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《畜牧与兽医》2017,(6):120-124
为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。 相似文献
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植物组培快繁过程中 ,每一个环节都对苗木生产的数量、质量起制约作用。无论是污染的控制 ,培养基及培养条件 ,移栽及管理等 ,哪一个环节出现问题都将造成生产成本的提高 ,经济效益下降。故此认为对下述几个环节问题应严格要求与操作。1 母液的配制1.1 药品的称量 在称量药品前 ,对所配制母液所需的药品一一进行核对 ,称量要准确 ,避免漏称和重复。否则将造成大批试管苗生长不良 ,如无机营养元素母液配制出现错误 ,将导致草莓分化苗基部变红 ,分化和生长停滞 ;激素类出现错误 ,可导致分化苗不分化或愈伤组织大量产生等。1.2 铁剂的配制… 相似文献
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欧洲山杨三倍体Europen aspen trploid具有生长快、抗逆性强、材质好等特点,是颇有发展前途的树种。这一树种的引进,对扩大我省优良基因资源和发展速生山杨人工丰产林有重要的价值和意义。 欧洲山杨三倍体同其它山杨一样,无性繁殖极为困难,为了开发和利用这一优良基因资源,我们课题对该树种的繁殖方法作了一系列的探讨和研究。通过组织培养已基本解决了批量化的快速育苗,取得了满意的效果。我们在进行组织培养快速繁殖的同时,也进行了硬技扦插育苗和嫩枝扦插育苗试验,并取得很大的进展,但生根率最高尚在60×10~(-2)左右。为了使繁殖速度加快和提高生根率,节约资金,我们又做了试管苗扦插试验,使生根率最高达65.6×10~(-2),这一试验的成功为欧洲山杨三倍体大批量繁殖开辟了新的 相似文献
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苹果试管苗不定根起源及其发育状况的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
利用光学和扫描电子显微镜观察结果表明,经琼脂生根培养基诱导产生的长富—2苹果 (Malus pumila Mill.) 试管苗的不定根起源于维管形成层。这种不定根发育不良,根表面缺乏根毛,内部解剖构造为典型的初生结构。为避免因不定根吸收、运输能力差而影响试管苗移栽成活,宜采用通透性良好的基质进行瓶内或瓶外生根,可诱导出优质不定根。 相似文献
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