利用单根肌纤维法分离和培养猪骨骼肌卫星细胞及其成肌诱导分化

建立单根肌纤维法体外培养猪骨骼肌卫星细胞的体系,了解其增殖和成肌特性。通过Ⅰ型胶原酶消化,从猪骨骼肌中分离完整的单根肌纤维并培养,用细胞免疫荧光鉴定肌纤维上的卫星细胞,随后对从单根肌纤维上游离出来的卫星细胞进行细胞免疫荧光染色,传代培养,成肌诱导分化和Western blot分析骨骼肌卫星细胞成肌特异性蛋白的表达。结果显示:分离并培养的单根肌纤维上附着有卵圆形的细胞,并随时间的推移,细胞缓慢向外迁移并增殖,卫星细胞特异性标志基因对盒转录因子(Paired protein box,Pax7)和成肌分化抗原(Myogenic Differentiation Antigen,MyoD)免疫荧光染色呈阳性,且阳性率达到90%以上。成肌诱导分化后,细胞开始汇合,并呈方向性生长,最终形成多核肌管,且成肌特异性标志基因Myogenin和myosin heavy chain(MyHC)表达呈阳性。MyoD蛋白高表达于增殖期,而Myogenin和MyHC在进入分化期才表达。该实验成功建立了猪骨骼肌单根肌纤维的体外培养方法并获得了高纯度的卫星细胞,为骨骼肌卫星细胞进行活体移植治疗相关疾病研究提供了实验材料。     

血桐提取液浓度对圣女果保鲜效果的影响

[目的]研究不同浓度血桐提取液对圣女果的保鲜效果。[方法]以圣女果为材料,分别将其在室温条件下自然存放、保鲜膜密封存放和不同浓度血桐提取液（0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、5.0%）浸泡5min后自然晾干存放,存放过程中观察其表观变化,并测定其pH值、Vc和总糖含量及失重的变化。[结果]存放过程中,自然存放组好果率呈下降趋势,存放6d时好果率为92.4%,存放14d时好果率为72.3%。血桐提取液处理组的好果率均高于自然存放组,其中2.0%血桐提取液处理组好果率最高,存放14d时好果率仍为89.8%,高于其他处理;同时,该处理组圣女果的其他测定值随时间的变化均较小。[结论]2.0%血桐提取液对圣女果具有较好的保鲜效果。     

中华槭花粉活力探究

以中华槭为研究对象,研究了中华槭花粉离体培养萌发最佳测定时间,中华槭花粉活力快速测定的方法,蔗糖、硼酸、氯化钙浓度以及不同贮藏温度(室温、4℃、-20℃)对中华槭花粉活力的影响。试验结果表明:中华槭花粉离体培养16h后,再进行其花粉活力的测定较为适宜;用离体培养萌发法测定的花粉活力,最接近于中华槭花粉的真实活力。适于中华槭花粉萌发的蔗糖、硼酸、氯化钙浓度分别为:100g/L、50mg/L、50mg/L。中华槭花粉在4℃下可以存活60d,在-20℃下可以保存120d,在室温下仅可以存活7d。     

Paired box 7 inhibits differentiation in 3T3‐L1 preadipocytes

Myogenesis is precisely proceeded by myogenic regulatory factors. Myogenic stem cells are activated, proliferated and fused into a multinuclear myofiber. Pax7, paired box 7, one of the earliest markers during myogenesis. It has been reported that Pax7 regulates the muscle marker genes, Myf5 and MyoD toward differentiation. The possible roles of Pax7 in myogenic cells have been well researched. However, it has not yet been clarified if Pax7 itself is able to induce myogenic fate in nonmyogenic lineage cells. In this study, we performed experiments using stably expressed Pax7 in 3T3‐L1 preadipocytes to elucidate if Pax7 inhibits adipogenesis. We found that Pax7 represses adipogenic markers and prevents differentiation. These cells showed decreased expression of PDGFRα, PPARγ and Fabp4 and inhibited forming lipid droplets.     

Pax7基因在猪不同组织中的表达特征及其在背最长肌中的发育性表达规律研究

本试验旨在探究Pax7(paired box 7)基因在猪不同组织中的表达特征及其在背最长肌中的发育性表达规律.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和Western blotting技术检测了Pax7基因在1日龄马身猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、下丘脑、小脑、背最长肌、腰大肌、股二头肌12种组织中的mRNA和蛋白质表达谱,以及马身猪和大白猪从出生1日龄到180日龄7个发育阶段(1、30、60、90、120、150、180日龄)背最长肌中的发育性表达规律.结果表明,Pax7基因mRNA在背最长肌、腰大肌、股二头肌、下丘脑和小脑组织中表达,而Pax7蛋白仅在背最长肌、腰大肌和股二头肌中表达.背最长肌中Pax7基因mRNA和蛋白质的发育性表达趋势在马身猪和大白猪中基本一致.在mRNA水平上,30日龄的表达量最高,极显著高于其他日龄(P <0.01);1日龄的表达量次之;其他日龄维持低表达的稳定状态.Pax7蛋白表达量在1日龄时最高,极显著高于其他日龄(P <0.01);30日龄次之;其他日龄维持低表达的稳定状态.从出生1日龄到180日龄,马身猪背最长肌中Pax7蛋白的表达量均显著或极显著地高于大白猪(P <0.05;P <0.01).Pax7 基因的表达与组织、日龄及品种的遗传背景有关.     

两种球花报春的生长特性研究初报

以两种球花报春植物滇北球花报春、滇海水仙花为材料,初步研究了两种报春的生长发育特性。结果表明,两种球花报春播种后不同生长期的株高、冠幅均呈先升后降的趋势;而叶数变化趋势不同,滇北球花报春的叶片数量先升后降,滇海水仙花的则持续增长;滇北球花报春需经过冬季低温后于次年3~4月开花,而滇海水仙花当年12月即能开花;滇海水仙花在开花的同时进行匍匐茎无性繁殖方式。     

Evaluation of Pax5 expression and comparison with BLA.36 and CD79αcy in feline non‐Hodgkin lymphoma

Paired box gene 5 (Pax5) is a widely used B‐cell marker for human and canine non‐Hodgkin's lymphoma (nHL); however, in the literature there is only one case report using Pax5 in a cat B‐cell lymphoma. The purposes of this study were to investigate the expression and detection of B‐cell specific activator protein (BSAP) using a monoclonal anti‐Pax5 antibody in feline nHL (FnHL) tissue samples to evaluate its diagnostic relevance as a B‐cell marker. A total of 45 FnHL samples in 45 cats were evaluated. B‐cell lymphoma was the most common immunophenotype (51.1%) for all the samples and T‐cell the most common immunophenotype (64.3%) for the gastrointestinal (GI) form. Pax5 stained 82.6% of all B‐cell lymphomas and no expression was found in any of the T‐cell lymphomas. Anti‐Pax5 antibody staining in FnHL is similar to that reported in human and canine counterparts and may offer an excellent B‐cell marker in cats.     

澳门青洲山血桐群落特征及物种多样性研究

根据样方调查,对澳门青洲山血桐（Macaranga tanarius）群落的种类组成、外貌、群落结构特征和物种多样性进行了分析。结果表明：澳门青洲山血桐群落属于南亚热带次生性常绿阔叶林,在700 m2的样地中有维管束植物66种,隶属于39科62属,其中以热带成分占绝对优势。群落优势种为血桐,重要值为119.25,优势科为大戟科、茜草科等。群落终年常绿,成层现象明显,可分为乔木层（2亚层）、灌木层和草本层3个层次,层间植物丰富,3个层次多样性格局基本表现为灌木层〉乔木层〉草本层。对优势种群的年龄结构分析表明,该群落处于增长状态。群落频度分布规律为A级〉B级〉C级〉D级〈E级,与Raunkiaer的L形频度定律曲线相一致。与其他邻近地区进行比较,群落物种丰富度较高。澳门青洲山血桐群落是迄今在澳门发现的保护得最好的血桐群落,因此,建议对青洲山的植被进行适当的保护。