旋毛虫Serpin基因在不同发育时期的mRNA表达水平变化及虫体表达特性

为研究旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin),基因在不同发育时期的mRNA表达水平变化,本研究应用实时荧光定量PCR技术对不同发育时期的虫体的Serpin在mRNA表达水平进行检测。同时利用鼠抗重组蛋白血清对Serpin在旋毛虫成虫、新生幼虫、成囊前期幼虫及肌幼虫中进行定位,以鉴定该Serpin基因的表达特性。研究结果显示,在成虫时期,3 d时表达量明显高于6 h和5 d的表达量(P﹤0.05);成囊前期表达量很低,其中18 d时表达量最低(P﹤0.05);肌幼虫时期在26 d、38 d和48 d均有大量表达(P﹤0.05)。免疫荧光染色结果表明,Ts Serpin蛋白在5 d成虫期的体表表达;在新生幼虫和14 d成囊前期幼虫的体内体表均有表达;38 d肌幼虫时期明显可见表皮及体内均有表达。本实验为探究旋毛虫在宿主体内免疫逃避机制奠定基础。     

内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。     

昆明鼠卵母细胞的孤雌发育及对其干扰核移植试验的预防措施

本文着重研究了在昆明鼠细胞核移植过程中，卵母细胞孤雌发育的激活原因、形成过程，并提出了一些防止其干扰细胞核移植的措施。     

琼脂糖扩散法测定加酶饲料中微量纤维素酶活力的研究

采用琼脂糖扩散法对加酶饲料中所含的微量纤维素酶活力进行了测定，并与其它方法进行了比较。试验结果表明，该方法具有灵敏度高、特异性好、操作简单、所需设备少等优点，可在加酶饲料进行纤维素酶活力的测定中推广使用。     

猪瘟实验室诊断技术

猪瘟(HC)具有高度接触传染性，流行广泛，发病率、死亡率高，危害极大。国际兽疫局(OIC)将之列为A类16种法定传染病之一，我国亦将之列为一类动物传染病。20世纪60年代英国在扑灭HC的过程中就证明大部分HC病例属于温和型或隐性感染；我国在20世纪70年代后期也发现HC的流行形式发生了很大变化。病程由急性变为慢性过程，临床症状由典型