高效毛细管电泳法同时分离氟喹诺酮类 与四环素类药物的研究

采用高效毛细管电泳建立4种氟喹诺酮类(FQS)与2种四环素类(TC)药物同时分离的方法。通过考虑缓冲液离子浓度、pH、有机添加剂以及分离电压、温度等电泳参数,通过正交试验确立了电泳的最佳条件:紫外检测波长270 nm,缓冲溶液为50 mmol.L-1硼砂-200 mmol.L-1硼酸,pH 8.41,分离电压为18 kV。结果表明,6种药物在12 min内达到完全分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,其相关系数R2为0.998 2~1,迁移时间的相对标准偏差为0.25%~0.68%,峰面积相对标准偏差为7.3%~9.8%。     

沙门氏菌对六种氟喹诺酮类药物的敏感性试验

对鸡源、猪源、人源、食品源的沙门氏菌进行了鉴定,对敏感菌株进行了耐药性诱导;并用琼脂平板二倍稀释法,测定了6种氟喹诺酮类药物对临床分离和体外诱导的68株沙门氏菌的MIC,结果表明临床沙门氏菌对环丙沙星的耐药率达61.8%(37/60),而且6种氟喹诺酮类药物之间的交叉耐药现象非常严重.     

安徽省规模化养殖场鲜奶中氟喹诺酮类药物残留的分析检测

建立了固相萃取-高效毛细管电泳同时分离达氟沙星、恩诺沙星和培氟沙星3种氟喹诺酮类药物的方法,并对来自于安徽33个牧场的165组牛奶样品进行检测.研究了缓冲液离子浓度、pH、分离电压以及温度等电泳参数,最终通过正交试验得到最佳分离条件:紫外检测波长215 nm,缓冲液为40 mmol·L-1磷酸氢二钾～ 20mmol·L-1柠檬酸冲溶液体系,pH8.10,检测电压20 kV,检测温度25℃.结果表明,3种药物在7 min内完全分离,各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,R2为0.9977～0.9997;试验平均回收率在71.00％～84.58％之间,RSD为0.22％～0.67％(迁移时间)和5.41％～9.75％(峰面积).165组鲜牛奶中3种氟喹诺酮类药物的检出率为9.1％.安徽省奶源存在一定程度的氟喹诺酮药物残留,需要加强对牧场的监测和管理力度.     

禽大肠杆菌DNA旋转酶活性改变与其对氟喹诺酮类药物耐药性的关系研究

用亚ＭＩＣ（药物最低抑菌浓度）连续递增式传代培养法获得了禽大肠杆菌（血清型为Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８）对氟喹诺酮类药物（ＦＱｓ）—诺氟沙星（ＮＦＬＸ）、依诺沙星（ＥＮＸ）、环丙沙星（ＣＰＬＸ）稳定的高度耐药菌株（ＭＩＣ提高≥１２８倍）,通过对耐药菌株和敏感菌株ＤＮＡ旋转酶的分离、提取及活性检测,并进行统计学分析比较,研究ＤＮＡ旋转酶活性改变与细菌耐药的关系,结果表明：禽大肠杆菌对氟喹诺酮类药物产生耐药的一个重要因素为其ＤＮＡ旋转酶的活性改变。     

UPLC-MS/MS法测定氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加物利巴韦林

建立了氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加物利巴韦林检测的UPLC-MS/MS方法。样品经提取稀释后,采用ACQUITY UPLCR BEH amide色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描测定。结果显示,利巴韦林在1~50 ng/mL的范围内线性关系良好（R2=0.9984）;样品检出限为0.5 mg/g,定量限为2 mg/g。在40、50、60mg/g添加水平的回收率为90%～110%,批内批间变异系数均小于10%。本方法快速、灵敏、重现性好,适用于氟喹诺酮类药物可溶性粉中非法添加利巴韦林的检测。     

鸡源大肠杆菌质粒介导的氟喹诺酮类药物耐药基因qnrA的分子检测

对2005年~2007年从豫北地区临床分离的377株鸡源大肠杆菌进行生化鉴定,MIC值测定。被测菌株对氟喹诺酮类（FQs）药物恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星均呈严重耐药,耐药率分别为94.9%、93.9%、94.9%。选取对恩诺沙星耐药（MIC>32 μg/ml）的235株大肠杆菌进行qnr基因的分子检测,结果显示仅有1株大肠杆菌（MIC=128 μg/ml）呈qnr基因阳性,经测序分析该基因命名为qnrA。     

肉鸡组织中四种氟喹诺酮类药物休药期的探讨

选择27日龄健康艾维茵肉仔鸡,研究了四种氟喹诺酮类药物残留消除规律。饲喂剂量遵循《中国兽药手册》药物用量之规定,饲喂方式有四种药物单独饲喂、两种药物混合饲喂、四种药物混合饲喂三种类型,饮水给药,连续5 d。对不同停药时间所取鸡胸肉、鸡腿肉和肝脏样品中的药物残留进行分析,发现肝脏中的消除最慢,鸡腿肉中的消除最快。根据日本最高残留限量制定休药期,四种药物单独饲喂,氧氟沙星(OFL)、诺氟沙星(NOR)、环丙沙星(CIF)、恩诺沙星(ENR)的休药期分别为4 d、6 d、7 d、9 d;CIF和ENR两种药物联合饲喂时,休药期定为9 d;四种药物混合饲喂时,休药期定为9 d。根据我国最高残留限量制定休药期,四种药物单独饲喂,OFL、NOR、CIF、ENR的休药期分别为3 d、3 d、3 d、6 d;CIF和ENR两种药物联合饲喂时,休药期定为6d;四种药物混合饲喂时,休药期定为6 d。