长寿花叶盘离体培养及植株高效再生研究

以长寿花叶盘做为外植体进行再生体系的建立,通过一定的激素组合诱导,结果表明MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L组合愈伤组织诱导率可达86.6%,再生率达83.3%,外植体叶盘的摆放方式也对再生有显著影响,叶盘叶面向上放置,有利于其再生,反之不利于再生。加入AgNO3(4.0mg/L)溶液,对芽苗的分化有影响,再生苗开瓶练苗一周后容易生根,移苗入土后生长正常。     

CCC对葡萄试管苗生长的影响

ＣＣＣ对葡萄试管苗的茎叶生长有显著的抑制作用，茎的高度、节数及节间长度均有明显减少；ＣＣＣ对生根率没有明显影响，但对插段的生根数量有较大的影响，在一定浓度范围内（２０～８０ｍｇ／Ｌ）ＣＣＣ处理的生根数量有所增加，其中以４０ｍｇ／Ｌ时增加最多，为８．６７～８．９５条／段。但ＣＣＣ对根系伸长有明显的抑制作用，随着ＣＣＣ浓度的升高根长逐渐变短；从干、鲜重的变化来看，ＣＣＣ处理后墓叶的干、鲜重是随着浓度的升高而减少，但根系的干、鲜重在０～４０ｍｇ／Ｌ范围内呈略增加的趋势，４０ｍｇ／Ｌ以后则大幅度减少。     

肥城桃组培苗诱导、基因转化及其增殖

红里、白里是肥城桃的两个优良品种,但不耐贮藏。为试图利用基因工程解决这一问题,先通过组培将其胚、胚乳、子叶的愈伤组织分别诱导再生植株和芽剥离出茎尖培育成苗。再将肥城桃反义PG基因,通过农杆菌介导转化组培苗,转化苗在含卡那霉素培养基上筛选,获得抗卡那霉素的转基因苗。用研制的增殖培养基培养4～7周,一个苗可生长出14～18分枝的苗,解决了转基因苗获得率低的问题,也满足了对转基因株系进行检测和从组培室到温棚到田间果园过渡栽培和芽接的需求,提高了繁育速率。     

新几内亚凤仙组织培养和快繁技术研究

选取新几内亚凤仙具有顶芽或腋芽的茎段为外植体,诱导芽体萌发,进行繁殖培养。通过实验对比分别筛选出诱导芽分化和诱导生根的最佳培养基。实验结果表明：不同的激素水平对几内亚凤仙组培苗的生长有着显著的影响。其中最适宜的分化培养基为MS＋6-BA0.5 mg/L＋NAA0.1 mg/L;最适宜的生根培养基为1/2 MS＋IAA0.5 mg/L;最适宜的栽培基质为蛭石＋草炭＋珍珠岩（5∶3∶2）,成活率为95%。     

银条茎尖玻璃化法超低温保存及其植株再生

 为长期稳定保存银条种质, 建立了玻璃化法超低温保存其茎尖的技术体系。选择继代4次的 银条无菌壮苗, 5 ℃低温驯化14 d; 剥取5 mm的茎尖, 在含有0.5 mol·L ^{- 1}蔗糖的MS (无Ca^{2 +} ) 液体培养基预培养1 d; 25 ℃条件下经改良MS + 2PVS₂装载20 min; 在- 20 ℃, 95%乙醇浴中以PVS₂脱水处理4h; 更换新鲜的PVS₃后投入液氮, 保存24 h后取出冷冻管在40 ℃水浴中化冻1 min; 以含有1.2 mol·L ^{- 1}蔗糖的改良MS (无Ca^{2 +} ) 溶液洗涤2 次, 每次10 min; 冻存后的茎尖相对存活率超过70%。将冻存后的茎尖转接到再生培养基上, 暗培养20 d后转入正常光照条件下培养, 存活率达63.7%; 继续培养得到正常分化和生长的再生植株, 生根后可移栽成活。     

Somatic embryogenesis and regeneration of five multipurpose cassava landraces extensively integrated in African cropping system

Successful development and adoption of transgenic cassava (Manihot esculenta Crantz) varieties in Africa depend on in vitro regeneration of landraces because of their agronomic value and amenability to genetic modification. The study investigated somatic embryogenesis from axillary bud and immature leaf-lobe explant and regeneration via shoot organogenesis in five cassava landraces. Landraces exhibited significant (P < 0.05) differences in frequencies of primary somatic embryo production, number of embryos per explant, and frequency of secondary embryos. The frequency of primary somatic embryogenesis ranged from 7.8 to 14.5%, whereas the number of embryos per explant varied from 5.3 to 10.6. However, only frequency of primary somatic embryos and number of embryos per explant showed significant (P < 0.05) differences when immature leaf lobe was used as explant. The frequency of primary somatic embryogenesis ranged from 42.7 to 49.2%, whereas number of embryos per immature leaf-lobe explant varied from 9.5 to 15.2 per explant. Secondary embryogenesis was cultivar-independent in the case of immature leaf-lobe explant. Cyclic and green (mature) embryogenesis showed no significant (P < 0.05) landrace differences in both axillary bud and immature leaf-lobe explants. Shoot regeneration from cotyledon of somatic embryos had significant (P < 0.05) landrace differences. The mean shoot-bud formation frequency of axillary bud and immature leaf-lobe explants was 51.4% and 37.2%, respectively. Root formation was efficient, with greater than 70% of shoots forming root in all landraces. Similarly, landrace differences were detected for the survival of acclimatized regenerated plants, with a mean of 94.7% for both explants. In conclusion, somatic embryos were produced from immature leaf and axillary bud explants of the landraces and the embryos were converted to plantlets via shoot organogenesis.     

水稻花培一次成苗的研究──Ⅱ．影响水稻花培一次成苗各主要因素的探讨

影响水稻花培一次成苗的主要因素为：（１）基本培养基、激素配比和基因型对一次成苗有重要作用．基本培养基以Ｎ′６的为最好；激素配比以２，４—Ｄ０．０２＋ＮＡＡ２．５０＋ＫＴ４－６ｍｇ／Ｌ为佳；３种基因型一次培养的绿苗率大小顺序为粳型品种Ｃ５７＞籼粳交（早香１７×Ｃ５７）杂种Ｆ１＞籼型品种早香１７．（２）培养基保持ｐＨ值５．８、蔗糖浓度８．５％，并添加丝氨酸、脯氨酸、精氨酸、天冬氨酸、丙氨酸各４０ｍｇ／Ｌ和谷氨酰胺４００ｍｇ／Ｌ，所获一次培养的绿苗率最高；添加０．１％活性炭的有抑制作用．（３）低温（９－１０℃）预处理对一次成苗有重要作用．早香１７以预处理５－１０ｄ的为宜，Ｃ５７以１０—１６ｄ的较好．恒温处理优于变温处理的．高温（３０℃）预培养的作用不大．接种后进行暗培养对一次成苗有利．     

冬性小黑麦花药培养的基因型和培养基效应的研究

为提高冬性小黑麦的花药培养效率,以5个冬性小黑麦杂交组合的F1为材料,分别接种到四种培养基上,研究了冬性小黑麦花药离体培养中不同基因型和不同培养基以及不同培养条件对花药培养效率的影响。结果表明,基因型差异和培养基差异对愈伤组织的诱导有显著影响,不同基因型对花药的愈伤组织的再分化频率也有显著影响。对冬H329转分化后的愈伤组织进行了4℃的低温处理,不同的处理时间对绿苗分化率也有一定的影响,处理96 h绿苗分化率最高达22.22%。     

高秆野生稻(Oryza alta L.)叶片组织培养中通过胚状体获得再生植株

高秆野生稻叶片可诱导出胚性和非胚性2种愈伤组织。胚性愈伤组织在合适的分化培养基上可不断形成胚状体,进而大量获得再生植株,再生植株以绿苗为主,未见绿白嵌合苗。源于不同脱分化培养基的胚性愈伤组织具有相似的胚状体形成和植株再生能力。诱导胚性愈伤组织以N6培养基添加NAA1 mg/L、2,4-D2 mg/L和ZT0.5 mg/L效果最好,形成胚状体并分化植株以MS培养基添加NAA2 mg/L和IAA0.5 mg/L为佳。     

赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响

【目的】完善花生离体再生繁殖体系,为花生的遗传转化提供技术支持。【方法】以桂花系列花生品种为材料,以胚小叶为外植体,MS＋10mg/L2,4-D为体细胞胚诱导基本培养基,MS＋3mg/L6-BA＋0.8mg/LNAA＋（0～15mg/L）GA3为苗诱导基本培养基,研究光照、赤霉素和基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响。【结果】在光暗比14∶10条件下,花生体细胞胚诱导率明显高于全黑暗培养,体细胞胚诱导率增加7.5～37.5个百分点。在不同花生品种中,桂花26体细胞胚诱导率最高,达62.8%,桂花833最低,为21.7%。在成苗培养基中添加5～15mg/LGA3利于提高体细胞胚的成苗率。桂花26和桂花771在5mg/LGA3处理下成苗率最高,分别为42.8%和35.3%;桂花836、桂花1026、桂花833在15mg/LGA3作用下成苗率最高,分别为38.7%、33.3%、26.4%。所有品种与GA3组合中,以桂花26与5mg/LGA3组合成苗率最高,其次是桂花836与15mg/LGA3组合。【结论】适宜的光照条件有利于花生体细胞胚的发生;成苗培养基中添加GA3利于促进体细胞胚诱导成苗;桂花26和桂花836是体细胞胚诱导植株再生较理想的材料。