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转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明:Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。 相似文献
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转基因植物及其安全性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
人类自从工业革命之后,在两大技术领域里取得了重大突破,即电子信息技术和生物技术。在20世纪,生物领域里最重大的技术是生物的转基因技术,它创造出了超自然的生物新种类和新品种——转基因生物。转基因生物包括转基因植物、转基因动物和转基因微生物。现代生物技术首先在医药生物技术领域取得突破,之后拓展到农业与环境生物技术领域。进入21世纪, 相似文献
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5.
光肩星天牛是许多树种毁灭性的蛀干害虫,而我们通过多年的调查,证实了廊坊杨抗光肩星天牛危害,又经试验和对树干进行观察,进一步分析了廊坊杨的抗光肩星天牛的特性及其抗虫机制。 相似文献
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