猪唾液素黏附素胞外区在PRRSV感染PAM细胞中的作用

采用新的试验方法制备出纯度较高的抗猪Sn的鼠纯化IgG,并证实此种抗体可以阻碍PRRSV感染PAM,为研究猪Sn各结构域的作用提供参考,为进一步研究PRRSV侵入宿主的作用机制奠定基础。本试验分8个片段克隆猪Sn胞外区功能结构域(第2~17结构域),并分别构建重组表达质粒,转化到BL21进行诱导表达。通过优化蛋白表达条件,制备其重组蛋白,将8种重组蛋白混匀后制成混合抗原(SnE)免疫小鼠以制备其多克隆抗体血清,用间接ELISA的方法检测高免血清的效价,分离并收集血清。采用硫酸铵盐析与DE-52离子交换层析相结合的方法提取并纯化血清,得到纯度较高的鼠抗猪SnE抗体。无菌灌冲猪肺脏收集原代PAM至24孔培养板中,培养6h后,用抗Sn150(第1结构域)、SnE和Sn150+SnE等抗原的鼠纯化IgG以及鼠阴性IgG和PBS分别处理PAM,1h后用200CID50PRRSV感染PAM,分别在感染24、48h后用已建立的PRRSV实时荧光定量PCR方法检测感染细胞的病毒拷贝数。结果显示,PRRSV感染24h和48h时后,鼠抗猪Sn150抗体组的PRRSV mRNA拷贝数与阴性IgG组相比较均差异较小(P0.05);而鼠抗猪SnE抗体和Sn150+SnE混合抗体组的PRRSV mRNA拷贝数均显著低于对应的阴性IgG组,且鼠抗猪SnE抗体组24h和48h时PRRSV mRNA拷贝数分别是阴性IgG组的0.75倍(P0.001)和0.74倍(P0.001),Sn150+SnE混合抗体组24h和48h时的PRRSV mRNA拷贝数分别是阴性IgG的0.83倍(P0.01)和0.76倍(P0.001)。结果表明,鼠抗猪SnE抗体和Sn150+SnE混合抗体封闭后PRRSV感染PAM的能力降低,且效果显著,提示PRRSV的吸附和内吞作用可能与pSn整个胞外区都有密切的关系。     

兔血清唾液酸含量的测定

唾液酸(Sialic acid,SA)又称N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,NANA),是一族化合物的总称。SA是一类含有9个碳原子并具有吡喃糖型结构的酸性氨基糖[1]。早在1936年Blix等首次从牛颌下腺分离出SA以来,人们对SA的结构、分布、代谢、     

也评禽流感的『饥饿疗法』

正现在市场上盛行一种禽流感的"饥饿疗法",且受到一些蛋鸡养殖场和基层兽医人员的推崇。在此笔者也想谈一下自己的观点,与各位讨论。大家都知道禽流感病毒的血凝素HA蛋白裂解为HA1和HA2两个部分是病毒具备感染性和侵入细胞复制的首要条件。流感病毒依靠其HA1吸附到宿主细胞的唾液酸糖蛋白受体上,然后通过受体介导的内吞     

New Extracellular Bacillus subtilis Lectins with Sialic Acid-Specificity

The purpose of this work is to perform a detailed study of carbohydrate specificity of the new extracellular bacilli lectins which is considered to determine mechanisms of the lectins action. Sources of lectins were bacterial strains from Ukrainian collection of microorganisms. The optimized protocol of bacilli lectins isolation and purification included precipitation with ammonium sulfate with subsequent gel filtration chromatography on Sepharose CL-6B. Hemagglutinating activity of bacilli lectins and their fine carbohydrate specificity to sialic acids and their derivatives as well as sialic asid-containing and asialic glycoconjugates were studied. The ability of extracellular bacilli lectins to discriminate a- and 13-conformation of carbohydrate molecule and the type of connection between the monomers was determined. Studied lectins showed the most affinity to glycoconjugates containing both types of sialic acids （N-acetylneuraminic acid （Neu5Ac） and N-glycolylneuraminic acid （NeuGc）） and it is supposed to be a basis of their diagnostic and analytical potential.     

血液病患者血清脂质结合唾液酸的测定

血液病患者血清脂质结合唾液酸的测定袁宇宁，周少雄，张阮章（广东医学院附属医院血液病研究室，湛江５２４００１）近年来有关血清脂质结合唾液酸（ＬＳＡ）作为一种恶性肿瘤的生物学标记的研究，国内外有不少报道［１］。研究表明，多种恶性肿瘤患者血清ＬＳＡ水平明显...     

A型流感病毒神经氨酸酶蛋白功能研究进展

A型流感病毒(IAV)的宿主谱广泛,对人类健康和畜禽养殖均构成严重威胁。神经氨酸酶(neuraminidase, NA)作为IAV囊膜表面主要的糖蛋白之一,在病毒的感染过程中至关重要,是常用的抗病毒药物作用靶点。以往关于NA蛋白的研究主要聚焦于其通过切割宿主细胞表面唾液酸与血凝素(hemagglutinin, HA)之间的α-2,6或α-2,3糖苷键以促进新生病毒粒子释放的功能方面,而近来不断有证据表明,神经氨酸酶蛋白在受体结合和宿主适应性方面同样发挥关键作用。论文综述了神经氨酸酶蛋白的结构特征,并对神经氨酸酶蛋白的酶催化活性、受体结合功能以及与HA蛋白的功能平衡方面进行了总结,以期为深入理解IAV感染的分子机制提供参考。     

禽源空肠弯曲杆菌LOS基因簇多态性及其cstⅡ基因功能

对277株禽源空肠弯曲杆菌进行LOS生物合成位点的基因簇进行分类,并以野生菌株CJ018(LOS classB)和CJ050(LOS classA)为模板构建cstⅡ基因突变株,进而用野生菌株及其突变株CJ018△cstⅡ和CJ050△cstⅡ对犬肾上皮细胞(MDCK)、非洲绿猴肾细胞(Vero)和人子宫颈癌细胞(Hela)进行黏附入侵试验。结果显示:89.17%试验菌株的LOS基因簇属于常见的6大类,其中Class A占2.17%、Class B占50.90%、Class C占6.14%、Class D占1.44%、Class E占14.44%、Class F占14.08%。成功运用电击法分别构建cstⅡ基因突变株,而且野生株和突变株CJ对细胞的黏附能力差异不显著(P≥0.062 0),而入侵能力差异显著(P=0.0000)。结果表明:含唾液酸化LOS的C.jejuni入侵细胞的能力显著强于含非唾液酸化LOS的C.jejuni。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要是通过与宿主细胞表面的特异性受体结合,利用细胞的内吞作用而感染易感细胞。作者对猪繁殖与呼吸综合征病毒相关受体的研究进行了综述,迄今已报道了5种独立的但功能相关的受体:硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素、波形蛋白、CD163和非肌肉肌动蛋白ⅡA。对受体的功能特性进行研究,将为PRRSV的感染机理和病毒性疾病的预防和治疗具有重要的意义。     

合生素对肉鸡生长性能、免疫器官指数、血清免疫指标及肠道菌群的影响

本试验旨在研究日粮中添加合生素对爱拔益加(AA)肉鸡生长性能、免疫器官指数、血清一氧化氮(NO)和唾液酸(SA)含量及肠道菌群的影响.将192只1日龄AA肉鸡随机分为对照组和合生素组,每组8个重复,每个重复12只鸡.对照组饲喂基础日粮,合生素组饲喂在基础日粮中添加500 g/t合生素的试验日粮.试验分前期(1～21 d)和后期(22～42 d),共42 d.结果表明,合生素极显著降低了肉鸡前期采食量和料重比及全期采食量(P<0.01),显著降低了后期采食量(P<0.05),但对增重没有显著影响(P>0.05);合生素对第42天肉鸡的胸腺和脾脏的发育有一定的促进作用(P>0.05);在一定程度上降低了后期肉鸡血清NO含量(P>0.05),显著提高了血清中SA含量(P<0.05);在一定程度上降低了空肠大肠杆菌的数量,提高了乳酸菌的数量(P>0.05).由本研究可知,肉鸡日粮中添加一定量的合生素可以改善肉鸡生长性能,增强免疫能力、促进肠道健康.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原,对PRRSV细胞受体的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、复制过程、致病机理和疫病预防及控制等一系列问题,细胞受体的研究已经成为目前PRRSV研究中的重要领域。论文从硫酸乙酰肝素受体、唾液酸黏附素受体、CD163分子、波形蛋白等方面综述了PRRSV细胞受体研究进展。