2种多胺对铁皮石斛瓶内开花的影响

以铁皮石斛无根组培苗为试验材料,研究不同浓度的外源腐胺（Put）和精胺（Spm）对铁皮石斛瓶内开花的影响。结果表明：培养基中添加适量的Put和Spm可提高开花率。当Put浓度为0.4 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为30.47%;Spm浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为22.26%;Put浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛始花期最短,为83.33 d,观赏期最长,为43.33 d。Put浓度为0.4 mg/L时,植株可溶性糖和可溶性蛋白含量最高;对照处理下植株全N含量达最高;Spm浓度为0.6 mg/L时,植株C/N比达最大。Put浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗碳氮化合物的积累,可提高铁皮石斛的开花率;Put浓度为0.2 mg/L时,能使花期提前,延长观赏期。Spm浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗株高增长和生根,促进铁皮石斛组培苗的营养生长。     

铁皮石斛鲨烯合酶基因的克隆及其组织表达模式分析

【目的】克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因(DoSS),并对其进行生物信息学与组织表达模式分析,为研究其生物学功能提供参考。【方法】采用RT-PCR和RACE技术,获得DoSS基因全长序列;利用生物信息学软件预测DoSS蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行DoSS蛋白氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助qPCR检测DoSS基因的组织表达模式。【结果】成功克隆获得铁皮石斛鲨烯合酶基因,命名为DoSS(GenBank注册号JX272631),其cDNA全长1 735bp,编码一条由410个氨基酸组成的多肽,分子质量46.99ku,等电点7.13;DoSS蛋白含有鲨烯/八氢番茄红素合成酶保守结构域(44-315位氨基酸);DoSS与其他多种植物SS基因的编码蛋白同源性很高(61%~75%),与水稻、玉米等单子叶植物的亲缘关系较近;DoSS基因为组成型表达,在根中的表达量最大,为叶的12.41倍;茎次之,为叶的1.87倍。【结论】成功克隆得到1个鲨烯合酶基因(DoSS)全长cDNA;DoSS基因的(在根中高)表达特征暗示,其可能在铁皮石斛根的生长发育中发挥重要的调控功能。     

大川河虎嘉鱼产卵场条件及其产卵习性的初步研究

本文报导了大川河虎嘉鱼的产卵时期、产卵群体、性比组成、产卵行为及其产卵场分布、产卵场的理化因子和环境条件,并阐述了产卵场分布、产卵习性与生态条件的关系,通过研究表明大川河虎嘉鱼产卵场分布在具有急洄流水温4.5—9℃、底质砂砾石、水质清澈、着生硅藻和水生昆虫幼虫丰富的大川河上游,全长约9.5公里,面积约为330亩,产卵期3月中下旬,产卵群体性比1:1。     

布氏哲罗鲑年龄与生长的初步研究

本文根据鳞片生长环纹的计数,并同鳞片、脊椎骨、鳃盖骨等上的年轮相对照,对4龄内的布氏哲罗娃的年龄与生长进行了研究。其结果摘要如下:(1)布氏哲罗鲑鳞片上的环纹随年龄而变化:每月长出二圈生长环线。鳞片上具有明显的“切割”年轮特征;脊椎骨、鳃盖骨上具有明带与暗带(线)形成的年龄特征。(2)布氏哲罗鲑在4龄内,体长在年龄上的回归方程为L=189.9468t+26.7934(r=0.991,df=35);体重年龄的回归方程为W=6.2451.e~(21219t)(r=0.978,df=35);鳞片半径与年龄的回归方程为R=0.7425t—0.1596(r=0.980,df=35);体重和体长的回归方程为W=6.7717357×10~(-6)L~(3.0740)(r=0.999,df=35);体长与鳞片半径的回归方程为L=251.0540R+71.2288(r=0.991,df=35)。(3)布氏哲罗鲑在4龄内,体长平均年增长为189.95mm;并随年龄增大而下降;生长常数、生长指标、肥满度系数等随年龄增大而增大。     

基于两类全基因组距离的EV71型病毒亲缘关系分析

[目的]了解世界各地EV71病毒的亲缘关系。[方法]下载了NCBI数据库所有EV71全基因组序列,以常用的Kimura 2-parameter距离和E距离进行距离矩阵邻接法建树。[结果]基于E距离和Kimura 2-parameter距离构建的进化树结果一致,2种方法均支持EV71进化树反映出的基于全基因组的病毒亲缘关系。[结论]E距离是病毒系统发育应用中另一种颇具潜力的新距离,能为鉴定EV71病毒亲缘关系提供支持。     

铁皮石斛幼苗壮苗培养的研究

以铁皮石斛无菌幼苗为外植体,研究不同基本培养基、生长激素、天然添加物、蔗糖浓度和活性炭浓度对幼苗壮苗的影响。结果表明:苗龄4个月的铁皮石斛幼苗最佳的壮苗培养基为:1/2MS+1.0mg/L NAA+30%椰汁+30g/L蔗糖+2g/L活性炭+8g/L琼脂,pH 5.8。     

铁皮石斛无公害标准化种植技术及产品质量分析

【目的】明确铁皮石斛无公害标准化种植技术规程及产品质量标准。【方法】以野生＂红皮软脚＂铁皮石斛种质作为组培材料,探讨不同规格组培苗（优质、合格）、不同栽植方式（床架栽、地厢栽）对铁皮石斛生长势、生长量及成药茎条产量的影响,同时测定鲜茎和枫斗中石斛碱和石斛多糖的含量。【结果】不同栽植方式对铁皮石斛组培苗种植成活率影响不大,但优质苗栽后成活率、生长势和成药茎条产量均明显优于合格苗,床架栽的生长势、生长量和成药茎条产量均明显优于地厢栽;地厢栽产品中检测到部分有机磷农药残留,床架栽因远低于限量标准而未检出;1年生、2年生鲜茎及枫斗中石斛多糖含量分别为19.72%、18.54%、29.41%;在生长年限不超过2.5年范围内,石斛碱含量随种植年限增长而增加。【结论】在广西自然气候条件下,采用优质组培苗、搭床架栽植及生态防治病虫害是实现铁皮石斛无公害标准化种植的关键。实际生产中,可以鲜茎多糖含量≥18%、枫斗多糖含量≥25%、重金属和农药残留量不超过无公害食品规定标准作为无公害铁皮石斛产品质量鉴定指标。     

激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应

[目的]筛选铁皮石斛离体培养开花诱导的适宜激素因子。[方法]采用铁皮石斛茎段离体培养的试管苗为试验材料,以MS为基本培养基,进行单因子激素处理（PP333、TDZ的不同浓度梯度）和多因子激素处理（PP333、TDZ、6-BA以及NAA的不同组合）的比较试验,研究激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应。[结果]单因子激素处理中,PP333、TDZ的适宜浓度和其诱导的花芽形成率分别为0.2 mg/L和8.5%、0.06 mg/L和15.5%;多因子激素处理对开花诱导的效应依次为：PP333＋6-BA＋NAA＋TDZ组合处理〉PP333＋6-BA＋NAA组合处理〉PP333＋6-BA组合处理和PP333＋NAA组合处理;适宜的激素组合为PP3330.3 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.5mg/L＋TDZ 0.06 mg/L,其花芽形成率和花开放率高达80.4%和90.3%。[结论]PP333和TDZ对铁皮石斛离体培养开花诱导具有重要影响,TDZ的效应大于PP333。适宜的TDZ浓度与其他激素的合理配比,有利于花芽的形成。     

铁皮石斛种苗不同部位抗氧化酶活性的差异

分析铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)种苗根、茎、叶抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性变化。结果表明,铁皮石斛种苗的根、茎、叶SOD酶活性大小顺序依次是茎根叶,POD活性大小顺序依次是根茎叶;而CAT活性大小顺序依次是叶根茎;不同部位的不同抗氧化酶的活性变化不同。推断根和茎生长过程中起抗氧化作用的关键酶是SOD与POD,而叶的生长过程中起抗氧化作用的关键酶是CAT。     

铁皮石斛miR168分子进化特征及响应蓝激光表达分析

笔者在关于铁皮石斛miRNA组学研究中发现较多响应蓝激光的miRNA,挑选关键且差异表达的miR168进行分子进化特征及其响应蓝激光表达分析。经对前体和成熟体分类统计、进化树构建、靶基因预测、启动子顺示作用元件及响应不同光质表达等进行分析,结果显示：miR168家族成员分布在40个植物物种中,前体和成熟体成员较少,其在植物中可能进化得不够完整;物种特异性是影响miR168前体进化特性的重要因素,而序列保守性是影响成熟体进化特性的主要因素;由3p臂上形成的miR168成熟体序列有较高特异性、5p臂形成的成熟体的序列保守性较高;Mfold和Rfam预测表明铁皮石斛miR168茎序列的保守性高于环序列,前体发卡结构较多,成熟体位置位于3p臂上,既包含茎序列也包含环序列;铁皮石斛miR168a的启动子主要包括光、激素、生物和非生物胁迫响应元件,可能通过这些顺式元件在其响应蓝激光中起调控作用;铁皮石斛响应蓝激光的靶基因主要包括ABC转运蛋白B家族成员、乙酰辅酶 A 乙酰转移酶等,主要参与植物生长发育和响应外界因素。实时荧光定量PCR结果表明,铁皮石斛miR168a与其靶基因gene-MA16_Dca006149、gene-MA16_Dca020995、gene-MA16_Dca017821参与蓝激光对铁皮石斛的影响。