七彩神仙鱼 BTN1A1 基因克隆及其在嗜水气单胞菌胁迫下的表达分析

【目的】克隆七彩神仙鱼（Symphysodon aequifasciatus）嗜乳脂蛋白 1A1（Butyrophilin 1A1, BTN1A1）基因,分析其在病原刺激下的表达模式,为了解七彩神仙鱼 BTN1A1 基因功能提供依据。【方法】利用生物信息学对七彩神仙鱼 2 个 BTN1A1 基因（BTN1A1-1 和 BTN1A1-2）进行结构和进化分析。根据前期获得的七彩神仙鱼皮肤转录组数据,选取 BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 基因的 CDS 区设计引物进行克隆。采用 qRT-PCR 分析 BTN1A1 在各组织中的表达及嗜水气单胞菌刺激下的表达模式。【结果】BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 的 ORF 序列长度为 894、1 275 bp,分别编码 298、424 个氨基酸。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 蛋白均具有 1 个信号肽、1 个 Ig 结构域、1 个 lg_like 结构域和 1个跨膜结构域的经典结构,BTN1A1-2 还具有 1 个胞质结构域。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 与慈鲷科其他鱼类相似性较高,与尼加拉瓜湖始丽鱼（Archocentrus centrarchus）BTNIAI 对应氨基酸序列同源性最高、为 94.14%。但 BTN1A1-2 与其他鱼类发生分离,形成独特分支。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 在七彩神仙鱼各组织中均有表达,但在鳃、肠道、皮肤等与免疫相关的组织中表达量相对较高。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 在嗜水气单胞菌胁迫后表达量先显著下降后上升,而 BTN1A1-2 表达量则先显著上升后下降。【结论】七彩神仙鱼 BTN1A1-1 基因相对保守,而 BTN1A1-2 基因在进化上较为特殊。二者在免疫刺激下的差异表达暗示其可能在七彩神仙鱼免疫防御中发生功能分化。     

日本西氏鲍与皱纹盘鲍杂交试验初报

2005年在福建省平潭县对日本西氏鲍(H a liotis siebold ii)与皱纹盘鲍(H a liotis d iscus hanna i)进行了杂交试验。结果表明,皱纹盘鲍♀×西氏鲍♂和西氏鲍♀×皱纹盘鲍♂的受精率分别为14.5%和13.8%,西氏鲍和皱纹盘鲍自交的受精率分别为80.5%和75.3%。杂交鲍成活率高、生长速度和越冬成活率均略低于日本西氏鲍,而明显高于皱纹盘鲍,显示出了良好的生产性状和一定的杂种优势。     

铅、镉、汞对皱纹盘鲍幼鲍的急性毒性试验

在水温１４￣１６℃的条件下,分别用铅、汞、镉溶液对皱纹盘鲍幼鲍（６月龄）进行急性毒性试验。结果表明：毒性大小依次为汞〉镉〉铅。汞对幼鲍２４,４８,９６ｈ的ＬＣ５０（半致死浓度）分别为０．２８２,０．１６４,０．１２３ｍｇ／Ｌ。镉对幼鲍２４,４８,９６ｈ的ＬＣ５０分别为８．６８,７．１０,４．６０ｍｇ／Ｌ。铅浓度达到１０ｍｇ／Ｌ时,水中出现沉淀,幼鲍９６ｈ无死亡现象。幼鲍对汞中毒和镉中毒的反应现象不     

5种七彩神仙鱼5S rDNA序列的比较

采集鳍条,设计引物,提取了5种(黑格尔、盖子红、鸽子红、天子蓝、红点绿)七彩神仙鱼(Symphysodon)的5S r DNA,分析了其序列。结果表明:5种七彩神仙鱼均具有201 bp和401 bp 5S r DNA结构单元,而黑格尔(野生)、盖子红和鸽子红分别具有300,299,338 bp 5S r DNA结构单元。其编码区高度保守,而非转录间隔区差异显著,特别是黑格尔(野生)300 bp、盖子红299 bp和鸽子红338 bp的非转录间隔区。5种七彩神仙鱼G+C碱基的含量很高。红点绿、盖子红、鸽子红和天子蓝4个人工品种与野生品种黑格尔的亲缘关系分别为97.53%、90.12%、88.89%和85.19%,其中红点绿与黑格尔的亲缘关系最近。     

皱纹盘鲍与光棘球海胆筏式混养研究

皱纹盘鲍与光棘球海胆的混养可有效地防治污损生物的附着。综合分析鲍与海胆的生长、存活及防污损生物附着的效果,在生长期、高温期和恢复生长期混养海胆的最适密度分别为１５．２０个／格和１５－２０个／格。     

Physiological metabolism of Haliotis discus hannai Ino under different light qualities and cycles

The goal of this experiment was to examine the effects of different light qualities (red, white, blue) and cycles (12L:12D, 8L:16D, 4L:20D, 0L:24D, 16L:8D) on the survival, growth, metabolism and antioxidant defence system of Haliotis discus hannai Ino. Under red and white light at 4L:20D, the body weight‐specific growth rate of abalones was significantly higher than that of the 0L:24D group (P < 0.05). At 16L:8D, succinate dehydrogenase activity decreased and lactate dehydrogenase and alanine aminotransferase activity and the lactic acid content significantly rose (P < 0.05) in the red and white light groups. Under blue light, reactive oxygen species and malondialdehyde content for each light cycle were significantly higher than those of the red and white groups (P < 0.05). Under blue, white and red light, total antioxidant capacity (T‐AOC), superoxide dismutase (SOD) activity, glutathione peroxidase (GP_X) activity and reduced glutathione (GSH) content gradually rose with increased duration of light exposure. Under red light, significant differences in these parameters were detected between the 4L:20D and 16L:8D groups (P < 0.05). Under blue and white light at 16L:8D, values of T‐AOC, SOD, GP_X activity and GSH content were significantly lower than those of the 12L:12D group (P < 0.05). Overall, these results indicate that red light at light cycles of 4L:20D and 8L:16D is optimal for the culture and production of H. discus hannai, as these conditions promoted food intake, growth and health maintenance as well as normal physiological metabolism of the organism.     

应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原—创伤弧菌的研究

以皱纹盘鲍脓足病致病病原－ － 创伤弧菌为抗原,制备兔抗血清,抗体纯化后以辣根过氧化物酶标记,建立检测创伤弧菌的双抗夹心ＥＬＩＳＡ 检测法。结果表明,双抗夹心ＥＬＩＳＡ 法有较高的灵敏度,可检出含菌１０４ 个／ｍｌ 的菌悬液。与创伤弧菌对照菌株有明显的阳性反应不与副溶血弧菌、溶藻胶弧菌、河流弧菌等８ 株对照菌株产生影响检测结果的交叉反应。应用该法检测３０ 份病鲍样品,阳性检出率为６６ ．７ ％ 。     

皱纹盘鲍食道的结构与功能

以组织学，组织化学，扫描电镜和透射电镜观察及酶活性测定等方法研究了皱纹盘鲍的食道，食道可分为前，中后，三段，中段又可分为食物通道和食道侧囊，食道粘膜上皮由纤毛柱状细胞，粘液细胞，闰状腺细胞，微绒毛细胞和分泌细胞组成，纤毛柱状细胞参与运输食物和分泌物，并呈现吸收细胞的结构特征；粘液细胞分泌中性和酸性粘多糖；颗粒状腺细胞内充盈分泌颗粒；微绒毛细胞呈现吸收细胞的特征；分泌细胞具有强的蛋白酶等酶活性，能以楔浆分泌形式分泌消化酶，该细胞还具有吸收和细胞内消化作用。食道中段还呈现3种植物多糖酶活性。