贯叶连翘提取物对流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ·TNF-α的影响

[目的]研究贯叶连翘提取物(HPE)对流感病毒感染小鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的影响。[方法]以流感病毒滴鼻感染小鼠,分别灌胃给药(贯叶连翘提取物高剂量组100 mg/kg、低剂量组50 mg/kg和病毒唑组10 mg/kg),0.2ml/次,2次/d,5 d后摘眼球放血处死动物,摘出全肺,低温条件下制成肺匀浆,离心后取上清采用双抗体夹心ELISA法观察小鼠治疗前后肺组织中IFN-γ、TNF-α的变化。[结果]与模型对照组相比,贯叶连翘提取物流感病毒感染小鼠肺组织中TNF-α显著降低(P<0.05),IFN-γ极显著升高(P<0.01)。[结论]贯叶连翘提取物对机体抗感染免疫有一定调节作用。     

贯叶连翘不定根悬浮培养的初步研究

为了给贯叶连翘不定根的大量扩繁提供可靠的理论依据,以贯叶连翘不定根为材料进行悬浮培养,对不定根生长的培养基种类、糖种类以及IBA浓度进行优化筛选,再通过观察贯叶连翘不定根的生长情况,测量其鲜物重和干物重,计算干物率和增殖系数,来确定最佳的悬浮培养条件。不同的培养基种类对贯叶连翘不定根的生长影响较大,MS对促进不定根生长的效果最好;蔗糖可明显增加贯叶连翘不定根的鲜物重和干物重,分别为8.29 g、0.46 g;当IBA浓度为1.0 mg/L时,贯叶连翘不定根的鲜物重﹑干物重﹑干物率以及增殖系数均达到最大值,分别为8.98 g﹑0.49 g﹑5.46%和13.97。贯叶连翘不定根在MS+IBA 1.0 mg/L,蔗糖作为其碳源的悬浮培养基中生长,增殖效果最好。     

贯叶连翘中金丝桃素纯化工艺研究

目的:本实验主要对金丝桃素的纯化工艺进行研究。方法:用无水乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素,再用大孔吸附树脂分离金丝桃素,后分别采用明胶水溶液法、pH值法及明胶水溶液+pH值法分离纯化金丝桃素。结果:采用明胶水溶液+pH值法样品中金丝挑素含量最高,平均含量为1.42%。结论:该方法操作简单,成本低廉,金丝桃素收率高,便于规模化生产。     

贯叶金丝桃的电子束辐照杀菌研究

研究电子束辐照贯叶金丝桃杀菌的可行性,为科研和生产中有效地应用该方法提供理论依据。辐照样品中微生物数量的测定依据《中华人民共和国药典》提供的方法;应用高效液相色谱检测有效成分金丝桃素和金丝桃苷含量;依据微生物存活对数与辐照剂量的线性关系,求得D10;采用目测、鼻嗅、品尝的评定方法,评定样品辐照前后的外部性状变化。结果表明:细菌、霉菌+酵母菌的D10值分别为2.91 kGy和4.69 kGy,霉菌和酵母菌相对于细菌对电子束有更强的耐受力,适宜的辐照加工剂量为4.5~6.5 kGy,经过辐照后,样品可以保存30~150 d,卫生指标仍达到国家药典中规定的中药粉剂微生物限度标准,金丝桃苷和金丝桃素的含量未发生显著变化。因此,利用电子束辐照贯叶金丝桃杀菌是一种行之有效的方法。     

大孔吸附树脂分离纯化贯叶连翘中的金丝桃素

以贯叶连翘粗提浸膏为材料,考察六种大孔吸附树脂分离纯化金丝桃素的性能。采用静态、动态吸附方法筛选树脂,以中压分离方法确定分离纯化的条件。结果表明:HZ-801树脂以其高吸附率、高洗脱率成为优选的分离填料,其最佳分离纯化条件为:进样液质量浓度为0.1125 g/m L,进样速度为5.0 m L/min、洗脱速度为20 m L/min,0~95%乙醇溶液梯度洗脱,金丝桃素的纯度为79.11%。HZ-801可以较好分离纯化金丝桃素,纯化工艺具有较大实践性及参考价值。     

野生及栽培贯叶连翘提取物中金丝桃素含量比较研究

针对目前国际上日渐重视金丝桃素的应用情况，建立了简单的高效液相色谱(HPLC)测定野生及栽培的贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量，回收率分别为98．6％和97．2％，相对标准偏差分别为1．2％和1．6％(n=4)。该法灵敏度高，最小检出量低，有良好的重现性和精密度。     

贯叶连翘ISSR-PCR反应体系的建立与条件优化

[目的]建立贯叶连翘的ISSR-PCR反应体系,并对其条件进行优化.[方法]以贯叶连翘基因组DNA为模板,用L16(45)正交试验设计系统分析引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、Mg2浓度、dNTP浓度和模板DNA浓度5种因素对贯叶连翘ISSR-PCR反应扩增结果的影响.[结果]正交试验设计的方法可以用于贯叶连翘1SSR-PCR反应体系的建立,经过优化得到贯叶连翘ISSR-PCR反应体系的最佳条件为:20μISSR-PCR反应体系中含10×PCR buffer,Mg2+浓度1.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶浓度50 U/ml,DNA浓度20 ng/μl,dNTP浓度250 μmol/L,引物浓度0.75 μmol/L.[结论]试验建立的贯叶连翘的ISSR-PCR反应体系重复性好、分辨率高,结果稳定可靠.     

陕川黔贯叶金丝桃居群的分析

对贯叶金丝桃在西南、西北数省10个不同分布地的居群进行了初步分析.金丝桃素分析用HPLC法,以宝鸡居群为高;金属离子分析用等离子体发射光谱法,以凤县居群离子组合较优.Fe离子的含量高于一般植物.     

贯叶连翘的离体培养与四倍体诱导

以贯叶连翘种子发芽后的无菌苗为外植体,进行了贯叶连翘的组织培养与四倍体诱导研究。结果表明,贯叶连翘的子叶和下胚轴具有较高的愈伤组织诱导率,在2,4-D 1.0 mg/L或NAA 0.5 mg/L配合6-BA0.5 mg/L使用,并添加500 mg/L CH时能提高愈伤组织诱导率,并提高愈伤的质量;分化培养基中添加6-BA0.5~1.0 mg/L和NAA0.05~0.1 mg/L的效果最好;培养基中添加0.5 mg/L 6-BA与500~800 mg/L CH能使丛生苗快速增殖,并生长粗壮,叶色浓绿;采用0.3%秋水仙碱溶液浸泡茎尖24 h,效果最佳,存活率28%,四倍体诱导率为6%。     

金丝桃素提取、分离方法的研究

目的:研究贯叶连翘中有效成分金丝桃素提取方法。方法:应用有机溶剂溶解法、薄层色谱法、紫外检测、高效液相色谱(HPLC)等方法探讨贯叶连翘中金丝桃素提取方法。结果:用石油醚除叶绿素、花青素,以丙酮为溶剂在60℃水浴中提取贯叶连翘中金丝桃素和酮类衍生物,在真空度为0.07MPa、温度为60℃水浴条件下浓缩。后用100-200目硅胶分离金丝桃素,钢瓶冻干,得含金丝桃素为1.08%深红色产品。