甘蓝型油菜两种纯合中芥酸基因型的分离和鉴定

本研究从中国高芥酸甘蓝型油菜品种华油8号与加拿大无芥酸品种Altex杂交的后代中,分离和鉴定出了两种不同的纯合中芥酸基因型,它们在一个基因座位上具有纯合的有芥酸基因E.在另一座位上具有纯合的无芥酸基因c,其基因型组成可分别用E_AE_Ae_Ce_C和e_Ae_AE_CE_C表示。二者的芥酸含量均为27%左右,基本上等于双亲的平均值。这两种基因型的杂交后代和回交后代的分离结果表明,其遗传行为与无芥酸和高芥酸杂交后代的结果相同,这再次证实了芥酸的遗传假说,同时也证实了这两种基因型的遗传组成。文后讨论了这两种基因型的可能用途。     

新疆野生油菜芥酸含量的遗传分析

通过新疆野生油菜高、低芥校组合正反交Ｆ１、Ｆ２，回交一代及相应的杂交亲本种子中芥权的测定，分析了新疆野生油菜芥酸的遗传。结果表明，新疆野生油菜芥权酸含量受两对加性基因控制，每个芥权基因控制的芥量为５％左右。     

油菜芥酸含量表型分类的一种方法

业已证实,油菜的芥酸含量受一对或两对基因控制,其遗传行为较为简单,但由于该性状是用量表示的,有时各类表现型之间分界不十分明显,给人为分类带来困难。本文根据动态聚类(按批修改法)的基本思想,建立了一种数量分类方法,该法分类的准则是标准差单位的最近距离.经大量实例应用,证明该法的分类效果较好.     

甘蓝型油菜芥酸含量的双列杂交分析

对甘蓝型油菜四种纯合芥酸基因型的双列杂交F_1、F_2和回交世代,按Hayman—Jinks方法进行了分析。t~2检验、b(Wr,Vr)回归分析及Wr—Vr的方差分析都表明,双列杂交F_1、F_2及回交世代的芥酸含量均不存在非等位基因互作,符合加性显性模型。加性效应占绝对优势,显性作用较小。F_1代和回交世代其显性效应达显著水平,F_2代不显著,显性度为0.05—0.11,显性方向为正。芥酸存在一定的母性影响,其中又以F_1代最为明显。芥酸的广义和狭义遗传力均高,除回交世代的狭义遗传力为96.8％外,其余均达99％以上。     

Diversity and association analysis of important agricultural trait based on miniature inverted-repeat transposable element specific marker in Brassica napus L.

Miniature inverted-repeat transposable elements(MITEs)are a group of DNA transposable element(TE)which preferentially distributed with gene associated regions.Tens of MITEs families have been revealed in Brassica napus genome,they scatter across the genome with tens of thousands copies and produce polymorphisms both intra-and inter-species.Our previous studies revealed a Tourist-like MITE,Monkey King,associated with vernalization requirement of B.napus,however there are still few studies reveal MITE association with agricultural traits in B.napus.In the present study,80 polymorphic markers were developed from 55 MITEs,and used to evaluate genetic diversity in a panel of B.napus accessions consisting of 101 natural and 25 synthetic genotypes.Five agricultural traits,oil content,glucosinolate content,erucic acid content,weight of thousand seeds(WTS)and plant height,were investigated across 3-years field experiments,in addition,two traits,hypocotyl length and root length,were evaluated at the 4-leaf stage in the laboratory.Correlations between the MITE-based markers and seven traits were analyzed,finally,10 polymorphic markers produced by 6 pairs of MITE specific primers were revealed relatively high correlation with 5 traits.Two polymorphic markers were anchored with two candidate genes,BnaA02g13530D and BnaA08g20010D,respectively,which may contribute to glucosinolate content and WTS.This research may contribute to genetic improvement through utilization of MITE-induced polymorphisms in Brassica species.     

甘蓝型油菜脂肪酸延长酶FAE1 RNA干扰体的构建

利用来源于油菜fael基因编码区的长498bp的2个片段，反向连接于1个83bp的内含子两端，构建成RNAi载体，以期在油菜中转录后能有效抑制fael基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长2066bp，经限制性内切酶消化及序列测定验证，其序列结构与设计一致。通过农杆菌介导的油菜转化，获得油菜再生株系29个。     

甘蓝型油菜脂肪酸成分的基因作用形式和效应

对4种纯合芥酸基因型双列杂交所产生的9种芥酸基因型的6种主要脂肪酸的含量配适二基因模型,分析结果表明:芥酸含量的加性遗传方差占总遗传方差的99.5%以上,A 和 C 两染色体组中基因座位的加性效应基本上相等,F_1代和 F_2代的 d_a 分别为14.19和13.90,d_c 为13.81和13.38。廿碳烯酸以加×加互作为主,在 F_1和 F_2代中,该分量占     

导入LPAAT和KCS基因对油菜种子芥酸含量的影响

采用农杆菌介导法,以下胚轴为转化受体,将溶血性磷脂酸酰基转移酶（LPAAT）和酮脂酰辅酶A合成酶（KCS）基因导入2种不同基因型（“Drakkar”和“Maplus”）的甘蓝型油菜,共获得247株再生植株,其再生频率分别为15.1%和2.0%。PCR检测和Southern杂交分析证实,外源基因已整合到油菜基因组中,转化频率分别为3.6%和0.7%。种子中芥酸含量因外源基因的导入使零芥酸油菜“Drakkar”提高到10.5%,高芥酸品种“Maplus”提高了5.0%,最高达62.8%。     

甘蓝型油菜遗传图谱的构建及芥酸含量的QTL分析

一个由甘蓝型油菜品种Quantum (黄花、低芥酸)和人工合成的甘蓝型油菜品系No.2127-17（白花、高芥酸）为亲本材料建立的DH群体中芥酸呈现单基因的遗传模式。为了发展与芥酸紧密连锁的分子标记对其实行有效的控制,随机选择121个结实正常的DH系为作图群体,利用SSR和RAPD标记构建了一张甘蓝型油菜的遗传连锁图谱。在亲本间检测     

甘蓝型油菜烯脂酰-CoA还原酶基因BnECR的克隆及功能分析

反式烯脂酰-CoA还原酶(trans-2, 3-enoyl-CoA reductase, ECR)是催化超长链脂肪酸(VLCFAs)合成的脂肪酰-CoA延长酶之一。根据已报道拟南芥等的ECR基因设计引物,采用RACE (rapid amplification of cDNA ends)方法从甘蓝型油菜中克隆ECR的全长cDNA序列和对应的基因组序列,命名为BnECR (GenBank登录号分别为FJ899705和FJ899706)。序列分析结果显示,BnECR的全长cDNA序列为1 328 bp,对应的基因组序列为2 093 bp,由4个外显子组成,在ORF的上、下游分别有一个163 bp的5′UTR和一个232 bp的3′UTR。根据编码区预测BnECR前体蛋白为一个310个氨基酸残基的多肽链,包含ECR蛋白的重要功能位点K₁₄₄、R₁₄₅及一个NAD(P)H结合基序G₂₂₅SGGYQIPR/HG₂₃₄。NCBI Blastn、氨基酸序列多重比对及保守域分析表明, 该基因与拟南芥AtECR基因的同源性最高,是对应拟南芥AtECR的垂直同源基因。RT-PCR分析表明,BnECR基因在甘蓝型油菜根、茎、叶、花及角果中均有表达,其中在茎中的表达量最高。BnECR在高芥酸材料种子发育中后期的表达量显著高于低芥酸种子,表明BnECR可能参与甘蓝型油菜芥酸的合成。将BnECR克隆到酿酒酵母的穿梭表达载体中,分别转化野生型酵母By4743和突变体菌株YDL015c,添加半乳糖诱导表达。气相色谱分析表明,BnECR在酿酒酵母中有效表达,转化菌株中的芥酸(C22:1)占总脂肪酸含量的1.34%,比对照增加了52%;对突变体的转化结果表明芥酸含量恢复到野生型水平。