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为建立一种同步定量检测建兰花叶病毒(cymbidium mosaic virus,CymMV)和齿兰环斑病毒(odontoglossum ringspot virus,ORSV)的高效检测方法,本研究根据CymMV和ORSV CP基因高度保守区分别设计引物和探针并筛选,获得156 bp和148 bp的靶标序列及对应的最优特异性引物探针组合,建立了基于TaqMan探针的双重实时荧光定量PCR方法。该方法最低检出限为1拷贝或6.2×10-3fg,最低稳定检出限为10拷贝或6.2×10-2 fg,是RT-PCR的10~100倍;构建的标准曲线线性关系良好,扩增效率分别为97.7%和100.2%,相关系数R2分别为1.000和0.999;对其他5种常见病毒均无扩增曲线,检测特异性强;批组内与批组间重复性试验Ct值变异系数≤0.60%,重复性和稳定性好。利用该方法和基因芯片法分别对4个种属的66个兰花样品进行方法验证,该方法相较于基因芯片法检出率提高了53.85%(CymMV)和162.5%(ORSV)。综上所述,本方法可同时高通量检测CymMV和ORSV 2种病毒靶基因,结果可靠,应用前景广阔,可为开展病毒精准鉴定、科学防控以及从源头遏制病毒传播提供技术支撑。 相似文献
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大花蕙兰花芽分化与激素关系的研究 总被引:3,自引:2,他引:1
为了给大花蕙兰花期调控提供理论依据,在大花蕙兰花芽分化前用不同浓度的GA3、IBA、NAA和PP333均匀喷洒大花蕙兰的叶片和假鳞茎,研究各处理对大花蕙兰花芽分化的影响,同时研究了在大花蕙兰花芽分化过程中假鳞茎内源激素含量的变化,结果表明:(1)对大花蕙兰的成品苗喷洒外源激素会影响其始花期,其中GA3和PP333促进大花蕙兰的花芽分化,使其提早开花,根据使用浓度的不同,提早开花的时间为2~12天;而不同浓度的NAA处理则抑制了大花蕙兰的花芽分化,使开花推迟了4~11天。(2)IBA处理能够明显的促进花箭的生长,PP333处理则抑制了花箭的生长;各处理对大花蕙兰的花期和单枝花朵数影响不明显。(3)在大花蕙兰花芽分化的过程中,假鳞茎中ZT和GA3含量都是先上升后下降;ABA则是缓慢的上升;IAA则表现为下降。ZT/IAA和ABA/IAA的上升有利于大花蕙兰花芽的分化。 相似文献
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大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及其解剖结构研究 总被引:5,自引:0,他引:5
通过诱导根状茎上的休眠芽萌发,以其茎尖和幼茎段材料为外植体进行组织培养,建立了大花蕙兰(Cymbidium hynridum)的无菌繁殖体系,并筛选出大花蕙兰无菌繁殖的最佳培养基组成。原球茎诱导的较适宜的培养基为MS 1.5 mg.L-16-BA 0.1 mg.L-1KT 0.05 mg.L-1NAA,诱导率达15%;原球茎增殖培养基在诱导培养的基础上添加150 g.L-1香蕉泥,其增殖系数1个月内可达15~35。原球茎是由顶端分生组织后面的薄壁细胞脱分化,形成胚性细胞,经球状胚发育而来。 相似文献
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以大花蕙兰与朱砂兰杂交种子萌发后形成的根状茎为试验材料,采用KT、6-BA和NAA三种外源激素对杂交兰根状茎进行实验,比较不同激素对根状茎增殖和分化的影响。单因素实验中,随着激素KT、6-BA浓度的增加,杂交兰根状茎的增殖率和分化率逐渐增加,但不成正比例关系。NAA浓度一定时,6-BA浓度为3 mg/L时,杂交兰根状茎的平均增殖率最高达到290%,6-BA浓度为4 mg/L时,根状茎的平均分化率最高达到85.64%;KT浓度为2.5 mg/L时,平均增殖率最高为300%;KT浓度为3.0 mg/L时,根状茎的平均分化率最高为87.89%。三种激素复合添加对杂交兰根状茎增殖和分化效果最佳。增殖效果最佳的培养基为1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,根状茎粗壮且长,增殖率高。分化效果最佳培养基为1/2 MS+6-BA 4.0 mg/L+KT 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,分化苗生长良好,叶色深绿。本研究为杂交优株实现工厂化育苗奠定了一定的理论基础。 相似文献
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应用IC-RT-PCR方法检测齿兰环斑病毒和建兰花叶病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
根据已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒外壳蛋白基因序列设计PCR引物,建立了蝴蝶兰建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒IC-RT-PCR检测方法。用该方法对天津地区8个蝴蝶兰标样检测,结果显示:8个标样中有4个检测到建兰花叶病毒,另外4个检测到齿兰环斑病毒。该方法简化了操作程序,为蝴蝶兰种苗病毒的快速检测奠定了基础。 相似文献
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为明确海洋细菌解淀粉芽胞杆菌BA-3在兰花根际的定殖特性,本研究采用抗生素标记法筛选出对利福平和卡那霉素稳定的菌株BA-3-K。平板对峙试验证明,菌株BA-3-K对兰花茎腐病抑菌率达86.91%,与原始菌株BA-3抑菌率87.69%无明显差异。采用灌根法和涂茎法证实了标记菌株BA-3-K能在兰花植株体内定殖达60 d以上。灌根处理表明,生防菌BA-3-K的定殖数量为土壤>根>茎,呈先升后降的趋势,第21d在根部和茎部达到最大分别为2.54×10^5和1.47×10^5cfu/g,在土壤中第15d达到最大6.50×10^5cfu/g,但叶部未检测到标记菌株BA-3-K;涂茎处理生防菌的定殖量茎>叶,第17 d在茎部达到最大2.33×10^5cfu/g,随后呈下降趋势,根部和土壤未检测到标记菌株BA-3-K;通过扫描电镜定性观察,发现BA-3-K可在植株茎部定殖。盆栽试验表明,菌株BA-3-K施用后,根际土壤中细菌、真菌和放线菌的数量明显高于对照处理。本研究表明海洋细菌BA-3有较强的定殖能力,具有良好的应用价值。 相似文献
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中国兰花品种数量分类初探 总被引:22,自引:0,他引:22
运用计算机对中国兰花37个品种和37个形态特征性状进行了数量分类研究.R分析揭示了性状之间的相关性,初步得出了中国兰花种级分类的特征性状和品种分类特征性状,同时证明了本研究所采用的特征性状的独立性和稳定性.Q分析得出了中国兰花种级分类界线和类型分级界线,将37个兰花品种大致分为:兜瓣型、竹叶瓣型、多花型、素心瓣型和奇瓣型.最后在R分析和Q分析的基础上讨论了建立“兰花品种分类管理信息系统”的一些初步设想.通过分析,作者认为建立这一套系统是必要的,也是可能的. 相似文献