4 ℃和-20 ℃下保存1个月后,膜片诊断效果不变,对照反应均成立,该方法重复性好（重复符合率为93.9%）,操作简便（3 h内可完成）,不需要特殊检测仪器,结果客观,肉眼易于判断,是微生物和传染病及寄生虫病诊断标准化的新技术之一。