昆明鼠卵母细胞的孤雌发育及对其干扰核移植试验的预防措施

本文着重研究了在昆明鼠细胞核移植过程中，卵母细胞孤雌发育的激活原因、形成过程，并提出了一些防止其干扰细胞核移植的措施。     

山羊生精上皮细胞分离研究

采用四种酶法分离二月龄关中奶山羊生精上皮细胞,A组:胶原酶Ⅳ;B组:胶原酶Ⅳ +透明质酸酶;C组:胶原酶Ⅳ+透明质酸酶+胰蛋白酶与EDTA;D组:胶原酶Ⅳ+透明质酸酶+胰蛋白酶与EDTA+DnaseI。结果二月龄羔羊曲细精管主要包含Sertoli细胞、精原细胞和管周排列的肌样细胞。每 200mg睾丸实质收获生精上皮细胞总数 (×105 )A,B,C,D组分别为 6. 91±0. 68, 6. 67±0. 80, 5. 94±0. 81, 5. 74±0. 82;细胞存活率 (% )分别为 76. 82±3. 80, 75. 96±1. 61, 94. 19±2. 89, 92. 32±1. 97;圆形细胞比率 (% )分别为 17. 54±1. 68, 16. 70±1. 46, 23. 64±1. 72, 22. 90±2. 38;细胞贴壁率(% )分别为 5. 93±0. 36, 5. 81±0. 54, 26. 94±1. 54, 25. 00±1. 74。C,D组不但组织块解离效果及细胞离散程度均较A,B好,且原代培养细胞团块数少。多重比较C,D组显著优于A,B组 (P<0.05);C组与D组差异不显著(P>0.05),但与A,B组比较细胞存活率、圆形细胞比率及贴壁率差异极显著(P<0.01)。结论认为C组是较简单有效的山羊生精上皮细胞分离酶组合。     

皱皮香猪HAS2基因SNPs的鉴定及生物信息学分析

为了探究皱皮香猪全身性皮肤褶皱是否与透明质酸合成酶2（hyaluronan synthase 2,HAS2）基因变异有关,本研究以普通香猪为对照,采用特异性PCR方法克隆HAS2基因的外显子编码区,应用生物信息学方法分析测定基因编码区的碱基变异,检测变异位点在群体中的分布频率。结果显示,皱皮香猪HAS2基因中检测到4个SNPs位点：位于外显子1的T221A错义突变（导致亮氨酸替换为赖氨酸）和A228G同义突变,位于外显子2的T183C和外显子4的C537T同义突变。生物信息学分析发现,T221A和A228G位点构成4种单倍型,其中T-A为皱皮香猪群体的主要单倍型（27.5%）,且在皱皮香猪群体中紧密连锁（r²=0.253）,而且T221A和A228G突变可引起mRNA自由能和蛋白质结构发生变化,TA组合的自由能为-573.29 kJ·mol^-1,TG组合的自由能为-580.89 kJ·mol^-1,AG组合的自由能为-572.66 kJ·mol^-1;AA组合的自由能为-571.03 kJ·mol^-1;蛋白序列中亮氨酸替换为赖氨酸后,α螺旋由35.52%降为32.97%,自由卷曲由43.17%升至44.51%,同时引起蛋白序列三级结构的改变。位点T221A和A228G在香猪群体中呈现出丰富的多态性,均表现出3种基因型;关联分析结果显示,皱皮香猪T221A位点的A等位基因频率显著高于普通香猪（P<0.05）,A228G位点中皱皮香猪的G等位基因频率极显著高于普通香猪（P<0.01）。T183C位点的C等位基因频率和C537T位点的T等位基因频率在皱皮香猪和普通香猪间未达到显著性差异（P>0.05）。研究结果揭示,HAS2基因的外显子1中发生的两个碱基变异可能影响基因转录后mRNA的稳定性以及蛋白的三维结构,影响HA的合成量,并与皱皮香猪体侧皮肤不均匀增厚且发生褶皱有关。     

透明质酸发酵条件的优化

为进一步提高兽疫链球菌透明质酸产量,优化了其发酵条件:当装液量30 mL/250 mL,起始pH值7.5,接种量4%,转速150 r/min,温度38℃,时间40 h,透明质酸产量的最大值为1.25 g/L,是优化前原始菌株的2.84倍。     

发酵法生产透明质酸的工艺研究

本文主要研究兽疫链球菌（NACF－036）产透明质酸的条件及其特性。正交实验表明，产透明质酸的最合适培养基是：淀粉3％，蔗糖2％，酵母膏1％，蛋白胨2％，轻质碳酸钙0.1%，磷酸氢二钾0.2%，硫酸镁0.1％。在37℃，170rpm，发酵40小时，发酵液中透明质酸的含量达3－4g/L。     

透明质酸生理功能及其应用研究进展

透明质酸是一种在体内广泛分布的黏多糖,已成功用于骨科、眼科、整形美容、保健食品等领域,但仍有许多新的应用领域不断被开发。主要介绍了透明质酸的生理功能,并结合透明质酸的结构特性,综述了透明质酸在保健食品、化妆品、美容、骨科、眼科等几个方面应用的研究进展。     

镉(Ⅱ)-邻菲啰啉二元配合物与透明质酸相互作用的电化学性能及应用研究

本文利用线扫极谱法研究了镉(Ⅱ)-邻菲啰啉(Phen)二元络合物与透明质酸(HA)的相互作用并建立了以Cd(Ⅱ)-Phen二元配合物为电化学探针测定HA的分析测试方法。在最佳实验条件下,Cd(Ⅱ)-Phen还原峰电流的降低值同HA的浓度在4.0~110.0mg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为Δip"(nA)=3.98 C(mg/L)+30.79(n=17,γ=0.993),检测限为3.23mg/L(3σ)。将本方法应用于模拟样品中HA的测定,结果令人满意。     

透明质酸(HA)的功能性及生产技术研究进展

透明质酸 (Hyaluronicacid简称HA)是一种国际上公认的生物大分子保湿剂 ,用于眼科显微手术、关节炎治疗、高级化妆品、妇产科等领域。综述了目前国内外对透明质酸的化学结构、理化性质、应用及生产方法等方面的研究现状 ,对透明质酸的线性结构、超强吸水性以及它与水结合成的弹性透明水化膜在润肤、恢复软组织及妇产科临床方面的应用作了较详细的论述 ,对采用动物组织为原料的提取法和采用兽疫链球菌等为菌种的发酵法作了系统总括     

银耳多糖与透明质酸的保湿性能比较

[目的]研究银耳多糖的保湿性能,为银耳多糖在化妆品中的应用提供理论依据。[方法]通过在相同的化妆品配方体系中添加不同比例的银耳多糖,按照由北京工商大学等单位起草的化妆品保湿功效的测定方法,采用德国CK公司的CM825型皮肤水分测试仪,将所得产品的保湿性与添加透明质酸产品的保湿性进行对比,研究了银耳多糖的保湿效果。[结果]在该研究所述的配方体系中,添加0.05%银耳多糖的产品的保湿效果已经优于添加0.02%透明质酸的产品。添加0.10%的银耳多糖在该研究所述配方体系中可以达到最佳的保湿效果。[结论]银耳多糖的保湿效果与透明质酸相当,其替代透明质酸作为保湿剂可以取得较好的经济效益。     

透明质酸生产菌的分离鉴定

从牛鼻黏膜中分离纯化得到1株生产透明质酸的菌株,用16S rDNA分析鉴定该菌为马链球菌马亚种,该菌摇瓶发酵生产透明质酸的产量可达3.0 g/L,适合进行透明质酸的发酵生产,Hyl和sagA是影响透明质酸生产质量的最为关键的2种基因,采用PCR检测技术检测出该菌有毒力因子Hyl和sagA.研究结果为构建毒力基因缺失突变株和进行高产透明质酸菌种的选育奠定了理论基础.