秤锤树叶片内生真菌的分离鉴定及其对植株生长的影响

本研究从秤锤树叶片中分离内生菌进行分子鉴定,并接种到无菌组培苗中研究其对植株生长的影响。研究结果显示,从秤锤树叶片中共分离获得7株真菌。扩增出的6个菌株经ITS测序,在NCBI网站上进行基因序列比对,鉴定出其中5株菌株均属于球毛壳菌（Chaetomium globosum）,1株属于子囊菌（As-comycete）。进一步实验表明：分离的菌株多数对组培苗的株高生长影响不大,可初步鉴定其为内生菌,其中的属于球毛壳菌的F和H菌株对无菌苗的株高有明显的促进作用。     

南京小龙山植物内生与土壤微生物群落差异及其矿物风化功能的研究计划项目

以南京小龙山植株海州香薷、根际土壤与非根际土壤作为材料得到可培养的植物内生细菌、根际细菌与非根际细菌,通过研究样品间的群落差异,来分析所得菌种对植株、土壤的作用与影响.将可培养细菌加入钾长石中,通过测定分析不同生境细菌对矿物的风化能力,筛选出具有高效释放矿质元素能力的菌株.该研究有助于丰富微生物资源库,了解植物内生细菌与不同土壤微生物的作用与联系,为深入阐明细菌的矿物风化作用机制打下基础.     

产黄酮银杏内生菌的分离与鉴定

从健康银杏植株中分离到126株内生菌,并通过HPLC-UV检测方法筛选到8株内生菌产黄酮类物质。用察氏平板培养基分离菌株,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。初步鉴定结果分别属于匐柄霉、丛梗孢属、交链孢属、镰孢霉属、赤霉属、蜜孢霉、放线菌属和暗梗单孢霉属。     

马桑根瘤内生菌纯培养物的分离、回接及其生物学特性

多次采用根瘤切片法直接从野生的马桑根瘤中分离内生菌纯培养物均未获成功;但用同样方法从温室里人工接种形成的马桑根瘤中却分离到大量纯培养物。其中273株经盆栽回接后发现有24株能侵染结瘤;少数菌株还通过半固体斜面和珍珠岩盆栽回接成功。对10株纯培养物表型特性的研究表明,它们均具有Frankia的形态和培养特征;生理类型除有A、B两型外,尚出现有一类A、B混合型,其中凡属B型菌株的均能侵染结瘤,A型则不能,两株A、B混合型中有1株能结瘤,另1株却不能;碳、氮源利用特性和其它Frankia基本相似;细胞壁组分既有Ⅲ型也有Ⅱ型;全细胞鉴别性糖大多为木糖和半乳糖,少数菌株只含有半乳糖或木糖,或含有半乳糖、木糖和阿拉伯糖。DNA中G+C mol%为65%～74%。     

具杀虫活性雷公藤内生菌的分离与筛选

以卫矛科植物雷公藤的根、茎、叶为材料分离得到内生菌183株,其中真菌111株,放线菌23株,细菌49株。雷公藤植株的不同组织部位的内生菌数量有较大的差异,雷公藤根中分离得到的内生菌最多(89株),占总数的48.63%,叶部次之(72株),占总数的39.35%,茎部分离得到的内生菌最少(22株),占总数的12.02%。以卤虫、蚊幼及蚜虫为试虫,对183株内生菌的杀虫活性进行筛选,得到3株对蚜虫具有较高毒杀活性的菌株。其中菌株11-6-76的胞内和胞外代谢物均具有较高的杀蚜活性,蚜虫的死亡率分别为78.64%和70.75%;菌株11-3-37和12-2-47的胞内代谢产物提取物对蚜虫的毒杀活性较高,蚜虫死亡率分别为82.74%和76.97%。菌株11-3-37、11-6-76和12-2-47胞内代谢产物粗提物对蚜虫的LC_(50)分别为34.8mg/mL、31.2mg/mL和46.4mg/mL。     

A diazotrophic, indole-3-acetic acid-producing endophyte from wild cottonwood

An endophytic bacterium, wild poplar strain B (WPB), isolated from stems of wild cottonwood (Populus trichocarpa) was identified to Burkholderia vietnamiensis by analyzing the recA and rDNA genes. Phylogenetic analysis of the nifHDK cluster indicates that the WPB isolate shares high sequence similarity with known B. vietnamiensis strains. The nitrogenase activity of WPB was determined by a ¹⁵N₂ incorporation assay and an acetylene reduction assay. WPB was also monitored for production of indole-3-acetic acid (IAA), a phytohormone which can promote plant growth, when incubated with l-tryptophan. In addition, its plant growth promotion capacity was assessed by inoculating the WPB strain onto Kentucky bluegrass in nitrogen-free medium. Compared to uninoculated control plants, the plants inoculated with WPB gained more dry weight (42%, p = 0.01) and more nitrogen content (37%, p = 0.04) in 50 days.     

青霉属银杏内生菌的筛选及鉴定

对银杏的不同组织部位进行了内生菌的筛选及鉴定工作,利用酒精消毒法在银杏的干、枝、叶不同组织部位中分离到29株内生菌。抑菌试验结果表明,其中的18株具有抑菌活性,B1、B6的抑菌能力最强;对2菌株的培养形态和生理特征进行鉴定,结果表明它们均属于青霉属。     

云药产业发展与内生菌研发

系统分析和探讨了云南药用植物资源发展存在的优势和问题,阐述了植物内生菌的研究进展。认为药用植物内普遍存在的个别内生菌可以产生与宿主相同或相似的生物活性物质的理论为云药产业发展指明了道路,开展云南药用植物内生菌研究具有重要的经济和社会意义。     

水稻植株及其内生微生物磷脂脂肪酸生物标记异质性

采用改良磷脂脂肪酸法分析水稻植物自身磷脂脂肪酸和其内生微生物磷脂脂肪酸生物标记异质性。结果表明,水稻植株和其内生微生物共有磷脂脂肪酸有直链磷脂脂肪酸20∶0、12∶0、16∶0、18∶0和支链磷脂脂肪酸如18∶3ω6с(6,9,12)、19∶0 CYCLOω8с、15∶1ω6с等,且在水稻中含量均低于30μg/g,在内生微生物中的含量高于30μg/g。水稻内生微生物独有磷脂脂肪酸主要为支链磷脂脂肪酸,共有22种如i20∶0、20∶1ω9с、12∶0 3OH等,含量差异很大,为0.91～11 481.25μg/g。对水稻内生微生物独有磷脂脂肪酸对应分析CA得到,遗传距离近的水稻品种其对应距离也近,CA载荷图显示内生微生物磷脂脂肪酸对应距离小于姨2的为多元分布,即该磷脂脂肪酸分布在多个水稻品种中;大于姨2的为单一分布,即仅在特定的水稻品种中分布,表明水稻内生微生物磷脂脂肪酸分布与水稻品种遗传有关。     

Detection of fungi producing infection-inhibiting metabolites against <Emphasis Type="Italic">Alternaria alternata</Emphasis> Japanese pear pathotype from fungi inhabiting internal tissues of Japanese pear shoots

Fungi inhabiting Japanese pear were isolated from internal tissues of cv. Nijisseiki, and culture filtrates (CFs) of 100 isolates were evaluated for their inhibitory activity against infection by Alternaria alternata Japanese pear pathotype. CFs of 11 isolates inhibited lesion formation on the pear by the pathogen. Among these isolates, CFs of five isolates inhibited spore germination. CFs of the six other isolates inhibited appressorial formation, infection hypha formation, AK-toxin production, or a combination of these actions. Analysis of sequence homology in the rDNA ITS1 regions of these isolates showed that most isolates had high homology with some fungal endophytes.