花生小叶外植体植株再生及农杆菌介导的基因遗传转化

鄂花四号、中花四号和豫花一号萌动４ｄ的小叶作外植体，通过器官再生在ＭＳ培养基加３ｍｇ／ＬＢＡＰ和１ｍｇ／ＬＮＡＡ上诱导芽分化，转至ＭＳ加５ｍｇ／ＬＢＡＰ上诱导芽伸长，再生植株。芽诱导率为８６％～１００％，每个外植体平均再生５个植株。在培养基中加入１ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３和５００ｍｇ／Ｌ羧苄青霉素能有效抑制愈伤褐化和死亡，并能提高植株再生率。萌动４ｄ的小叶与农杆菌ＡＧＬ１分别共培养２ｄ，通过在再生培养基中加卡那霉素筛选，获得转基因再生植株，转基因植株生根后，移栽网室生长，并已开花结荚。外源基因的表达通过卡那霉素抗性和Ｇｕｓ活性组织化学检测得到证实。     

Analysis of Leaflet Shape and Area for Improvement of Leaf Area Estimation Method for Sago Palm (Metroxylon sagu Rottb.)

Abstract

Leaf area of sago palm (Metroxylon sagu Rottb.) can not be estimated accurately from the whole leaf shape, and individual leaflet area must be measured for accurate estimation of leaf area. In this study we examined leaflet characteristics in detail and developed a method of estimating individual leaflet area. Shapes of all leaflets were similar regardless of their sizes. The leaflet width was maximal at the distal position around 30 ～40] from the leaflet base. Products of leaflet lengths and maximum widths (as the X-axis) showed almost a linear relationship with the leaflet areas measured with a leaf area meter (as the Y-axis). Moreover, the Y-intercept of the primary regression equation was very small compared to leaflet area values, and we can regard it as 0. We compared the measured leaflet area with the area of the ellipse with the leaflet length as the major axis and the maximum width as the minor axis. The difference between them was within±15] except for some leaflets at the base or tip of the leaf. These results suggested that the method of estimating leaflet area from the ellipse area calculated from the leaflet length and the maximum leaflet width as major and minor axes, respectively was simple and accurate. The estimation equation for the leaflet area is S(e)=0.785 L_leaflet×W_leaflet, where S(e) is the estimated leaflet area, L_leaflet is the leaflet length, and W_leaflet is the maximum leaflet width.     

豌豆小叶突变基因(af)的遗传及其育种利用

 以半无叶类型、普通类型豌豆为试验材料 ,对小叶突变基因、子叶颜色基因和初花节位基因的遗传距离进行了研究。结果表明 ,小叶突变体性状受单基因控制 ,呈完全隐性 ;小叶突变体基因af、子叶颜色基因i、初花节位基因lf表现为连锁遗传 ,且位于第一染色体 ;测得小叶突变体af基因和子叶颜色基因i之间的遗传距离为 6 .71个遗传单位 ,小叶突变体af基因和初花节位基因lf的遗传距离为 44 .44个遗传单位 ,3对基因之间的顺序为lf、i、af。af基因在育种上有重要的利用价值 ,利用af基因已培育出超高产、优质豌豆新品种宝峰 3号。     

花生胚小叶外植体再生影响因素研究简报

胚小叶外植体再生是进行花生外源基因遗传转化的重要途径之一。研究表明,品种对花生胚小叶外植体再生有较大影响,BA／NAA比值与愈伤组织诱导、芽再生数量及速度关系密切,发芽势强的花生品种宜用低BA／NAA比值的MS培养基,发芽势弱的品种则宜用高BA／NAA比值MS培养基。     

多效唑对大豆不同叶型近等位基因系产量和品质的影响

在大田条件下,以2对不同叶型近等位基因系大豆品系A31和6059为材料,于始花期叶面喷施不同浓度的多效唑来研究不同叶型大豆品系对多效唑的反应.结果表明:始花期叶面喷施不同浓度的多效唑对大豆有显著的增产作用,同时还改善了叶片的生理功能和产量性状.此外,籽粒蛋白质含量得到了提高,脂肪含量降低.不同叶型品系对多效唑的反应不同,表现为圆叶品系的增产效果好于尖叶品系.     

小麦幼叶DNA微量快速提取方法的改进

为满足对大批量材料进行分子标记检测的需要,以小麦幼叶为材料,探索了在液氮和无液氮条件下提取DNA方法的改进.结果表明,改进提取法Ⅰ(用液氮)中,水浴中加KCl抽提一次便可得到质量较好的DNA,且液氮用量是常规提取法的1/40～1/30;改进提取法Ⅱ(无液氮)中,水浴后加KCl比水浴前加KCl及不加KCl的RNA含量和杂质含量低,OD260/OD280比值大,DNA浓度和纯度有所提高.两种改进方法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测都能得到质量较高的DNA图谱,又经SCAR-PCR扩增均能得到2条片段大小相同的条带.     

花生胚小叶的离体再生及筛选压力选择

以花生胚小叶为外植体,优化离体再生条件,通过对再生苗进行筛选,为外源基因的遗传转化提供实验依据。研究表明,不同基因型胚小叶的再生能力差异显著,在供试基因型中中花8号不定芽诱导率和成苗率最高,且外植体状态最好。中花8号胚小叶再生的最佳诱导培养基为MSB + 6-BA（4.5mg/L）+NAA（1mg/L）+AgNO3（2mg/L）,最佳诱导培养时间为21d。对中花8号再生苗进行筛选浓度实验,草丁膦（PPT）为20mg/L时,可筛选出抗性苗;300mg/L的卡那霉素（Km）可用于较小幼苗筛选,而对较大幼苗则需将Km的浓度提高至400mg/L以上。     

花生幼叶芽诱导和植株再生研究

从萌发9－10d的花生幼嫩叶片上切取中段作外植体，接种MS＋BA 3mg/L NAA 0.8mg/L AgNO3 2mg/L诱芽培养基，12－14d后产生丛生芽点，芽诱导率达78．9％，平均每外植体产生9个丛生芽。4周后转至MS BA 3mg/L AgNO3 2mg/L诱导芽伸长，诱导生根后获得再生植株。     

不同叶型大豆的器官平衡与产量

采用一对叶型不同的姊妹系“辽99116”的尖叶型和圆叶型大豆品系,分别在盆栽和田间条件对不同叶型大豆品系的器官平衡与产量的关系进行比较研究.结果表明:无论在盆栽还是田间条件下,尖叶型大豆品系的器官平衡比圆叶型更趋于合理.尖叶型的经济系数在盆栽和田间条件下均高于圆叶型,但尖叶型大豆品系在田间栽培条件下的生物产量和籽粒产量...     

大豆叶调位运动的研究——Ⅰ.大豆叶运动与叶面受光

本研究通过盆栽试验于大豆R_5时期,在晴天(f)和阴天(c)条件下,对大豆叶运动与叶面受光的研究结果表明,大豆各方位的叶数(％),晴天时,西和西南高于东和东北;阴天时,东西水平线以南各方位叶数(％)大致相近。还看出,不论晴阴天时,东西水平线以南高于以北。大豆叶片倾斜方向,主、副倾角,晴天时的叶数(％)正向>负向;阴天时,相反。大豆叶片倾斜角度,主、副倾角,晴天时,正向>负向,阴天时,相反。大豆叶面受光,晴天群体光照强度处于20～30KLx,阴天4～6KLx,多数未达光饱和状态。从叶片分布方位,叶片倾斜方向、角度和叶面受光关系看,在晴天时,由于太阳高度和位置变化,直射光多,主、副倾角正向角度大。为充分利用光能,大豆叶由东南向西南作调位运动。本研究进一步证实了叶枕中钾的含量增高时对叶片直立和扭曲起调节作用。