基于比色型适配体传感器高灵敏快速检测磷脂酰丝氨酸

近年来,利用生物加工法制备海洋食品活性物质成为研究热点,对加工过程中目标产物进行定量检测十分重要,而传统的检测方法面临很多限制,迫切需要新型简便的分析方法。实验以磷脂酰丝氨酸(PS)为待检物代表,构建了一种比色型适配体传感器,用于快速检测生物加工体系中的PS。带正电的壳寡糖与带负电的适配体先经静电吸附结合,PS存在条件下,适配体特异性地与PS结合导致壳寡糖释放,后者进而与带负电的纳米金结合,形成具有高催化活性的过氧化物纳米酶,催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)产生与PS浓度成正相关的颜色信号,测定各样品的光吸收值,并与无PS的阴性样品相比计算光吸收变化率,从而实现快速定量。期间对适配体浓度、壳寡糖浓度、纳米酶催化参数进行了详细优化。在最优条件下,传感器具有良好的线性检测范围(0.50～50.00 nmol/L)和较高的灵敏度,检测限(LOD)低至93.84 pmol/L,且具有较好的选择性、准确性和重复性,用于分析实际生物加工样品中的PS时,回收率为95.63%～110.76%,相对标准偏差(RSD)均小于9%,整个分析过程仅需40 min。本研究成功构建了一种能高灵敏快速...     

溶藻弧菌适配子亲和力测定条件的优化及其特异性研究

[目的]优化溶藻弧菌适配子亲和力的测定条件,并验证适配子的亲和特异性。[方法]采用地高辛-过氧化物酶显色系统,通过正交试验确定亲和力测定的适宜条件,并在该条件下进行特异性验证。[结果]优化后亲和力的测定条件为：菌浓度3.0×10^8个/ml,结合时间40 min,结合温度28℃;经验证,该适配子对溶藻弧菌具有较高的亲和特异性。[结论]获得了溶藻弧菌适配子亲和力测定的优化条件,并证明了该适配子与溶藻弧菌具有较好的亲和特异性,为溶藻弧菌的SELEX筛选及其快速检测提供了参考。     

基于核酸适配体-荧光染料EvaGreenTM快速检测ATP的研究

目的利用荧光嵌入染料EvaGreenTM在单双链DNA溶液中不同的荧光性质构建基于核酸适配体的ATP检测体系,建立一种简单、高效的检测ATP的新方法。方法利用ATP核酸适配体双链DNA(dsDNA)和核酸绿色荧光染料Eva GreenTM嵌合作用,实现了对ATP的检测。考察了ATP的孵育温度、pH、浓度等因素对荧光强度的影响,并对该方法的特异性进行了验证。结果反应体系在12℃,pH 7.5条件下具有最佳实验效果,在最优条件下,最低能检测10-6mol/L的ATP,并具有较高的特异性。结论本研究为ATP的快速检测提供了一种易于操作、低成本的新方法。 更多还原     

粮食中黄曲霉毒素B1的检测方法研究进展及核酸适配体技术的应用

粮食谷物类食品作为我国的主要食物却极易受到真菌毒素的污染。在众多真菌毒素中,黄曲霉毒素B1 (AFB1)是毒性最高的真菌毒素之一。因此,快速、准确并且能够现场及时的对粮食中的AFB1进行检测,对我国食品安全有着重要意义。笔者针对目前粮食中AFB1的检测方法研究进展进行了综述,重点介绍了新型的核酸适配体传感器技术在此领域的应用,并分析了各方法的优势与不足以供后续研究参考。