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为了探讨蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin-like protease)的表达特性,以真菌蛹虫草菌丝体为研究对象,通过RT-PCR获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列,并进行序列分析。应用Northern杂交和Real-time PCR方法,检测蓝光照射后蛹虫草菌丝体中CmKexin基因的转录情况。结果获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列。对翻译蛋白质产物CmKexin进行生物信息学分析,表明该蛋白质含1个属蛋白转化酶的肽酶S8家族功能域(143~429)和1个前体蛋白转化酶P功能域(514~600),符合真菌类枯草杆菌蛋白酶的特征。蛹虫草菌丝体在黑暗预培养4 d后再蓝光照射,Northern Blotting和Real-time PCR检测均可得到相同的结果,即在持续的蓝光照射48~50 h时,出现CmKexin基因的瞬时大量转录。而其他时间内均未检测到该基因的大量转录。试验结果将为蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶的利用提供理论依据。 相似文献
4.
通过对滇中地区昆明西山、昆明野鸭湖、嵩明大哨和楚雄紫溪山分布的蛹虫草居群,进行调查和采样,调查分析了蛹虫草的生境,比较研究了蛹虫草不同居群有性型及无性型形态差异,对蛹虫草无性型的产孢结构进行光学显微镜和扫描电镜观察研究。研究发现,蛹虫草子囊壳着生方式及其大小、子囊大小、无性型,随生境不同而发生差异。在云南松常绿阔叶混交林下的子囊壳及子囊较大,分离得到的无性型以拟青霉型(Paecilomyces-type)产孢结构占优势;在华山松林和田埂草丛生境中的子囊壳及其子囊较小,分离得到的无性型以轮枝孢型(Verticillium-type)产孢结构占优势。 相似文献
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为研究提取条件对冬虫夏草中虫草酸提取率的影响。以虫草酸提取率为考察指标,研究了提取方法、提取时间、提取温度、液固比对虫草酸提取率的影响。结果表明,提取虫草酸的最佳条件为:液固比为10∶1,提取温度为90℃,提取时间为1 h,在此条件下上虫草酸的提取率率为11.36%。利用Sevag法脱蛋白后经重结晶处理后,所得到的虫草酸纯度可达99.92%,这为进一步研究虫草酸的性质提供了物质基础。 相似文献
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通过比较19种大孔吸附树脂对虫草素的解吸附率并联用KB-2微球柱层析法优选出一种简单快捷分离纯化蛹虫草(Cordyceps militaris)培养基中虫草素的制备工艺。结果表明,经大孔吸附树脂XDA-8D吸附后,再用体积分数30%的乙醇解吸附,虫草素纯度从原料中的0.4%达到了10.53%;联用KB-2微球柱层析法分离虫草素,可将纯度提升至66.94%,其优化后的参数为:上样流速1.0 mL/min,上样浓度0.5 mg/mL,用300 mL(2VB)水和体积分数10%的乙醇450 mL(3VB)除杂,30%乙醇1500 mL(10VB)洗脱得到虫草素。 相似文献
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蛹虫草大米培养残基中虫草素提取方法的优化研究 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]优化蛹虫草大米培养残基中虫草素的提取方法。[方法]以蛹虫草大米培养残基为原料,根据虫草素的理化性质,采用不同提取溶剂、温度、时间和pH值,进行单因素试验设计,利用HPLC技术检测虫草素。[结果]结果表明,蛹虫草大米培养残基中虫草素含量为2.011—2.185g/kg。不同水浴时间和温度条件的提取值为1.316~1.968g/kg。培养基残基中虫草素含量与子实体的比较系数为99.1%~110.9%。不同pH值提取液提取虫草素分别提高2.15%-15.89%。残基中虫草素优化的水溶剂提取工艺条件为:时间60min、温度60℃、pH值2.0;高浓度虫草素在水溶液中可能会发生降解。[结论]该研究为蛹虫草固体培养基的深加工和再利用以及开发新的虫草素资源提供理论依据和技术指导。 相似文献