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【目的】合成、克隆HIV单克降抗体VRC01的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化。【方法】根据GenBank上公布的VRC01抗体可变区的氨基酸序列合成引物,运用基因从头合成和重叠延伸PCR方法,克隆抗体VRC01的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因;用15肽Linker(Gly4Ser)3将VH和VL基因相连,得到单链抗体基因scFv-VH-Linker-VL和scFv-VL-Linker-VH,并分别将两者克隆到原核表达载体pET28a中,构建重组质粒后转入大肠杆菌BL21(DE3+)中诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;将重组蛋白进行变性处理后,利用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达产物进行初步纯化。【结果】得到了VRC01的2种单链抗体的基因scFv-VH-Linker-VL和scFv-VL-Linker-VH,其大小分别为770和768bp。SDS-PAGE电泳结果显示,scFv-VH-Linker-VL在大肠杆菌中不表达或表达量极低;而scFv-VL-Linker-VH表达量较高,蛋白质分子质量约为29ku,且主要以包涵体形式存在。Western blot检测结果证实,scFv-VL-Linker-VH可与His-Tag融合表达,并通过亲和层析法成功纯化获得了该单链抗体。【结论】成功构建、表达并纯化出了VRC01单链抗体,为进一步研究VRC01单链抗体的生物学特性奠定了基础。 相似文献
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黄自群 《农业环境科学学报》2013,1(3):428-429
目的探讨影响艾滋病患者口服抗病毒药物依从性的相关因素以及对其护理的对策。方法选取200例口服抗病毒药物的艾滋病患者,对其药物依从性的情况进行问卷调查,调查的内容包括:情感因素、心理因素、治疗因素、药物因素、社会环境等情况,对调查结果进行多元素的Logistic回归分析。结果 200例艾滋病患者中,依从患者112例,所占的比例是56.00%,不依从的患者88例,所占的比例是44.00%。而影响艾滋病患者口服抗病毒药物依从性的主要影响因素有:患者的情感支持情况、心理健康情况、抗病毒药物知识的掌握情况。结论要想改善艾滋病患者口服抗病毒药物依从性,应该加强对艾滋病患者的心理护理,动员及鼓励家庭予情感支持,反复宣教关于服用抗病毒药物的作用及重要性,这将是今后对于艾滋病患者护理的重点。 相似文献
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目的 对高效抗反转录病毒疗法治疗艾滋病效果进行分析.方法 选取2010年10月~2012年10月收治的艾滋病患者122例,随机分为两组,甲组患者60例,采用常规方法进行治疗;乙组患者62例,在常规治疗基础上采用高效抗反转录病毒疗法进行治疗,对比两组患者临床治疗效果.结果 乙组患者的临床治疗效果显著优于甲组患者,差异有显著性(P<0.05).乙组患者治疗6、12、18个月的HIV CD4+计数检测结果显著少于甲组患者,差异有显著性(P<0.05).乙组患者的复发率、病死率、合并症显著少于甲组患者,差异有显著性(P<0.05).乙组患者药物不良反应显著高于甲组,差异有显著性(P <0.05).乙组患者耐药性明显低于甲组患者,差异有显著性(P<0.05).结论 采用高效抗反转录病毒疗法治疗艾滋病能有效地提高临床治疗效果,减低HIV病毒的复制,显著降低复发、死亡及合并症的发生率,耐药发生率较低,但药物毒性相对较高,所以可依据患者的情况进行应用和治疗,具有较高的临床价值. 相似文献
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猫免疫缺陷病毒(FIV)于1986年首次在1只患类获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的患猫中分离。该病毒于人AIDS的病原有许多共同的特征,并分类于反转录病毒科慢病毒属。自FIV发现以来,已从临床、生物学和遗传学方面进行了广泛的研究。本文从FIV的形态、生化、生物学、免疫学和临床诸方面对FIV的生物学性质进行了概括。 相似文献
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