柱花草叶肉原生质体提取与瞬时表达体系构建

柱花草(Stylosanthes guianensis)是一种重要的热区豆科牧草,为利用原生质体瞬时表达体系开展柱花草基因功能研究,以20 d龄期‘热研5号’柱花草子叶为试验材料,通过正交试验考察不同因素对原生质体分离及转化效率的影响。结果表明：采用1.5%纤维素酶、1.25%离析酶、0.5 mol·L^-1甘露醇和4 mmol·L^-1MES酶解液组合,酶解时间为16 h时,原生质体的产量和活性均达到最佳,分别为(4.567×10⁶)个·g^-1和92.271%;原生质体浓度为(6×10⁵)个·mL^-1、质粒浓度为0.6μg·μL^-1,PEG-4000浓度为50%、转化时间为5 min时,转化效率最高,可达52.524%。构建了目标蛋白SgRKL1表达载体pA7-BIUTNT::SgRKL1-GFP,利用PEG介导法将其转入柱花草原生质体,激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示SgRKL1蛋白定位于细胞膜上,说明所建立的柱花草叶肉原生质体瞬时表...     

适用于转录组测序的大麦胚芽鞘保卫细胞分离方法优化

为获取高质量的大麦幼苗胚芽鞘保卫细胞以进行转录组相关研究,以大麦品种Morex的幼苗胚芽鞘为实验材料,分别对胚芽鞘表皮条撕取方法和保卫细胞分离方法进行优化。结果表明,通过"刮压"技术,不仅可以获得完整的大麦胚芽鞘表皮条,而且缩短了获取的时间;利用纤维素酶R-10与离析酶R-10制备酶解液,同时在酶解液中加入转录抑制剂,并结合表皮条"穿孔"进行辅助酶解,发现酶解温度为30℃、酶解时间为水浴1.5 h时,可以获取大量具有活性的大麦胚芽鞘保卫细胞。     

鱿鱼风味料的制备工艺研究

[目的]填补鱿鱼风味料的市场空白。[方法]根据味料同源原理,以酶解度、感官评定为指标,对鱿鱼酶解工艺进行优化。通过单因素试验,筛选出酶解效果较好的碱性蛋白酶和风味蛋白酶,并进行复合酶解正交试验。[结果]鱿鱼原料酶解的最佳反应条件为温度50℃,p H 6.0,时间6 h,加酶量0.2%,其中碱性蛋白酶与风味蛋白酶的比例为2∶1。此条件下酶解液酶解度为30.40%,感官评定无苦味,鱿鱼风味浓。[结论]该试验优化的工艺条件下可制得健康安全的海鲜调味品,为鱿鱼风味料的开发奠定了基础。     

酶法提高草莓出汁率的工艺优化

采用单一果胶酶处理草莓,通过正交试验优化酶解工艺,当加酶量0.04%、pH 4.0、酶解温度40℃、酶解时间60min时,草莓出汁率最高,为91.21%,比对照组(直接挤压榨汁)提高29.97%。采用复合酶(果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶)处理,草莓出汁率比对照组(直接挤压榨汁)提高30.94%,比单一果胶酶处理提高0.97%,复合酶解最佳条件为:果胶酶添加量0.04%、纤维素酶添加量0.03%、木聚糖酶添加量0.02%、β-葡聚糖酶添加量0.04%、酶解温度40℃p、H 4.0、酶解时间60 min。     

芹菜鲢鱼蛋白复合饮料的工艺研究

[目的]确定芹菜鲢鱼蛋白复合饮料的最佳复配条件。[方法]通过采用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶混合酶解鲢鱼蛋白,制取鲢鱼蛋白水解液,再经过脱腥、脱色、浓缩后,与芹菜汁复配成具有降血压、降血脂等功能的保健型复合饮料,研究鲢鱼蛋白水解液添加量、芹菜汁添加量、糖添加量、柠檬酸添加量对饮料感官性状的影响,通过正交试验确定该饮料的最佳复配条件。[结果]由正交试验获得饮料的最佳复配条件为：每100 ml饮料中鲢鱼蛋白水解浓缩液添加量20 ml,芹菜汁添加量12 ml,白砂糖添加量7 g,柠檬酸添加量0.20 g。此时,该饮料色泽成浅绿色,半透明,风味口感最好,组织状态均一稳定,无悬浮物或沉淀。[结论]该研究为鱼肉蛋白的深加工与利用提供了科学依据。     

扇贝裙边氨基酸营养粉的制备工艺研究

为了对扇贝裙边进行综合利用,本文选择由中性蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶3种酶组合成3对混合酶对扇贝裙边进行酶水解实验,以水解液中游离氨基酸态氮为考察指标,采用正交实验设计研究了加酶量、酶解时间、酶解温度及酶的种类对酶解效果的影响,从而优化了扇贝裙边的酶法水解工艺条件。以最佳水解工艺条件获得的酶解液经喷雾干燥制成的氨基酸营养粉,经检测,其粗蛋白含量为82.89%,粗脂肪含量为1.55%,总糖含量为6.82%。该氨基酸营养粉中氨基酸种类齐全,每100g粗蛋白中氨基酸总量达79.06%,其中游离氨基酸总量达51.53%。     

酶-超声波联合提取紫薯中花青素的研究

[目的]优化酶-超声联合提取紫薯中的花青素的提取工艺.[方法]采用酶-超声联合提取紫薯中的花青素,通过对酶的选择、单因素试验和正交试验,得出最佳工艺条件.[结果]试验得出酶-超声联合提取紫薯中的花青素的最优工艺：纤维素酶为处理酶,酶添加量8 mg/g,超声温度20℃,超声时间15 min,固液比1∶40 g/ml.将联合提取工艺与单一的酶解、超声提取进行对比,可知联合提取效果更佳.[结论]研究可为紫薯中花青素的开发利用提供参考依据.     

象拔蚌酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]探讨酶解象拔蚌蛤肉制备抗氧化肽的最佳工艺条件。[方法]采用复合蛋白酶对象拔蚌蛤肉进行酶解获得抗氧化肽,以羟自由基清除率及蛋白水解度为指标,通过单因素试验与响应面分析法对酶解工艺条件进行优化。[结果]象拔蚌蛤肉的最佳酶解工艺条件为料水比1∶11.11,加酶量3 000 U/g,酶解时间1.2 h,酶解温度55℃,pH 7.52;在该条件下,酶解液获得较高的蛋白水解度,同时对羟基自由基和DPPH自由基显示出很好的清除效果,其EC50值分别为11.26和37.75 mg/ml。[结论]该研究为象拔蚌保健食品的开发提供了依据。     

葡萄糖苷酶酶解香草兰的工艺条件优化研究

[目的]优化葡萄糖苷酶酶解香草兰的工艺条件。[方法]以香草兰为材料,研究葡萄糖苷酶酶解提取香兰素的工艺。在单因素试验的基础上选取试验因素与水平,设计3因素3水平的响应面分析法,依据回归分析确定工艺条件的影响因素,以香兰素含量为响应值作响应面分析试验。[结果]葡萄糖苷酶酶解香草兰的最佳工艺条件为:反应温度44℃,料液比1∶14 g/m L,加酶量16 U/g,香兰素含量实际得率为17.80 mg/g。[结论]葡萄糖苷酶可水解香兰素的前体物质,释放出香草兰中潜在的香气成分,从而大幅度提高香气成分含量。     

大豆蛋白酶解物的抗消化性及离子强度对其聚集的影响

分别采用体积排阻色谱和Folin-酚法测定了经酸性蛋白酶(蛋白酶M、胃蛋白酶)、中性蛋白酶(蛋白酶A、蛋白酶N)、枯草杆菌碱性蛋白酶Alcalase酶解后制得的大豆肽经过模拟体内消化之后分子量的变化,以及离子强度对酶解物聚合的影响.大豆肽的高效液相色谱体积排阻色谱图显示,50％左右的大豆肽的分子量集中在10～30 kD...