小鼠单个冷冻胚胎银染mRNA差异显示方法的建立

为建立单个冷冻胚胎银染mRNA差异显示方法,用小鼠单个4C鲜胚和冻胚RT—PCR产物,验证了冻胚和鲜胚实验结果的一致性。并从小鼠4C和8C冻胚的银染聚丙烯酰胺凝胶中回收了8C期的特异条带,通过再扩增、同收、克隆及酶切鉴定,克隆到了小鼠8C期胚胎差异表达的小鼠RP23—20A6基因。结果表明,所研究建立的单个冻胚银染mRNA差异显示方法具有可行性和有效性,可以用于动物早期胚胎基因表达的研究。     

鸡肺石蜡切片AgNOR染色方法的探讨

AgNOR银染法是病理实验室常用的染色方法，它能反映细胞增殖及有助于肿瘤的鉴别诊断，在兽医临床上有着不可忽视的作用。AgNOR内的嗜银蛋白为一种酸性非组蛋白，其带负电荷的羧基首先与银离子结合，使银离子还原成金属银，形成在亚显微结构下可见的微小核心，并以此作为银继续沉淀的集中点。然后，由较小负电荷的巯基吸收银，使微小的银发展成特征性的黑点，显微镜下显示为AgNOR颗粒。     

两种聚丙烯酰胺凝胶银染方法的比较

比较了两种聚丙烯酰胺凝胶的DNA染色方法。对小麦SSR扩增产物的染色结果显示,改进的Bassam银染法颜色背景浅,灵敏度较高,能够看到副带染色。改进的Sanguinetti方法对条带的鉴别力稍差,但因省时省力,成本较低可用于大规模引物筛选时的染色。     

小型昆虫蛋白图谱检测方法的比较研究

以烟粉虱[Bemisia tabaci(Gennadius)]和温室白粉虱[Trialeurodes vaporariorum(Westwood)]小型昆虫为研究对象,比较了这些小型昆虫可溶性蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测方法。结果表明,改进的复合银染法在蛋白质检测中具有效果好、简单快捷的特点。     

影响家蚕AFLP-银染法的因素及其对策

AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)是一种新型的、有效的分子标记技术，近年来它与银染技术的结合进一步提高了它的实用性。作根据长期的实验经验和教训，对影响AFLP-银染技术的一些因素如DNA的质量、酶切的效果、引物和接头的设计等进行了分析，初步总结出AFLP-银染技术关键之处在于模板DNA的准备和酶切以及引物的选择。PCR扩增、电泳和银染检测对图谱的清晰度和分辨率也有很大的影响。并针对这些因素进行了相应对策的初步探讨。     

不同生长时期枣树组培苗及几个品种蛋白质谱带分析

对枣树6个品种及同一品种在不同生长阶段应用蛋白质SDS凝胶电泳进行了分类及遗传多样性研究,结果表明:(1)6个枣树品种在蛋白质谱带构成上有特异性,不同品种的枣树蛋白质谱带间有差异性;(2)通过对临泽小枣试管苗、移栽小苗及定植苗的蛋白质谱带比较,证明代射旺盛时期蛋白质谱带多,随着生长的减弱,一些特异蛋白质谱带逐渐消失。(3)通过本文研究,掌握了枣树不同品种间的遗传关系及同一品种在不同生长时期的蛋白质谱带变化趋势,为枣树品种间的亲缘关系划分及枣树鉴别提供了生化依据。     

畜禽微卫星多态性的银染法显色

为了确定一种安全、有效而快速的显示畜禽微卫星多态性的染色方法，以广东地方鸡种及优质黄羽肉鸡品系种鸡基因组ＤＮＡ为材料，用５对微卫星引物进行ＰＣＲ扩增，并将扩增产物置于变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，通过对比溴化乙锭染色和银染法显色确定理想显色法，结果认为银染法是一种可行、安全的理想方法。     

AFLP荧光标记和银染技术的比较分析

为了建立准确、高效、实用的AFLP体系和方法,采用改进的CTAB-DNA提取方法从披碱草的嫩叶中提取降解少、样品纯度高、蛋白去除干净、不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂的总DNA.选取3对引物扩增,采用AFLP荧光标记和银染法对披碱草全基因组多态性进行了分析,其中荧光标记法得到231条条带,银染法得到75条条带,平均每条引物荧光标记技术比银染法多得到52条条带,多态比率是银染法的1.8倍.据此认为荧光标记法检测效果较为理想,适于进行披碱草遗传多样性的分析和研究.     

大肠埃希菌生物被膜体外模型的建立及其应用

以ATCC25922为研究对象,采用改良结晶紫染色、快速银染法和扫描电镜技术对其生物被膜进行定量和定性研究,建立大肠埃希菌生物被膜体外模型,利用优化的模型条件对249株临床分离株进行验证.采用琼脂平板计数法绘制大肠埃希菌浮游菌和被膜菌生长曲线,比较其生长特性的异同.对不同成膜能力的大肠埃希菌临床分离株进行色氨酸定量试验...     

奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成及相关基因分析

 【目的】研究临床分离的奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成能力,相关基因的分布及二者之间的关系;【方法】利用通用硅胶片法培养葡萄球菌生物被膜,经充分洗涤后对生物被膜进行银染定性判断菌株形成生物被膜的能力,通过生物被膜菌落结晶紫染色法定量检测菌株生物被膜的形成能力,并用扫描电镜观察被膜结构,对葡萄球菌bap、icaAD、icaBC、sar、agr、sigB、clfaA、clfaB、fnbpA和fnbpB进行PCR扩增检测。【结果】 银染法定性结果显示137株葡萄球菌中有120株形成肉眼可见的生物被膜,生物被膜形成率为87.6%;结晶紫染色定量检测与硅胶粘附的有132株,不粘附的有5株。试验所用的137株葡萄球菌中,57株能扩增出bap基因;有43株和54株分别能扩增出icaAD和icaBC;有73株、49株和38株分别扩增出sigB、sar和agr;分别有76株和50株染色体中存在clfaA和clfaB;fnbpA和fnbpB分别在52株和26株菌株中扩增出。【结论】推测bap、sigB、sar、icaAD和icaBC基因是生物被膜形成的重要相关基因;agr及粘附素基因clfaA、clfaB、fnbpA和fnbpB对生物被膜形成的作用不明显。