16种观赏石斛兰的遗传关联性分析

石斛兰种质资源的评价与创新是育种工作的基础。为了挖掘石斛兰资源有效的分子标记以及优良目的性状相关基因,本研究主要观测了16份石斛兰种质资源形态学性状以及利用RAD-seq分子标记技术分析这些品种资源之间的遗传进化关系,对16种观赏石斛兰形态学与RAD-seq分子标记进行了关联分析。结果表明,形态学分析显示16个石斛兰品种间遗传变异较大,相似系数在0.776～0.926之间;与形态学结果相比,16个石斛兰品种RAD-seq的测序结果显示种间遗传差异更大,与参考基因组相比相似系数在0.252 2～0.898 2之间。RAD-seq聚类分析表明,聚石斛、霍山石斛和金钗石斛亲缘关系较近;形态学关联分析发现,这3个石斛兰品种都具有花香且花序侧生现象,其他石斛兰品种没有此特征。对这3个石斛兰品种区别于其他品种的SNP标记位点相关序列进行提取和注释,发现了大量的次生代谢途径和光合作用相关基因。16个观赏石斛兰品种间存在较丰富的遗传多样性,其中聚石斛、霍山石斛和金钗石斛亲缘关系较近,并发现分类结果可能与花香和花序侧生现象相关。     

鄂西山区金钗石斛生物学特性及人工栽培技术

鄂西山区地势起伏,气候变化大,金钗石斛天然分布在海拔600～1200m范围。文章对金钗石斛在自然状态下的生长发育及生态习性进行分析研究,并结合他人研究成果,提出在鄂西山区人工栽培金钗石斛所需要的适宜生长基质、光照、温度及空气相对湿度等,同时论述人工栽培技术。     

石斛兰组织培养和细胞学观察

以石斛兰杂交种的茎尖、茎节和幼嫩小叶片作为外植体均可诱导出愈伤组织。愈伤组织在同一培养基上可同时出现不定芽和拟原球茎，两者都能进一步发育成完整幼苗。拟原球茎和不定芽分别来自愈伤组织的表层细胞和深层细胞。由愈伤组织、不定芽和拟原球茎交错在一起的团块可以多次切割继代培养，进行大量无性繁殖。     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

2种多胺对铁皮石斛瓶内开花的影响

以铁皮石斛无根组培苗为试验材料,研究不同浓度的外源腐胺（Put）和精胺（Spm）对铁皮石斛瓶内开花的影响。结果表明：培养基中添加适量的Put和Spm可提高开花率。当Put浓度为0.4 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为30.47%;Spm浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为22.26%;Put浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛始花期最短,为83.33 d,观赏期最长,为43.33 d。Put浓度为0.4 mg/L时,植株可溶性糖和可溶性蛋白含量最高;对照处理下植株全N含量达最高;Spm浓度为0.6 mg/L时,植株C/N比达最大。Put浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗碳氮化合物的积累,可提高铁皮石斛的开花率;Put浓度为0.2 mg/L时,能使花期提前,延长观赏期。Spm浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗株高增长和生根,促进铁皮石斛组培苗的营养生长。     

霍山石斛类原球茎诱导及其发育过程研究

 以霍山石斛试管苗带节茎段为材料, 诱导产生类原球茎, 并研究类原球茎发育过程。结果表 明, 霍山石斛类原球茎诱导的适宜培养基为Knudson + 2, 4-D 0.1 mg·L ^{- 1} + KT 0.05 mg·L ^{- 1} , 诱导率为25.50%。以固体静置、固液双层静置、液体静置、液体振荡4种不同培养方式进行增殖培养, 其中液体振荡培养方式更适于类原球茎快速增殖。类原球茎通过胚状体发生途径形成, 类似于合子胚的发育, 即经历原胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶胚, 最后发育为成熟胚。类原球茎发育进程大致可分为类原球茎形成期、类原球茎肥大期、茎叶分化期、茎叶形成期以及茎叶伸长期等阶段。     

Enhanced micropropagation of Dendrobium huoshanense C.Z. Tang et S.J. Cheng through protocorm-like bodies: The effects of cytokinins,carbohydrate sources and cold pretreatment

The effects of cytokinins, carbohydrate sources and cold pretreatment on the conversion of protocorm-like bodies (PLBs) to shoots were investigated for the enhancement of micropropagation of Dendrobium huoshanense C.Z. Tang et S.J. Cheng, an endangered medicinal plant in China. The effects of cytokinins and carbohydrate sources on the conversion of PLBs to shoots depended on their types and concentrations. The best results in terms of shoot development from PLBs occurred on 1/2 MS medium supplemented with 20 μM kinetin and 10 g l⁻¹ maltose. Cold pretreatment at 10 °C for 1–2 weeks significantly enhanced the conversion of PLBs to shoots, and over 1300 shoots were obtained from one gram of PLBs after 3 months of culture. The developed shoots were rooted on growth regulator-free MS medium supplemented with 8 g/l banana paste to give complete plantlets, which were successfully acclimatized with a survival rate of approximately 65%. The results indicate that a suitable cold pretreatment (10 °C for 1 week) followed by the use of 20 μM kinetin and 10 g/l maltose in 1/2 MS medium would produce a large number of shoots from PLBs for plantlet regeneration of D. huoshanense.     

基质和炼苗方法对春石斛试管苗假植的影响

以4个品种的春石斛为材料,研究了不同的假植基质和不同的炼苗时间和方法对春石斛试管苗假植成活率和初始生长的影响。结果表明,所涉及的基质中,水苔的成活率最高,而炼苗方法以封瓶炼10 d再开瓶炼1 d最佳。     

石斛茎部内生真菌的分离与分布

采用70%酒精与0.1%升汞(HgCl2)相结合的表面消毒法,分离石斛茎部内生真菌。实验结果表明,升汞的消毒时间1~8 min均可,以5 min左右为宜。石斛茎部内生真菌主要分布于紧贴表皮的一小部分组织中。     

太空春石斛组培快繁黄苗现象成因初探

以太空春石斛丛生芽为试验材料,初步研究了基本培养基、激素和附加物质香蕉对黄苗现象的影响。试验结果表明:基本培养基以1/2MS培养基最适宜;激素NAA和IBA对黄苗影响差异不显著,NAA0.2mg/L较适宜;而附加物质香蕉对黄苗的影响较大,黄苗较严重。