从腹泻金黄地鼠中分离出致病性大肠杆菌

从腹泻金黄地鼠中分离到 3株细菌 ,经染色镜检、生化反应鉴定和动物试验确证 :该菌为大肠杆菌。该试验为地鼠大肠杆菌的防制提供了流行病学资料与理论依据。     

菌根真菌液泡的分离及特性研究

从菌根真菌黑核菌（ＣｅｎｏｃｏｃｃｕｍｇｅｏｐｈｉｌｕｍＦｒ．）和鹅膏菌［Ａｍａｎｉｔａｍｕｓｃａｒｉａ（Ｌ．ｅｘＦｒ．）Ｐｅｒｓ．ｅｘＨｏｏｋ．］菌丝中，采用多元碱化合物诱导原生质体裂解方法，分离出细胞器──液泡。实验结果表明，在加磷的ＭＭＮＣ培养基中培养４—７天的菌丝经水解酶作用所释放出的原生质体具有较高的液泡化程度；液泡产率约为原生质体的５－１０％；细胞质特征酶葡萄糖－６－磷酸－脱氢酶活性测定结果证明了液泡的纯度；而等量原生质体和液泡中酸性磷酸酶及α－甘露糖苷酶活性的比较表明这两种酶主要存在于液泡中，因此，它们可以作为菌根真菌黑核菌和鹅膏菌液泡的特征酶。     

犬传染性喉气管炎病毒的分离及鉴定

用犬肾细胞 (MDCK)从疑似犬传染性喉气管炎病毒感染犬的急性期血清中分离到 1株病毒 ,经血凝试验、免疫电镜观察、中和试验、免疫荧光抗体试验、细胞培养特征观察和回归动物试验等鉴定 ,证明所分离的病毒为犬传染性喉气管炎病毒 ,命名为 BJ- JB- 3。     

山羊生精上皮细胞分离研究

采用四种酶法分离二月龄关中奶山羊生精上皮细胞,A组:胶原酶Ⅳ;B组:胶原酶Ⅳ +透明质酸酶;C组:胶原酶Ⅳ+透明质酸酶+胰蛋白酶与EDTA;D组:胶原酶Ⅳ+透明质酸酶+胰蛋白酶与EDTA+DnaseI。结果二月龄羔羊曲细精管主要包含Sertoli细胞、精原细胞和管周排列的肌样细胞。每 200mg睾丸实质收获生精上皮细胞总数 (×105 )A,B,C,D组分别为 6. 91±0. 68, 6. 67±0. 80, 5. 94±0. 81, 5. 74±0. 82;细胞存活率 (% )分别为 76. 82±3. 80, 75. 96±1. 61, 94. 19±2. 89, 92. 32±1. 97;圆形细胞比率 (% )分别为 17. 54±1. 68, 16. 70±1. 46, 23. 64±1. 72, 22. 90±2. 38;细胞贴壁率(% )分别为 5. 93±0. 36, 5. 81±0. 54, 26. 94±1. 54, 25. 00±1. 74。C,D组不但组织块解离效果及细胞离散程度均较A,B好,且原代培养细胞团块数少。多重比较C,D组显著优于A,B组 (P<0.05);C组与D组差异不显著(P>0.05),但与A,B组比较细胞存活率、圆形细胞比率及贴壁率差异极显著(P<0.01)。结论认为C组是较简单有效的山羊生精上皮细胞分离酶组合。     

一种快速大量提取禾谷类作物幼苗期总RNA的方法

为探索一种快速、大量提取禾谷类作物总RNA的方法,利用改良的热酚法提取禾谷类作物(玉米、水稻和小麦)幼苗期不同组织的总RNA,该方法在2.5 mL的离心管中进行,在提取缓冲液中增加了巯基乙醇,对传统的操作步骤进行了优化.提取的RNA质量较高,纯度检测表明RNA样品OD260/OD280在1.8～2.1之间,含量约为10 μg/μL.RT-PCR和Northern杂交结果表明RNA可以满足进一步分子操作的需要.     

马铃薯叶片原生质体的游离纯化

文章以马铃薯四倍体普通栽培品种Desiree、东农303和二倍体野生种S.pinnatisectum品系脱毒试管苗叶片为材料,研究了不同的酶组合、酶液浓度、酶解时间以及温度等因子对原生质体游离纯化的影响。结果表明,低温预处理有助于提高原生质体的产量;最佳酶液组合为纤维素酶1.0%+离析酶0.5%;对于四倍体栽培种较短的酶解时间(13 h)较为适宜,而野生种需要较长的酶解时间(18 h)。     

PRRSV国内流行毒株的分离鉴定及结构基因的分析

从国内发病猪场采集的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病料中,分离到8株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）。病毒分离培养表明,JS1-JS5第1代即可适应Marc-145细胞。GD1-GD3经Marc-145细胞3次-4次传代后出现明显的细胞病变。间接免疫荧光试验表明,8个分离毒株与抗PRRSV抗体均可出现特异性的胞浆荧光。它们对氯仿、甲醛、酸和碱均敏感。5-溴-2′-脱氧尿核苷对其无抑制作用。参照GenBank中已发表的PRRSV的序列设计了两对特异性引物,分别对所分离毒株进行部分nsp2基因和结构基因的扩增。发现JS1-JS5nsp2基因发生了部分缺失。选择JS1、JS5、GD3进行nsp2基因和结构基因的扩增和测序。序列分析结果表明,JS1、JS5和2006年以后国内分离到的高致病性PRRSV高度同源。GD3的Nsp2基因虽然没有发生第534位-第562位氨基酸的缺失,但与2006年以后分离的毒株一样,发生了第482位氨基酸的缺失。通过对3个分离毒株与其他国内分离毒株的结构基因序列进行系统进化分析发现,我国的PRRSV流行毒株可大致划分为两个亚型,JS1、JS5、GD3、CH-1a、JXA1、HUN4、SHH等属于一个亚型,BJ-4、CC-1属于另一个亚型。亚型间核苷酸序列同源性为91.2%-91.8%。     

常用聚合物(SBS)改性沥青稳定剂添加量的确定

本研究通过大量的试验阐明改性沥青制作设备加工核心均是如何将SBS充分的研磨、分散于基质沥青中,使之形成稳定的3维网状结构。但由于设备与工艺的不同会导致加工性能有所差异,所以投料的配比也是会有明显差距,据此根据现有的工艺情况及工程的重要性通过试验来确定物料最佳添加量。提出利用"离析试验"163℃、48h前后的软化点差值确定稳定剂添加量的观点。     

基于正交试验的春兰分株繁殖技术优化研究

为优化春兰分株繁殖技术,以NAA为处理试剂,以兰苗成活率为评价指标,采用单因素试验、正交试验优化春兰分株繁殖影响因素。结果表明：影响因素顺序为NAA浸泡时间＞浸泡浓度＞环境温度＞光照强度＞光照时间。根据正交试验K值可得,春兰分株繁殖影响因素最优组合为NAA浸泡浓度0.3mg/L、浸泡时间15min、环境温度21℃、光照强度1000Lx、光照时间10h/d。经验证在此优化因素下,春兰分株繁殖实际成活率高达82.76%。     

一株副溶血弧菌的分离和鉴定

从患病的凡纳滨对虾体内分离了一株致病菌。对该菌进行了常规的生理生化鉴定,确认该菌为副溶血弧菌;该菌在第6 h就进入对数早期,对数期一直持续到22 h;用该菌腹腔注射小白鼠,对小白鼠半数致死量LD50为7.6×106cfu/g。