大豆脂肪氧合酶LOX-1热失活的高级结构变化分析

为促进大豆脂肪氧合酶LOX-1的动力学及催化机理研究,并为LOX-1活性的合理调控提供科学依据,本研究利用FT-IR技术分析LOX-1在20～80 ℃范围内的热失活和高级结构变化,采用Omnic 6.0和Peakfit 4.12软件处理FT-IR光谱,结合傅里叶自去卷积(FSD)、二阶导数分辨和曲线拟合技术分析酰胺Ⅰ带...     

脂氧合酶参与果蔬成熟衰老研究进展

1．脂氧合酶的一般特性脂氧合酶（LOX）是一种非血红素铁蛋白,分子量为90－100KD。这种酶蛋白由多个多肽链组成,其金属辅基的活性态为氧化型三价铁离子（Fe（3 ））,非活性态为二价铁离子（Fe（2 ））。LOX在生物体内的主要作用是,专一催化含有顺,顺－1,4一戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸的加氧反应,生成具有共轭双键的多元不饱和脂肪酸的氢过氧化物。LOX在生物体内的主要底物是甘油脂类（如磷脂）释放的游离不饱和脂肪酸,其中动物体内的主要底物为花生四烯酸（Arachidonicacid20：4,ω6）,植物体内的主要底物是亚油酸（Lino…     

病原菌诱导后黄瓜叶片中脂氧合酶活性与茉莉酸积累的关系

通过酶活性测定和高效液相色谱分析,研究经病原菌诱导后黄瓜叶片中脂氧合酶(LOX)活性与茉莉酸(JA)积累量的关系。结果表明,黄瓜经褐斑菌诱导后,叶片中茉莉酸(JA)大量积累,同时脂氧合酶(LOX)活性上升,接种叶片的上位叶中LOX活性和JA含量于诱导接种褐斑菌12h后开始升高,并于诱导接种24h后达到峰值,接种叶片的下位叶中LOX活性和JA含量在诱导接种12h后变化不大,但在24h后显著升高,并于48h达到峰值,此后逐渐平稳下降。相关分析表明,LOX与JA呈显著正相关,相关系数r为0.92。同时通过喷施脂氧合酶抑制剂(NDGA)和添加茉莉酸的试验证实LOX是JA合成的关键酶。     

前列腺素E2和F2α对LPS刺激后奶牛子宫内膜上皮细胞COX-1和COX-2表达的影响

试验旨在阐明前列腺素E₂（prostaglandin E₂,PGE₂）和F_2α（prostaglandin F_2α,PGF_2α）对体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中环氧合酶-1（cyclooxygenase-1,COX-1））与环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）表达的影响。培养奶牛子宫内膜上皮原代细胞和传代细胞,第4代细胞以1×10⁶个/孔接种于6孔板,以10^-7mol/L PGE₂和PGF_2α分别预处理细胞24 h,以100 ng/mL细菌脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）刺激细胞4、8和12 h后分别提取RNA和总蛋白质,采用实时荧光定量PCR与Western blotting等技术检测COX-1与COX-2 mRNA和蛋白质的表达量。结果表明,与对照组相比,COX-1 mRNA表达量在PGE₂单独作用4、8和12 h后显著上调（P<0.05）;COX-2 mRNA表达量在PGE₂单独作用4和12 h后显著上调（P<0.05）,PGE₂单独处理使COX-1、COX-2蛋白表达量均显著上调（P<0.05）。与对照组相比,LPS刺激8和12 h时COX-1 mRNA表达量显著下调（P<0.05）,LPS刺激后COX-1蛋白表达量无显著变化（P>0.05）;LPS刺激后4、8和12 h时COX-2 mRNA表达量显著上调（P<0.05）,LPS刺激后COX-2蛋白表达量显著上调（P<0.05）。与LPS单独处理组相比,LPS+PGE₂处理组在8和12 h时COX-1和COX-2 mRNA表达量均显著上调（P<0.05）,同时COX-1和COX-2蛋白表达量也显著上调（P<0.05）。PGF_2α在LPS未刺激和刺激后对COX-1和COX-2 mRNA的表达无显著影响（P>0.05）,仅在PGF_2α单独处理8和12 h后COX-1 mRNA表达量上调（P<0.05）。两种激素联合处理与各自单独处理及LPS单独刺激相比,对COX-1和COX-2 mRNA表达具有一定的协同诱导作用。     

家畜血液资源的开发利用

家畜血液占畜体活重的4%～9.8%。牛体内血液含量占体重的8%,羊占4.5%,猪占4.6%。目前,绝大多数肉类屠宰加工中,家畜血液资源利用甚少,尤其是牛(牦牛)、羊、兔的血液,除极少量用于制作血豆腐外,大部分作为肥料。近年来,随着加工技术的进步,血液制品以其独特的保健作用越来     

紫外分光光度法测定啤酒大麦籽粒脂氧合酶活力的研究

为了明确影响啤酒大麦籽粒脂氧合酶(LOX-1)活力的参数,以甘啤4号啤酒大麦籽粒为研究对象,采用紫外分光光度法探究底物浓度、提取缓冲液p H、反应体系缓冲液p H、提取时间、粗酶加入量∶底物加入量等对LOX-1活力的影响。结果表明,LOX-1活力随底物浓度的增加表现为先增加后减小的趋势,当底物浓度达到0.30mmol·L~(-1)时,LOX-1活力显著高于其它处理;随提取缓冲液p H的增加,LOX-1活力表现为双峰变化趋势,且在p H值5.0处,酶活力为9.85U·g~(-1),显著高于其它处理;粗酶提取时间为30min时,LOX-1活力显著高于其它处理,低于或者高于30min,酶活力均呈现降低趋势;LOX-1活力随反应体系p H的增加,表现为双峰变化趋势,当p H值为6.4时,酶活力最大,且与其它处理间存在显著差异;在其它条件不变,粗酶加入量为50μL的情况下,增加底物加入量,LOX-1活力表现为先增加后减小的趋势,且底物加入量为200μL时,酶活力显著高于其它处理。最终确定紫外分光光度法的测定参数:粗酶提取时间为30min,底物浓度为0.25mmol·L~(-1),提取液和反应体系缓冲液分别为p H值5.0醋酸盐缓冲液与p H值6.4磷酸盐缓冲液,粗酶加入酶量∶底物加入量为1∶4。研究结果为紫外分光光度法在啤酒大麦籽粒LOX-1活力测定中的应用提供了参考。     

畜禽血蛋白酶化与脱色工艺的应用研究

畜禽血经微生物蛋白酶水解，脱除血红素等工艺生产出的酶化脱血红素饲料蛋白，具有感观良好，气味清香，适口性强，消化率高等特点，粗蛋白含量在８２％－８６％，血红素脱除率在８０％以上，消除了血醒味。经酶化使大分子不易消化的蛋白质水解为小分子溶性的腙、胨；肽以及游离氨基酸。经测定可溶性氮达到８．２１％，占总氮的６１％，并含有较多的钙，磷以及其它矿物营养素，经科学配比可制成含蛋白质６０％左右的动物蛋白饲料，测     

BnaYUCCA10基因在不同油酸含量油菜中的表达

为明晰油菜BnaYUCCA10基因与油酸含量之间的关系,以miRNA测序得到的BnaYUCCA10基因为对象,采用实时荧光定量PCR(RT–PCR)技术研究BnaYUCCA10基因在30份不同油酸含量的甘蓝型油菜不同部位和生长时期的表达情况,并对BnaYUCCA10基因是否参与油酸的代谢进行分析.结果表明:营养生长期大...