优化的VHb基因和GFMcryIA基因构建的双价基因在烟草中的表达

利用人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白（VHb）基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了36株卡那霉素抗性植株。经转基因植株的PCR及Southern blot检测,证实了双价基因在35株烟草基因组中的整合。Western blot检测证实了VHb基因的表达,杀虫实验证实GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。且转基因烟草平均每株干重比非转基因烟草植株高7％。本研究结果表明转基因育种技术在培育出既高产又具抗虫性的作物或经济作物新品种方面具有良好的应用前景。     

水稻质体多顺反子表达载体的构建及其对烟草质体的转化

【目的】尝试水稻质体多顺反子定点整合表达载体转化到烟草质体中表达。【方法】根据已发表的相关序列，分别设计引物，通过PCR技术克隆了一系列构建水稻质体多顺反子定点整合表达载体所需的元件：质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子（Prrn）、质体psbA基因3′端终止子（psbA3′）、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因（aadA）、水稻质体基因组高频同源重组片段(psbC/trnG，大小3362 bp)，命名为crDNA、甘露聚糖酶基因（man）、绿荧光蛋白基因（gfp）。构建了水稻质体多顺反子定点整合表达载体pLM21(-psbC-Prrn-RBS -man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′- trnG-)。将该载体用基因枪轰击烟草叶片5枪，用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选。【结果】获得质体转基因烟草4株。用PCR、激光扫描和Western blot等方法检测都证实man、gfp、aadA三个基因且均得到表达，用RFLP证实表达盒整合到烟草质体基因组中。【结论】水稻质体多顺反子定点整合表达载体已整合到烟草质体基因组中，并得到表达。     

菊芋凝集素基因转入烟草的研究

菊芋凝集素是一种对同翅目、鞘翅目、鳞翅目害虫有抗、杀作用的蛋白质 ,通过遗传工程的手段 ,将菊芋凝集素基因置于CaMV35S组成型启动子和T nos终止子的控制下 ,构建了用于转化烟草的植物表达载体 ;在根癌农杆菌介导下转化烟草 ;经PCR检测证明获得了转基因烟草     

烟田生物种群动态与群落结构的研究

研究表明,毫州烟区常见的烟草有害生物有８科８种,害虫的在敌有５科５种,其中烟蚜、烟青虫和斑须蝽为主要害虫;烟蚜茧蜂是烟蚜的重要天敌,对控制烟蚜种群增长作用明显。其次得知,生物群落的我样性指数越大,稳定性指数亦越大,６月上旬田间生物群落的多样性,稳定性指数均为最高,是抵抗外界干扰能力和恢复原状态最佳期。通过数学分析又知,烟蚜是聚集分布时,烟蚜茧蜂、龟纺瓢虫等几种常见天敌在田间的水平分布格局聚集分布。     

不同育苗技术下烤烟中矿质元素含量的差异

以K326为材料,采用4种不同漂浮育苗技术研究烤烟生长期间,叶、茎、根中8种矿质元素含量的差异。结果表明,不同处理下,烤烟叶片P、K、Ca含量差异不明显,生长前期根和茎中差异明显;叶片Mg含量在各时期差异均达到极显著水平,尤其是循环增氧系统+紫外杀菌技术和具有根系定向培养技术的漂浮育苗处理;叶、茎、根中Na、Mn、Zn、Fe、Cu等微量元素含量与CK相比,各时期均达极显著水平。应用循环增氧及紫外杀菌方式育苗和根系定向生长育苗方式处理的烟株对矿质元素吸收能力较强,矿质营养协调,适宜大规模推广应用。