粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响

为测定致羔羊脑炎粪肠球菌（Enterococcus faecalis）的生长曲线，寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量，并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响，试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法（D_λ值法）测定粪肠球菌的生长曲线，探究该菌在合适时间段内的吸光值（D_{600 nm}）与平板菌落计数法测定的活菌数（CFU）的关系。用粪肠球菌感染小鼠，观察记录小鼠的死亡情况，最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量（LD₅₀）。用LD₅₀的剂量感染小鼠，及时采集死亡小鼠脑组织，未死亡的小鼠72 h后全部剖杀取脑组织，一部分做涂片染色，制作病理切片，观察病理变化；一部分进行培养，用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示，用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致，在2~8 h生长迅速，为对数生长期，8~14 h生长缓慢，为稳定期，14 h之后死亡数增加，进入衰亡期；对12 h粪肠球菌D_{600 nm}与CFU的关系进行探讨，成功建立回归方程：y=20.769x-1.3422，R²=0.997；其感染小鼠的LD₅₀为7.77×10¹¹个活菌。以此剂量感染小鼠，脑组织涂片染色和培养染色，均能看到革兰氏阳性球菌；PCR结果显示，均出现了大小为112 bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓，脑膜充血。通过生长曲线和其D_{600 nm}与CFU关系的建立，可实时监测粪肠球菌数量，为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。     

Screening of Probiotics Inhibiting E. coli K88 in vitro

The probiotics tested in the experiment were isolated from the intestinal of weaning piglets.The isolated probiotics and E.coli K88 were inoculated into the culture of intestinal porcine epithelial cell-1 (IPEC-1).The activity of lactate dehydrogenase (LDH) in the supernatant was measured after incubating for 2.5 h.At the same time, the probiotics and E.coli K88 were co-cultured in vitro, the number of E.coli K88 was counted and the probiotics which could be resistant to the E.coli K88 were selected 2.5 h later.The results showed that the Lactobacillus casei and Bacillus coagulans could significantly reduce LDH activity (P<0.05), decrease the damage of E.coli K88; Bacillus coagulans could inhibit the growth of E.coli K88.At the same time, Bacillus coagulans could resist high temperature, acid and bile salt.The results showed that Bacillus coagulans strains had great potential as the application of probiotics strains.The methods could be used as a model of screen probiotics which could inhibit the growth of E.coli K88 in vitro.     

双参数载荷谱编制与计算机程序

采用解析法讨论了雨流计数后损伤谱的编制步骤;导出了当量变程分布密度函数的积分表达式,并证明了积分的收敛性;导出了威布尔分布特征参数最优值估计的解析法;提出了通过解超越方程确定最大载荷的计算方法,并在TJAP模拟数据处理系统硬件的基础上,编写了编制等损伤谱的计算机程序。     

枯草芽孢杆菌培养基配方优化的研究

枯草芽孢杆菌培养基的组分是由葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙等5种原料构成,采用L1（4^5）正交表,将5种原料作为枯草芽孢杆菌培养有影响的因素,通过试验数理统计的直观和理论分析,对其配方进行优化：试验结果表明,当培养基的配方为无水葡萄糖3．50g／L、蛋白胨0．83g／L、酵母膏0．50g／L、磷酸二氢钾0．35g／L和碳酸钙0．25g／L,温度（34&#177;2）℃时,培养16h即可达到生长峰值。由于枯草芽孢杆菌光学密度（optical density,OD）与活菌数量的关系：Y=0．5182x^2＋1．4462x＋1．9714（r=0．996343）,接种的枯草芽孢杆菌由1．9714&#215;10^8cfu／mL提高到3．3124&#215;10^8cfu／mL。优化的枯草芽孢杆菌培养基条件能有效促进枯草芽孢杆菌生长。     

尿素对鲤鱼消化道菌群的影响

用 释平板计数法对摄食含尿素饲料和对照饲料的健康鲤鱼（Cyprinus carpio)肠道内菌群进行了分析，结果表明对照组鲤鱼肠道中需氧，兼性厌氧优势菌为气单胞菌属，芽孢杆菌属，葡萄球菌属和微球菌属，可以利用尿素的细菌占细菌总数的55％，试验组中优势菌为芽孢杆菌属，肠杆菌科和葡萄球菌属，微示菌属和气单胞菌属数量明显减少，假单孢菌属和产碱菌属则未检出，新检测出不动杆菌属，能利用尿素的细菌占总数的85％。     

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7％的硫酸锌溶液与无水乙醇以10：1（体积比）的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60min和涡旋处理30s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明：在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0．01～0．05g/25mL与孢子数线性关系良好。     

公英翘芦散治疗亚临床型奶牛乳房炎的效果研究

本研究旨在初步考察公英翘芦散对亚临床奶牛乳房炎的临床治疗效果。试验选取78头发病牛，其中38头牛为散发，用公英翘芦散治疗；40头牛集中对比治疗，随机分成2组，每组20头，分别用公英翘芦散和公英散进行治疗。用加州乳房炎检验（California mastitis trial，CMT）法检测公英翘芦散治疗后乳区患病状态并判定其治疗效果；用体细胞计数（somatic cell count，SCC）法检测公英翘芦散和公英散治疗后牛奶体细胞数并判定其治疗效果。结果显示，公英翘芦散给药7 d后，患病乳区由75个减少到28个，治疗效果非常显著，治愈率达到62.67%，有效率达到90.67%。与治疗前相比，公英翘芦散和公英散用药1 d后体细胞数均极显著降低（P<0.01），且公英翘芦散组SCC下降幅度明显超过公英散组。公英翘芦散组在给药2 d后体细胞数显著低于公英散组（P<0.05），给药3 d之后均极显著低于公英散组（P<0.01）。用药7 d后，公英翘芦散组治愈率可达68.29%，而公英散组治愈率只达到20.00%，差异极显著（P<0.01）；公英翘芦散组有效率可达97.56%，而公英散组有效率为67.50%，差异极显著（P<0.01），说明公英翘芦散的治疗效果极显著优于公英散（P<0.01）。以上结果说明，公英翘芦散可以作为治疗亚临床奶牛乳房炎的有效药物，为奶牛乳房炎药物的开发提供参考。     

一种改良的粪便卵囊计数法

球虫卵囊的检查是球虫病的诊断与防治的重要依据。其检查方法可大致分为定性法和定量法。前者如直接涂片检查法，后者有斯陶尔氏法（Ｓｔｏｌｌ′ｓｍｅｔｈｏｄ）、麦克马斯特氏法（ＭｃＭａｓｔｅｒ′ｓｍｅｔｈｏｄ）、白细胞计数法等，由于所测的是粪样中平均卵囊数而不是个体粪便卵囊数，所以它们反映的只是平均感染水平，而不是每个动物的感染强度，且采集的粪便量大。本文作者试图利用现有的器材酶标板，来建立一种快速的粪便卵囊计数法。１　主要器材　酶标板（９６孔单条可拆，由北京华美生物工程公司提供）；盖玻片；牙签；显微…     

湖北省越冬水鸟同步调查试点工作完成

根据湖北省湿地资源和越冬水鸟的分布特点,湖北省野生动植物保护总站选定在湖北龙感湖国家级自然保护区、沉湖国际重要湿地、网湖湿地自然保护区范围内开展越冬水鸟同步调查试点工作。