转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测

转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明：Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。     

果园常用农药（上）——生物源农药、特异性农药和矿物源农药

佳绿菜豆是宝鸡市农科所2002年从日本引进的一个高产矮生菜豆新品种，其荚形美观，早熟，优质，深受当地菜农的青睐。     

肠道M细胞形态结构

1974年,Owen在肠黏膜滤泡相关上皮(Follicle- associated epithelium,FAE)中发现了一种微皱褶细胞——M细胞。M细胞能特异性结合肠道大分子物质及微生物并将起摄取、转运至位于其下的APC进行识别、处理并激活T、B淋巴细胞,继而开启肠道黏膜免疫应答作用。对肠道M细胞形态结构的研究不     

鉴定果树种子生活力四法

1、形态鉴定法凡砧木种子大小均匀,籽粒饱满,千粒重较重,种皮有光泽,无霉变气味,无病虫危害,剥去种皮后,胚和子叶呈乳白色、不透明,压之有弹性、不出油的种子为有生活力的种子;反之,则为失去生活力或生活力极弱的种子。2、染色法将砧木种子浸入水中10~24小时,使种皮软化,然后细     

常见杀虫剂的分类与科学选用

目前,农药市场上杀虫剂种类很多,果农对各种农药的性质、杀虫机理、毒性及应用范围等不甚了解,时常出现错用农药问题,造成经济损失.为此,对果树生产上常见的杀虫剂进行了分类和性状阐述,供广大果农选用时参考. 1有机磷类杀虫剂 剧毒和高毒:甲拌磷(3911)、对硫磷(1605)、甲基对硫磷(甲基1605)、久效磷、磷胺、甲胺磷、杀扑磷(速扑杀、速蚧克)、水胺硫磷、氧乐果等.中低毒:敌百虫、敌敌畏、辛硫磷、乐果、马拉硫磷(马拉松)、乙酰甲胺磷、三唑磷、毒死蜱(乐斯本、氯吡硫磷)、丙嗅磷、倍硫磷、杀螟硫磷(杀螟松)、喹硫磷(爱卡士)、哒嗪硫磷、氯唑磷(米乐尔)等.     

应激对家兔的危害及其预防措施

1 何为应激?应激是动物机体对外界或内部的各种非常刺激所产生的非特异性应答反应的总和，分为三个阶段：惊恐阶段或动员阶段、抵抗阶段和衰竭阶段。     

微生态制剂的作用机理及应用

动物微生态制剂是根据动物微生态学基本原理研制而成，用于调节动物机体微生态平衡，具有直接通过增强动物对肠内有害微生物的抑制作用或非特异性免疫功能来预防疾病的特点，是促进动物生长或提高饲料转化率的一类药物或饲料添加剂。由于它是由正常菌群微生物所制成的生物制品，因此称为活菌剂或生理菌苗。     

猪应激综合症防制对策

猪应激综合症是指猪机体受到各种非特异性有害因素的刺激而产生机能障碍和防御性应答反应。凡是能对猪健康产生不利影响的因素称为应激源或应激因子。应激不是一种病,但却是一种或多种病的发病原因,可致猪死亡或使猪生产性能下降,抗病力降低、各种免疫失败等。随着集约化、规模化猪场的逐步扩大与选育程度的提高,长期的全封闭管理造成了猪抗逆能力差,应激反应大,给养猪生产带来不少损失,应引起高度重视。1发病机理猪受到应激源刺激时肾上腺皮质激素分泌加强,加速了体内糖源和脂肪的分解,蛋白质解体,猪的生长发育受阻,生长速度减缓或停滞,甚…