沙拉沙星单克隆抗体制备及鉴定

为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC_(50)为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×10~8L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。     

真菌多糖免疫活性的研究进展

综述了10多年来在真菌多糖的免疫活性包括增强机体免疫系统功能、抗肿瘤、抗病毒等方面的研究进展,对其发展前景进行了展望。     

日粮和管理对东北虎血液指标及免疫功能的影响

从营养和管理方式均不同的两组东北虎群中各选5只体型适中的成年雄性东北虎作为研究对象，其中笼养组以纯肉为日粮，散养组以混合饲料为日粮。麻醉后采集静脉血，测定血液中各项生理生化指标，外周血淋巴细胞增殖性反应，以及血清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）的含量。结果：散养组外周血淋巴细胞增殖性反应显著高于笼养组（P〈0．05）；血清尿素、肌酐、淀粉酶、谷丙转氦酶、谷草转氦酶等指标在两组间差异显著（P〈0．05）：全血红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白含量、血清蛋白、甘油三酯、总胆固醇等指标组间差异不显著（P〉0．05）。结果显示：营养和管理方式对东北虎某些血液指标产生影响，混合日粮和散养方式更有利于维持东北虎的正常免疫机能和健康。     

The anti VEGF monoclonal antibody conjugated with nanometer particle of 5-FU

AIM:The characteristics of nanometer particles, which were prepared by the conjugation of anti-VEGF monoclonal antibodies and 5-fluorouracil-loaded polylactic acid nanometer particles (5-FU-NPs), were investigated for improving the anticancer activity of 5-FU. METHODS:The method of couple linkage of chemical bonds was used to prepare the 5-FU-NPs with VEGF antibody, then the appearance, distribution of particle diameter, releasing in vitro and the immunological activity were detected. RESULTS:The 5-FU-Ab-NPs appeared as regular globular, the average particle diameter was (202±23)nm. The 5-FU-Ab-NPs possessed the similar delayed release character of 5-FUs. More than 80% of the immmunogical activity were detected in conjugates-retained antibody by the immunological methods and electron microscopy. CONCLUSION:The 5-FU-Ab-NPs possess the similar delayed released activity to 5-FU-NPs and have double activity of immune targeting and delayed releasing, which may increase the local concentration of 5-FU.     

食品中安定和氯丙嗪残留检测研究进展

食品中镇静剂类药物的滥用对食品安全以及人类的健康构成了严重的威胁,因此加强对食品中镇静剂残留的监测十分重要。对免疫学方法、色谱技术、化学发光法在氯丙嗪和安定残留检测中的应用进行了总结,并对其应用前景进行了分析和展望。     

陆地棉产量构成因素条件变量分析

采用条件变量分析方法，对23个陆地棉品种(系)两年资料的棉花单株产量及其3个组分性状进行了分析，结果表明，单株铃数引起单株产量的变异最大．衣分引起单株产量的变异最小；衣分以外的其他因素与环境的互作对单株产量的影响最大．单株铃数以外的其他因素与环境互作对单株产量的影响最小；不同品种基因型效应不同．不同品种3个组分性状对单株产量的贡献也有所不同。     

L929细胞无血清悬浮驯化机器在流产衣原体灭活疫苗中的应用研究

为了给规模化生产流产衣原体提供悬浮细胞培养方法,本研究通过逐步降血清悬浮驯化法使贴壁L929细胞逐步适应悬浮培养环境,最终获得了一株可无血清悬浮培养的L929细胞株;将流产衣原体接种于L929悬浮细胞上,研究不同的促感染试剂以提高收菌量,并选择出最佳的培养方法;制备流产衣原体灭活疫苗,以25 μL 、50 μL、100 μL的剂量免疫Balb/c小鼠,攻毒后检测其免疫保护效果。结果显示,当该L929悬浮细胞初始接种密度为5×105个/mL 时,培养72 h后细胞浓度可达到约7×106个/mL,细胞活力在95%以上;在细胞密度为6×106个/mL,接菌量为5.5×104 IFU/mL,加入脂质体2000的量为1.7 μL/mL、放线菌酮浓度为0.4 μg/mL时,菌量增殖倍数最大,48 h内约扩增了52倍。经流产衣原体悬浮细胞灭活疫苗免疫后,小鼠产生的抗体水平随免疫剂量的增加而提升;接种50 μL、100 μL疫苗组小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、IFN-γ、IL-2的含量远高于接种25 μL疫苗和注射PBS组的小鼠;对免疫后的小鼠进行攻毒,接种疫苗组小鼠的脾脏、十二指肠、子宫中的流产衣原体基因组含量远低于未接种疫苗组小鼠。注射PBS组及接种25 μL疫苗组的小鼠子宫出现了不同程度的坏死及炎症,而其余两组小鼠的子宫无异常变化。结果表明,本试验成功驯化出１株L929悬浮培养细胞株,并且通过悬浮培养工艺制备的流产衣原体灭活疫苗免疫效果良好,接种50 μL、100 μL该灭活疫苗可以有效抑制流产衣原体的感染,该L929细胞全悬浮培养株的成功驯化为疫苗规模化生产提供了科学依据。     

牙鲆淋巴囊肿病毒纯化及不同来源病毒免疫特性比较

比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下：剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g差速离心,30%（W/W）蔗糖垫底超速离心（78500×g）浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心（78500×g）纯化病毒。电镜观察发现,出现在47%～52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子。此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Western blotting检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa。     

抗重金属Cr3+单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析

旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr~(3+)单克隆抗体(Cr~(3+)mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr~(3+)形成Cr~(3+)-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr~(3+)-ITCBE-BSA和检测抗原Cr~(3+)-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)进行免疫原鉴定;用Cr~(3+)-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立Cr~(3+)mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cr~(3+)mAb,并对其免疫学特性进行分析。结果表明,免疫原制备成功,Cr~(3+)-ITCBE-BSA中Cr~(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L,筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5 3株杂交瘤细胞,其中最好的2A11G5间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(2.56×103)、腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,对Cr~(3+)的半数抑制质量浓度(IC50)为16.6μg/L,与其他重金属离子无交叉反应。表明成功研制亲和力高、特异性强、稳定性好的Cr~(3+)mAb,为铬离子残留免疫学检测方法的建立奠定基础。     

普通小麦品种间以及与六倍体小黑麦种间杂种F1农艺性状的遗传分析

为给杂交选育优良小麦品种提供基础,本研究以普通小麦品种晋农190为父本,分别与9个普通小麦品种、7个六倍体小黑麦品种为母本配置杂交组合,对杂种F1代的农艺性状进行分析,发现除了无芒对有芒为显性之外,其余农艺性状均表现为数量遗传,F1代表现为超亲遗传或介于双亲之间。六倍体小黑麦的灰绿色叶片或茎秆、穗长长和红色不饱满的籽粒在杂种F1代显现,可作为鉴别真假杂种的典型性状。