舞毒蛾核型多角体病毒PCR检测技术的建立

根据舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)设计一对特异性引物.成功建立了LdMNPV的PCR检测技术体系,其对LdMNPV基因组的灵敏度可达到1fg·mL-1.应用该技术体系从舞毒蛾带毒幼虫、卵、蛹的基因组中扩增出目的片段,证明了这一技术的可行性.对不同浓度的多角体悬液的扩增结果显示:其检测最低量为5 OBs·mL-1.形态学研究表明:从内蒙舞毒蛾体内分离到的LdMNPV中,少数表面有凹陷的孔洞,病毒粒子从这些孔洞中游离出来,这也阐明了此技术能够从多角体悬液中扩增出目的片段的原因.在将来LdMNPV的检测中,可用虫体进行研磨过滤离心得到的组织液作为模板进行扩增.     

不同地理品系LdMNPV对取食青杨的亚洲型舞毒蛾幼虫的致死与亚致死作用

为了更好的利用LdMNPV对亚洲型舞毒蛾幼虫进行生物防治,本文采用食料给毒法测定了不同地理品系LdMNPV对取食青杨的亚洲型舞毒蛾2龄幼虫的致死与亚致死作用。结果表明:LdMNPV-D、LdMNPV-H、LdMN-PV-J 3个地理品系的LC50分别为333、9、1076 OBs/μL,LT50分别为10.5d1、3.5d、8.9d;亚致死剂量的LdMNPV 3个地理品系对亚洲型舞毒蛾雌雄虫的发育历期、雌雄性比及蛹重均有一定影响,主要的表现为:亚致死剂量的LdMNPV-H和LdMNPV-J品系均延长了亚洲型舞毒蛾发育历期,且与对照相比总虫期达到显著水平;LdMNPV-D品系虽然也延长了亚洲型舞毒蛾的发育历期但总虫期未达到显著水平。亚致死剂量的LdMNPV 3个地理品系降低了亚洲型舞毒蛾的雌雄性比。LdMNPV-D品系对雌雄虫蛹重的影响均达到显著水平;而LdMNPV-J品系对雌虫蛹重的影响达到极显著水平;LdMNPV-H品系对雌雄虫的蛹重均没有显著性的影响。     

DNA insecticides: the lethal potency of LdMNPV IAP-2 gene antisense oligonucleotides in pre-infected gypsy moth (Lymantria dispar L.) larvae

In this study, we designed and analysed the insecticidal effectiveness of two short single-stranded DNA fragments from LdMNPV (Lymantria dispar multicapsid nuclear polyhedrosis virus) IAP-2 gene. Our results show that the ssDNA fragments from the antisense region is selectively lethal, and rapidly decreases the population of second instar gypsy moth (Lymantria dispar L.) larvae one day post-treatment (Control-H₂O group vs oligoA_n group, χ² = 5; p < 0.05) when infected with LdMNPV as a trigger, before treatment through feeding with 75 pmol/µl of synthesized fragments from LdMNPV IAP-2 gene. Data analysis on larvae biomass did not show significant influence in all groups of the experiment when compared with the Control-H₂O group. Relatively, our preliminary evaluation of biochemical parameters (total glucose and total protein concentrations) did not show significant response to the applied ssDNA oligonucleotides. Our conclusive remarks based on mortality data support the concept that antisense oligonucleotides from LdMNPV IAP-2 gene can act as an insecticide against pre-infected gypsy moth larvae.     

舞毒蛾核型多角体病毒的基因及其在害虫防治中的应用

介绍了舞毒蛾核型多角体病毒（LdMNPV)的基因组结构、UDP－转葡糖基酶基因、增强子基因（enhancin基因）、蛋白激酶基因（vPK基因）、多角体蛋白（polyhedrin)基因、PE基因、P39－衣壳基因、DNA聚合酶基因（DNA pol)、25K FP基因以及LdMNPV的同源区（hrs)的结构和功能。这些基因或同源区的编码产物有的作为结构组分存在于包含体中，有的作为调节因子在病毒复制过程中参与病毒DNA的复制和基因表达的调节，有的负责协调病毒与虫体之间的关系。通过分析用于外源基因表达的LdMNPV的基因工程的实例，阐明了在害虫的防治领域，构建LdMNPV重组杆状病毒杀虫剂是LdMNPV分子生物学和基因工程的发展方向。