辐照对瓜实蝇遗传区性品系成虫肠道微生物的影响

为研究辐照对瓜实蝇肠道微生物群落多样性和结构组成的影响,以100 Gy137Cs辐照来自瓜实蝇遗传区性品系(GSS)的5、8、11和13日龄的雌、雄成虫,并采用Illumina MiSeq测序技术分别对其肠道菌群进行测序分析。结果表明,瓜实蝇雌雄成虫的肠道中存在19个主要的菌属,包括17个属名已知,1个属名未知和1个属不可培养。其中,17个已知属分别属于4个细菌门,即变形菌门(Proteobacteria)(占总量的50%~98%)、厚壁菌门(Firmicutes)(占总量的2%~47%)、拟杆菌门(Bacteroidetes)(占总量的1%~16%)和1个至今微生物界还未确定的稀少菌门(unclassified rare phyla)(总量1%)。此外,辐照降低了瓜实蝇肠道中的微生物多样性以及优势菌的丰富度,且这种影响与瓜实蝇的性别和成虫日龄无关。本研究结果为评估和修复辐照对瓜实蝇的损伤提供了参考。     

瓜实蝇过冷却点的测定

采用热敏电阻法对瓜实蝇1日龄幼虫、5日龄幼虫、1日龄蛹、3日龄蛹、5日龄蛹、1日龄雌成虫、1日龄雄成虫、5日龄雌成虫、5日龄雄成虫进行过冷却点和结冰点的测定。结果表明：各虫态以5日龄蛹的过冷却点和3日龄蛹的结冰点最低,分别为（-16.72±0.23）℃和（-13.14±0.55）℃;以5日龄幼虫的过冷却点和结冰点最高,分别为（-14.32±0.45）℃和（-5.52±0.47）℃;各虫态的过冷却点由低到高的顺序为：5日龄蛹＜3日龄蛹＜5日龄雄成虫＜1日龄雄成虫＜1日龄蛹＜5日龄雌成虫＜1日龄幼虫＜1日龄雌成虫＜5日龄幼虫。     

诱蝇酮的合成及其对瓜实蝇的引诱活性

诱蝇酮[4-(对-乙酰氧基苯基)-2-丁酮]是引诱瓜实蝇[Bactrocera cucurbitae(Diptera,Tephritidae)]的类信息素(para-pheromone.又称cuelure).我国一些检疫单位目前都从国外进口该产品.本研究利用比较易得且价格低廉的覆盆子酮作为原材料,经过乙酰酯化得到引诱瓜实蝇的类信息素诱蝇酮.田间试验比较结果表明,合成产物与美国Bedoukian公司生产的诱蝇酮引诱活性无显著差异.在田间1g剂量的诱蝇酮诱捕活性持效期可以维持1个月以上,对瓜实蝇日诱捕高峰时问在6:30～14:30;在2m高的苦瓜棚架下,设置在1.5m高度(即苦瓜的高度)的诱捕器诱捕效果最佳,高于苦瓜架子时,诱虫量较少.     

瓜实蝇DNA甲基化的MSAP体系建立与优化

瓜实蝇[Bactrocera cucurbitae (Coquillett)]是中国重要的蔬菜害虫,但其DNA甲基化研究尚未见报道。甲基化敏感扩增多态性是研究DNA甲基化的重要技术之一。通过对酶切反应、连接、PCR扩增和引物筛选等条件优化,建立瓜实蝇MSAP反应体系,即：①20 μL酶切体系中加入10 U的限制性内切酶与600 ng基因组DNA,于37℃酶切反应过夜;②20 μL连接体系中加入T4 连接酶1 U,HpaⅡ-MspⅠ-adapter接头50 pmol,EcoR I-adapter接头5 pmol,并于16℃反应12 h;③连接产物稀释后进行PCR预扩增和选择性扩增,再经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测结果。通过该体系筛选出适用于瓜实蝇基因组DNA甲基化多态性研究的6对引物;瓜实蝇MSAP体系为瓜实蝇的表观遗传学研究提供了技术支持。     

Evaluation of lure dispensers for fruit fly surveillance in New Zealand

BACKGROUND: Fruit flies (Diptera: Tephritidae) represent a major biosecurity threat to the horticulture sector of New Zealand, which is entirely free of these invasive pests. A nationwide surveillance programme is conducted to ensure any incursion is detected as early as possible. A review of the lure dispensers used is reported here. RESULTS: Lure dispenser emission trials found that the currently used lure plugs release lure more slowly under New Zealand subtropical to temperate climates than wafer dispensers. Subsequent trapping experiments at high altitude in Hawaii (as a mimic of New Zealand meteorological and expected fruit fly ecological conditions) compared Lynfield traps baited with the existing lure plug dispensers and newer wafer dispensers. Catches of wild Oriental fruit flies, Bactrocera dorsalis (Hendel), were 9.5-fold higher with methyl eugenol wafers than with the plugs. Recaptures of sterile melon flies, Bactrocera cucurbitae (Coquillet), were 2.6-fold higher with cuelure wafers than with the plugs. Recaptures of sterile Mediterranean fruit flies, Ceratitis capitata Weid., were not significantly higher with trimedlure wafers than with the plugs.CONCLUSIONS: Release rate and trapping experiments found new lure dispensers differed in release rate characteristics from existing dispensers under temperate and subtropical conditions, and indicated some potential for improvement in surveillance efficacy.     

引诱剂对柑桔小实蝇、瓜实蝇诱捕效果试验

用引诱剂甲基丁香酚、4-(P-醋酸基-苯基)2-丁酮(简称Cuelure)与这两种药的混合剂(简称Islon)对柑桔小实蝇和瓜实蝇(雄虫)进行诱捕试验,结果表明,国产与日本产的这两种引诱剂的效果无明显差异,日产的甲基丁香酚药效持久性稍长于国产的;cuelure与Islon对瓜实蝇的诱捕效果无明显差异;甲基丁香酚对柑秸小实蝇的诱捕效果稍高于Islon剂。推荐用Islon作检疫或监测实蝇的引诱剂。本文还对柑桔小实蝇和瓜实蝇的虫口变动与寄主之间的关系进行了观察。     

不同寄主对瓜实蝇和南亚实蝇生长发育和产卵选择的影响

为探讨瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae和南亚实蝇Zeugodacus tau对寄主植物的选择性及寄主植物对其种群的适合度。在室内观察记录瓜实蝇和南亚实蝇幼虫在黄瓜Cucumis sativus、丝瓜Luffa aegyptiaca和西葫芦Cucurbita pepo 3种寄主果实上的幼虫历期、蛹历期和存活率等生长发育参数,同时测定两种实蝇成虫在3个黄瓜品种‘A38翠玉’‘台湾大黄瓜’和‘唐山秋瓜’有无果皮两种状态下的产卵量。结果表明,瓜实蝇和南亚实蝇幼虫取食同种果实或同种实蝇取食不同寄主果实后幼虫的发育历期、化蛹率和存活率均无显著差异;但取食西葫芦后,两种实蝇的蛹历期分别为12.30 d和12.77 d,均显著长于取食黄瓜和丝瓜。且南亚实蝇的羽化率为70.59%,显著高于瓜实蝇在3种寄主果实上的羽化率。不同品种黄瓜中,瓜实蝇偏向于选择‘A38翠玉’品种产卵,在果实完好和去果皮条件下日均产卵量分别达87.50粒和53.75粒,均显著高于南亚实蝇在3个黄瓜品种上的日均产卵量;南亚实蝇更偏好在去果皮的‘A38翠玉’果实上产卵,日均产卵量达44.25粒。对同一黄瓜品种,瓜实蝇在...     

瓜实蝇热激蛋白基因hsp70的克隆及序列分析

[目的]克隆分析瓜实蝇热激蛋白hsp70基因序列特征,为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防治策略奠定基础.[方法]根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp70基因保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp70基因部分片段的简并引物,并利用RACE-PCR扩增其全长序列.[结果]克隆获得瓜实蝇hsp70基因cDNA全长序列(获取号:KM112021)2271 bp,含1911 bp的开放阅读框,编码636个氨基酸,具有真核生物hsp70基因家族的3个明显基序标签,同时在C-末端具有EEVD基序,推测其属于胞质型热激蛋白.BLAST分析结果表明该序列与双翅目实蝇科昆虫hsp70基因高度相似,最高相似度达91％.氨基酸序列系统发育分析结果显示,瓜实蝇与双翅目实蝇科昆虫聚类为一个分支,证实hsp70基因的高度保守.[结论]瓜实蝇hsp70基因具有真核生物hsp 70基因家族的特征,序列表现为高度的保守性,可作为今后研究瓜实蝇抗逆性机制的一个参数指标.