绿色蔬菜叶绿体DNA的提取和纯化

对蔬菜绿叶通过组织匀浆,差速离心分离,密度梯度离心分离、纯化、提取叶绿体。显微镜下观察所得叶绿体纯度、形态及结构,看到椭圆、球形叶绿体,并用数码照相机拍照。样品用SDS、蛋白酶K、核酸酶处理后,用酚、苯酚/氯仿及氯仿/异戎醇抽提、处理纯化。取得的叶绿体DNA(ctDNA)用紫外分光光度计检测浓度与纯度,1%琼脂糖电泳得到清晰、整齐的条带。     

Genetic polymorphism of plastid DNA in Tunisian date-palm germplasm (Phoenix dactylifera L.) detected with PCR-RFLP

Fifteen plastid fragments were amplified from a set of Tunisian date-palm accessions by PCR with consensus primers and analysed by RFLP. Polymorphic DNA bands were obtained as reliable molecular markers to estimate genetic distances among the accessions and to examine their phylogenetic relationships. The ctDNA PCR-RFLP method permitted the identification of two haplotypes that differ in the presence or absence of the HinfI restriction site. Phenetic groups composed of cultivars clustered together but does not constitute monophyletic groups. This typology agrees with the haplotypes' organization and provides a common genetic background within the implied varieties.     

氨萘菲特类似物光谱性能和抗肿瘤机制研究

通过紫外光谱、荧光光谱和流式细胞技术研究了一系列新型的氨萘菲特类似物5a-c的光谱性能及其抗肿瘤作用机制。研究结果表明，化合物5a-c表现为中等强度的DNA嵌入剂，该系列化合物能有效地引起HL-60细胞周期阻滞并诱导凋亡。该工作为深入理解化合物5a-e独特的抗肿瘤活性提供了一定的化学生物学证据，并为其结构的进一步修饰和抗肿瘤性能的进一步优化提供了指导。     

一种快速提取谷子叶绿体DNA的方法

目的 研究谷子叶绿体DNA（ctDNA）的一种快速简便的提取方法．方法 在1988年赵衍等提取水稻ctDNA和龚小松提取高梁叶绿体DNA和1998年TriboushSO等提取向日葵叶绿体DNA的方法的基础上加以改进. 结果 获得了产率较高和纯度较好谷子叶绿体DNA,PCR扩增效果良好,经酶切可得到清晰的限制性内切酶图谱．结论 获得的谷子叶绿体DNA完全可以满足后续分子操作需要．     

草坪草ctDNA提纯方法探讨

以4种草坪草高羊茅Festuca elata、黑麦草Lotium perenne、狗牙根Cynodon dactylon、中华结缕草Zoysia sinica为材料,用改进的差速离心法分离叶绿体, CTAB法提取叶绿体DNA(ctDNA),琼脂糖电泳检测ctDNA含量。结果显示,改进CTAB法提取ctDNA的纯度高、谱带清晰、完整叶绿体比例高;且CTAB法与常用高等植物ctDNA的分离提纯方法相比,省去传统的密度梯度离心法耗材、耗时步骤,具有简便、快速、得率较高等优点。实验表明,改进CTAB法为禾本科植物ct DNA的提取提供参考,适于生物实验教学和科研活动。     

金属离子对噻嗪酮与小牛胸腺DNA相互作用的影响

为探讨噻嗪酮及金属离子共存对非靶标生物遗传毒性的机制,利用紫外、荧光光谱法研究生理条件下噻嗪酮与小牛胸腺DNA(ctDNA)之间的结合作用大小及模式,从分子水平上分析了Cd~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Ni~(2+)存在时对噻嗪酮与ctDNA相互作用的影响。结果表明:噻嗪酮可与ctDNA结合引起噻嗪酮吸收光谱明显红移;可与亚甲基蓝(MB)竞争结合ctDNA,且结合常数K随温度升高呈递减趋势;可与ctDNA以嵌插方式结合使熔点明显升高。环境金属离子的存在不会改变噻嗪酮与ctDNA之间的作用模式,但会影响其结合强弱,低浓度Cu~(2+)、Ni~(2+)可通过离子桥表现出一定的促结合作用,高浓度时则引起DNA结构改变而削弱噻嗪酮与DNA的结合,Co~(2+)、Cd~(2+)能影响DNA分子结构、与噻嗪酮竞争结合位点,导致结合常数下降。     

油菜细胞质雄性不育叶绿体DNA酶切比较研究

采用高离子强度法分离出不同细胞质雄性不育胞质油菜叶绿体，裂解制备并纯化叶绿体DNA，限制性酶切分析比较了不同材料的ctDNA限制酶谱。结果表明，利用EcoRI酶切4种胞质叶绿体DNA，产生的DNA限制片断分子量在7．0～3．0kb之间，有明显的差异。