核桃早实性状的RAPD分析

 用BSA (Bulked Segregant Analysis) 法获得了与核桃早实性状相关的RAPD 标记OPB208₉₀₀。混合分离群体的混合样来自早实品种辽1 的自然授粉实生后代。用220 个随机引物扩增早实和晚实混合样, 只有引物OPB208 ( 5. GTCCACACGG 3. ) 在早实混合样及其个体上扩增出了约900 bp 的特异带OPB208₉₀₀, 而在晚实混合样及其个体上无此特异带。用OPB208 为引物, 以19 个品种和3 个株系的DNA 为模板进行扩增,特异带OPB208₉₀₀在17 个早实品种中的12 个个体上出现, 而5 个晚实品种( 系) 上均无此带。     

RAPD分析山西主要地方山羊品种的遗传多态性

现代分子生物技术的飞速发展，为动物育种提供了新的方法和手段，在DNA水平上检测物种的遗传结构和遗传多样性，越来越受到人们的重视。以PCR为基础的DNA多态性检测技术以其检测灵敏度高、操作简便、安全、快捷、经济等优点，逐步广泛地应用于动植物研究中。山西境内现存3个山羊群体，分别为阳城白山羊、黎城大青羊和吕梁黑山羊，在长期自然选择的条件下，各具特征，生产性能和生存环境均有差异，是良好的种质资源。     

运用RAPD技术检测中华蜜蜂蜂群中亚家庭数量

以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)为实验材料,运用随机扩增多态DNA (RAPD)技术和NTSYS聚类软件分析蜂群亲缘关系指数和亚家庭数组成.结果表明:RAPD技术是检测中华蜜蜂亚家庭数量的一种有效方法.     

RAPD标记鉴定果树芽变的可行性分析

在综合分析果树芽变的遗传特点以及RAPD标记技术的原理与存在问题的基础上，结合已有的研究报道，对RAPD标记应用于果树芽变鉴定中的可行性进行了探讨。对于不同的果树芽变类型，RAPD标记技术表现出不同的鉴定可行性。同时，对某些有关的问题提出了相应的建议。     

七子花种群遗传多样性和遗传分化的RAPD分析

 利用RAPD技术研究了浙江省9个七子花天然种群的遗传多样性和遗传分化。结果显示, 七子花遗传多样性水平较低, 种群间遗传分化明显, 9个种群可以聚为两个大的分支。分析认为, 七子花自身的生物学特点以及片断化时的取样效应是种群间遗传分化的主要原因。最后提出了两点当前应采取的七子花保护措施。     

一个与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik~m连锁的SCAR标记的分离

 本研究将以前在稻瘟病菌菌株S1522获得的与决定对水稻品种梅雨明无毒性的基因(AVR-Pik^m)相连锁的1个RAPD标记OPO12₁₀₀₀进行了克隆和鉴定。核苷酸序列测定与分析结果表明:OPO12₁₀₀₀的大小为946个碱基,不含有与已报道的稻瘟病菌Mg-SINE、Fosburry、Magyy、Grasshopper、Pot2以及Pot3等同源的重复序列。根据OPO12₁₀₀₀的核苷酸序列,设计了1对24个核苷酸的特异引物,对无毒表型亲本S1522和毒性表型亲本S159、无毒表型群体基因池、毒性表型基因池以及有性杂交后代108个菌株进行了PCR扩增,所有无毒表型的菌株均能特异性地扩增出1条与OPO12₁₀₀₀大小相同的DNA条带,而毒性表型的菌株除5个重组个体外,均不能扩增出这条特异带。此结果表明,与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik^m连锁的RAPD标记OPO12₁₀₀₀被成功地转化为SCAR标记,为进一步通过染色体步移克隆该无毒基因奠定了基础。     

黄瓜种质资源遗传亲缘关系的RAPD分析

利用ＲＡＰＤ技术对多个生态型的黄瓜材料的遗传亲缘关系进行了研究。从２００个１０碱基随机引物中筛选出２０个用于ＰＣＲ反应,３９．２％的扩增条带表现多态性;每个生态型品种都具有其特有的扩增（缺失）带以区别其他生态型品种;聚类分析将供试材料分为３大类群：华北类群、华南类群和欧洲温室类群。从分子水平验证了传统的黄瓜地域分类标准及黄瓜是遗传基础狭窄的蔬菜作物。对利用ＲＡＰＤ技术进行亲缘控制研究的可能性进行了探讨。     

长白山杜鹃花基因组DNA提取及RAPD体系的建立

采用改良的CTAB法提取杜鹃花的基因组DNA,所得的DNA纯度高、质量好,可用于RAPD分析.筛选出的杜鹃花RAPD反应的最佳体系为25μL反应体系中包括模板DNA20～200ng.引物10pmol,dNTPs100μmol·L-1,TaqDNA聚合酶0.5U,Mg2 2.5 mmol·L-1,10xbuffer缓冲液2.5 mmol·-1,其余部分用无茵超纯水补充.PCR扩增程序为94℃预变性5 min;94℃变性1 min,37℃退火1min,72℃延伸2min,40次循环;72℃最终延伸7min.应用优化后的反应体系PCR扩增获得的RAPD指纹图谱带型清晰,重复性好,为长白山杜鹃花品种鉴定、分类的研究提供了一定基础.     

枣树RAPD分析体系优化研究

利用随机引物扩增多态性(RAPD)分子标记技术研究不同枣树品系之间遗传多态性,建立起一个基于PCR技术的分子遗传标记RAPD分析的优化体系.设置不同的浓度梯度,从dNTPs、随机引物、Taq酶、Mg2 、缓冲液Buffe,的浓度及模板DNA的质量和用量方面考察,建立了枣树RAPD技术最优体系.结果表明:20μL反应体系组分含量为10×Taq酶Buffer 2μL,Mg2 浓度2.0 mmol/L,dNTPs浓度200μmol/L,引物浓度0.2 μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度0.06 U/μL,DNA模板浓度1.5 ng/μL.最佳扩增程序为94℃预变性4 min,94℃变性30 s,36℃退火40 s,72℃延伸1min,50个循环,最后72℃延伸8 min.     

低咖啡因茶树品系的RAPD分析及特异片段的克隆

对12份来源不同和咖啡碱含量不同的茶树种质资源进行RAPD分析,筛选出品种(株系)唯一扩增的RAPD位点16个,这些位点可以作为品种(株系)鉴定的特异分子标记;对S43.04序列进行测序,该序列为752bp的核苷酸序列,具有编码40个氨基酸的开放阅读框,其相同氨基酸残基与β-半乳糖苷酶的同源性为72%。