脂肪肝病牛血清中ＯＣＴ水平和脂肪肝的相关性研究

在兽医临床实践中,经常会怀疑到乳牛的肝功能紊乱(变性和坏死),虽然具有AST,GGT,T-Bil和BUN等常用的肝功能指标,但它们除肝脏外,尚分布于其它器官或组织,如:肾、心、肌肉等。OCT(ornithinecarbamoyltransferase)被认为是反映家畜肝细胞坏死的一种肝特异性酶,几乎所有的OCT都限存于牛的肝脏中。遗憾的是,迄今为止,OCT指标尚未广泛地应用于兽医临床,OCT的基础研究也十分有限。本试验的目的,就是通过测定OCT,以期探讨OCT与脂肪肝病牛肝组织损伤的关系问题。1　材料与方法1.1　试剂、仪器、血清样品　(1)OCT式剂盒(购自日本和光纯…     

黄鳍鲷肝细胞体外培养研究

以黄鳍鲷肝脏细胞为材料 ,研究其肝细胞体外培养适宜的 p H、血清浓度、谷氨酰胺等条件 ,并进行传代培养试验。结果表明 ,培养液为 :MEM含 2 0 %小牛血清、15 g/ L L-谷氨酰胺及 p H 6 .9～ 7.1时 ,在 2 3℃中静置培养 ,黄鳍鲷肝细胞生长良好 ,3～ 5 d长满单层 ,细胞主要为成纤维细胞状 ,并能顺利传代。细胞动力学试验表明 :传代细胞 1～ 2代为适应期 ,3～ 5代为旺盛期 ,6代之后表现出衰老现象     

紫茎泽兰对萨能奶山羊血常规及重要脏器病理学的影响

紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)在中国作为入侵物种,可造成食草动物中毒死亡,并给畜牧业带巨大的损失。为研究反刍动物采食紫茎泽兰后的中毒机理,本研究探讨了日粮中添加不同剂量的紫茎泽兰对萨能奶山羊(Saanen goat)血常规及肝、脾、肾的病理学影响。选择16只5~6月龄健康萨能奶山羊,随机分成对照组(日粮中未添加紫茎泽兰)和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(日粮配比中分别添加紫茎泽兰40%、60%和80%),每组4只。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂含40%、60%和80%紫茎泽兰的混合日粮3个月,每两周检测一次血常规,试验末屠宰奶山羊,并观察其肝、肾、脾的病理学变化。结果表明,与对照组相比,各试验组血液中的白细胞(white blood cell,)和中性粒细胞(neutrophil,NEUT)均显著升高(P0.05),试验后期极显著高于对照组(P0.01);而各试验组血液中淋巴细胞(lymphocyte,LY)与血红蛋白(hemoglobin,HGB)均呈下降趋势,试验后期均极显著低于对照组(P0.01)。肝和脾肿大,肝组织出现淤血,肝细胞发生水泡变性及脂肪变性等,肾组织伴有出血、坏死、颗粒变性及水泡样变性的现象。因此,本研究结果说明紫茎泽兰对萨能奶山羊血液指标有显著影响,且长期摄入紫茎泽兰可引起动物肝、肾、脾等主要实质器官不同程度的损伤。     

日粮磷脂对大西洋鲑鱼早期发育和生长性能的影响

研究旨在证实大西洋鲑鱼对日粮磷脂的需求,更好地确定其需要水平和时期。因此,通过给大西洋鲑鱼提供磷虾或大豆卵磷脂探讨磷脂对其的影响。首先饲喂鱼苗含蛋白质55%和脂肪17%的饲粮,通过添加磷虾油或大豆磷脂补充脂肪,根据回归分析设计5个水平,分别为总磷脂1.5%(未添加)、2.6%、3.2%、3.6%和4.2%。在1 g(受精后1 400°dpf)、2.5 g(1990°dpf)、5 g(2 350°dpf)、10~20 g(2 850°dpf)和二龄鲑(3 800°dpf)时进行取样。整体存活率高,说明存活率和饲粮磷脂添加水平呈正相关(r2=0.59~0.72)。磷脂促进了鱼苗的生长,且饲喂磷虾磷脂2.6%和大豆磷脂3.6%的鱼增长最快。鱼苗达到2.5 g之前与之后生长模式不同,0~2.5 g鱼补充磷虾磷脂2.6%和大豆磷脂3.6%后的生长速率(SGR)显著高于基础日粮(P<0.05),而2.5 g~二龄鲑期间,各处理之间没有差异。饲喂未补充磷脂的日粮,2.5 g时发现鱼肠道脂肪变性,患病率达20%,饲喂低水平大豆磷脂日粮的鱼肠道脂肪变性患病率达10%,而喂食磷虾油和高水平大豆磷脂(≥3.2%)后以及在后期阶段,肠道脂肪变性情况开始消失。在生命早期阶段,鲑鱼对日粮磷脂的要求是一致的。     

铜对大鼠肝细胞活性、自由基代谢及细胞膜电位的影响

通过建立大鼠肝细胞的铜胁迫模型,旨在讨论不同剂量的铜对大鼠肝细胞活性、自由基代谢及细胞膜电位的影响。以硫酸铜为试验铜源,6个不同铜质量浓度(以Cu2+计):0,50,100,200,400,800mg/L,分别加入培养液培养BRL-3A细胞24和48h后,测定不同Cu2+质量浓度、不同处理时间后细胞自由基产生、抗氧化酶活性及细胞膜电位变化。结果显示,处理质量浓度低于400 mg/L时,细胞增殖活性差异不显著(P0.05),处理质量浓度为400,800mg/L时,细胞活性下降(P0.05);处理质量浓度低于400 mg/L时,Cu2+质量浓度与细胞内T-SOD、GSH-Px、CP活性呈正相关,与MDA、NO含量呈负相关,质量浓度达400mg/L及以上质量浓度时,结果相反。随着Cu2+质量浓度的增加,细胞膜电位下降(P0.05)。以上结果表明,适量的铜含量对细胞内的抗氧化酶活性具有促进作用,但高铜可能促使细胞活性下降,自由基产生增多,细胞膜电位下降。     

多模态MRI对血清AFP阴性肝细胞癌诊断的价值

目的探讨多模态MRI在血清AFP阴性肝细胞癌诊断中的应用价值。方法选取100例肝细胞癌患者,根据血清AFP测定结果将其分为血清AFP阴性肝细胞癌组(血清AFP20μg·L~(-1))40例及血清AFP阳性肝细胞癌组(血清AFP≥20μg·L~(-1))60例,比较2组常规MRI征象(形态不规则、信号不均匀、坏死信号、病灶内伴发出血、病灶伴发转移、血管受侵)、增强MRI征象(快进快出、快进缓出、缓进缓出)、三期增强信号值差值(动脉期、门脉期、延迟期)、多b值磁共振弥散加权成像对应表观弥散系数(50、100、200、400、600、800 s/mm~2)、病理分化结果(高分化、中分化、低分化)。结果血清AFP阴性肝细胞癌组常规MRI征象占比均小于血清AFP阳性肝细胞癌组,差异有统计学意义(P0.05)。2组增强MRI征象相比较,缓进缓出占比差异无统计学意义(P0.05);血清AFP阴性肝细胞癌组快进快出占比小于血清AFP阳性肝细胞癌组,快进缓出占比大于血清AFP阳性肝细胞癌组,差异有统计学意义(P0.05)。2组三期增强信号值差值相比较,动脉期数值相接近,差异无统计学意义(P0.05);血清AFP阴性肝细胞癌组门脉期、延迟期均大于血清AFP阳性肝细胞癌组,差异有统计学意义(P0.05)。2组多b值磁共振弥散加权成像对应表观弥散系数随着b值的增加均呈现出下降趋势,差异有统计学意义(P0.05);血清AFP阴性肝细胞癌组均大于血清AFP阳性肝细胞癌组,差异有统计学意义(P0.05)。2组病理分化结果相比较,中分化占比差异无统计学意义(P0.05);血清AFP阴性肝细胞癌组高分化占比大于血清AFP阳性肝细胞癌组,低分化占比小于血清AFP阳性肝细胞癌组,差异有统计学意义(P0.05)。结论在血清AFP阴性肝细胞癌诊断中多模态MRI应用效果较好,可为鉴别血清AFP阴性及血清AFP阳性肝细胞癌提供可靠的影像学依据,具有临床推广应用价值。     

Study on Liver-protective Effect of Chinese Herbal Compound Probiotics on Acute Liver Injury Layers

This experiment was conducted to investigate the liver-protective effect of Chinese herbal compound probiotics (CHCP) on acute liver injury layers.One hundred and eight 1 day old hens were divided into 4 groups with 3 replicates in each group and 9 layers per replicate in trial 1.The layers in model groups Ⅰ to Ⅲ were gavaged with 10% (V/V) soybean oil solution of carbon tetrachloride (SCCl₄) according to 1,2 and 4 mL/(kg·BW) at 14,28 and 35 d,respectively.The layers in control group were gavaged with 2 mL/(kg·BW) soybean oil.In trial 2,sixty 1 d layers were divided into 5 groups:Control group (soybean oil),model control group(SCCl₄)and low-dose,middle-dose and high-dose CHCP group (SCCl₄+1‰ CHCP,SCCl₄+2‰ CHCP and SCCl₄+4‰ CHCP respectively).CHCP were used by drinking water since 7 days.SCCl₄ were gavaged according to 2 mL/(kg·BW) at 14 and 28 d.The results showed as follows:The model of layers liver damage could be built by intragastric administration of 2 mL/(kg·BW) 10%(V/V) SCCl₄ at 14,28 d respectively,with the signs of hepatic steatosis,severe vacuolar degeneration,nuclear condensation and necrosis.Compared to the model control group,the serum AST levels in low,medium and high dose CHCP groups were decreased by 4.35% (P > 0.05),7.57% (P > 0.05) and 9.79% (P < 0.05),the serum ALT levels in medium and high dose CHCP groups were decreased by 34.92% (P < 0.01),36.51% (P < 0.01),the serum total bilirubin content in medium and high dose CHCP groups were decreased by 25.49% (P < 0.01),27.45% (P < 0.01).The liver cell congestion was reduced to varying degrees in different dose CHCP groups,and the liver cell had no vacuoles,arranged in neat rows,abundant cytoplasm and uniform in different dose CHCP groups.In conclusion,2‰,4‰ CHCP could reduce hepatocyte necrosis,decrease the serum activities of ALT,AST and total bilirubin levels,and had protective effect on hepatic injury induced by SCCl₄.     

非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响

在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。结果显示,NEFAs作用肝细胞9h后,与对照组相比,高浓度NEFAs(1.8mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著增加(P<0.05),IL-6的mRNA表达水平在2.4mmol/L时极显著增加(P<0.01),低浓度NEFAs(0.6、1.2mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);并且TNFα、IL-1β的活性在NEFAs浓度达到1.8、2.4mmol/L显著高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性作用,IL-6的活性在在NEFAs浓度达到1.8mmol/L显著高于对照组(P<0.01),在2.4mmol/L也高于对照组,但差异不显著。结果表明,高浓度NEFAs在一定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应,可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。     

我国科学家揭示小型猪脂肪肝致病机制

<正>日前,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所猪基因工程与种质创新团队,在小型猪脂肪性肝细胞和分子机制方面的最新研究成果受到国际关注。其研究论文于3月11日被国际著名医药研究资讯公司——环球医药(GMD)选为关键科学文章。据杨述林副研究员介绍,非酒精性脂肪肝是当前世界范围内的常见病、多发病,严重影响人     

丹参对奶牛脂肪变性肝细胞NF-κB和CYP450表达的影响

为探讨丹参对脂肪变性奶牛肝细胞的作用机制,采用胶原酶两步灌流法分离培养奶牛肝细胞,不同浓度DL-乙硫氨酸处理,油红染色观察其脂滴数量,MTT法测定肝细胞的活性,生化法检测TG含量。用不同浓度的丹参处理变性肝细胞后,生化法检测ALT、AST、TG、SOD、MDA的含量或活性,ELISA法测定TNF-α的含量,Western blot法检测NF-κB和CYP450的蛋白表达水平。结果显示,筛选出2 mmol/L的DL-乙硫氨酸作用24 h作为体外造模的最佳条件。用丹参处理后,能降低ALT、AST、TG和MDA的活性或含量,抑制TNF-α的释放,增加SOD活性。随丹参浓度增加和处理时间的延长,CYP450的表达呈逐渐降低的趋势。24 h时,丹参对NF-κB的表达无明显影响;48 h时,随丹参浓度的增加,NF-κB的表达呈逐渐降低的趋势。这表明丹参对奶牛脂肪肝有一定的治疗作用,其作用机制与促进脂质代谢、抑制肿瘤细胞坏死因子、抗脂质过氧化及降低NF-κB和CYP450的表达密切相关。