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CPA(cation proton antiporter)超家族通过转运质子和一价金属离子调节细胞内离子和pH稳定。阳离子质子转运体(cation/H+ exchanger,CHX)基因家族属于CPA2(cation proton antiporter 2)超家族,其N端有一个Na+/H+ exchanger结构域,对植物维持细胞离子平衡、花器官发育起着至关重要的作用。通过生物信息学手段,系统地分析了蒺藜苜蓿CHX家族基因,通过全基因组筛选共鉴定出47个MtCHXs;染色体定位分析表明蒺藜苜蓿CHX基因分布在8条不同的染色体上;同源性分析显示蒺藜苜蓿和拟南芥亲缘关系近,而与水稻亲缘关系远;进一步进化关系分析将47个MtCHXs基因分为5组,并且各组内成员在基因结构和基序上比较保守;顺式作用元件分析发现MtCHXs基因启动子包含大量光响应元件、激素响应元件以及干旱、低温、创伤响应元件;表达特性分析发现MtCHXs在生殖器官中高表达,并且响应干旱、低温等非生物胁迫。 相似文献
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对兔卵母细胞的孤雌激活方法进行探讨,为兔的体细胞核移植奠定良好的技术平台。体外成熟培养20~22h的兔卵母细胞随机分组,分别进行以下试验:采用不同脉冲电压、脉冲次数和脉冲时间,电激活兔卵母细胞,摸索最佳电激活参数;比较不同的激活方法处理免卵母细胞的效果,Ⅰ:Ion5min+6-DMAP3h,Ⅱ:Ion5min+CHX3h,Ⅲ:Ion5min+6-DMAP联合CHX3h,Ⅳ:电激1次联合6-DMAP+CHX3h;优化6-DMAP与CHX作用时间。结果显示:当电激参数为:电压40V/mm,脉冲时间20μs和脉冲次数3次时,兔孤雌胚的分裂率和囊胚率最高,可达80.64%和14.51%;采用第Ⅳ种方法激活兔的卵母细胞,胚胎的分裂率和囊胚率(80.64%,13.71%)均显著高于Ⅰ组(66.67%,8.6%)和Ⅱ组(43.21%,1.24%,P〈0.05),略高于第Ⅲ组(77.59%,12.07%);当兔孤雌胚分别在含6-DMAP和CHX的CM中培养1。h和3h时,1h处理组在分裂率(80.68%vs77.59%)和囊胚率(15.91%vs12.07%)上都略高于3h处理组。结果表明:兔卵母细胞经Ion处理5min,或先电激1次(参数为电压40V/mm,脉冲时间20μs,脉冲3次),再用2mmol/L6-DMAP+5mg/LCHX处理1~3h,均可获得较好的激活效果,有利于兔孤雌胚的发育。 相似文献
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Neutrophils (polymorphonuclear leukocytes: PMNs) are essential for the host defense against various infections and are often injurious to the host, causing inflammatory diseases where tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) is suggested to play an important role. Since an effect of TNF-alpha on canine PMN apoptosis has not been studied, canine PMNs were stimulated with recombinant human (rh)TNF-alpha in the present study to investigate the effect of TNF-alpha on canine PMN apoptosis. PMN apoptosis and function to produce ROS were assessed by flow cytometry. Delayed apoptosis was observed in the PMNs treated with rhTNF-alpha at 100 ng/ml, accompanied by retention of capability to produce ROS. However, PMN apoptosis was accelerated by rhTNF-alpha combined with cycloheximide. Therefore, it is indicated that TNF-alpha is able to activate anti- and pro-apoptotic pathways in PMNs and that the inhibition of PMN apoptosis by TNF-alpha requires protein synthesis in the PMNs. 相似文献
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蛋白核酸合成抑制剂对甜菜谷氨酰胺合成酶活性调控分析 总被引:1,自引:1,他引:0
在氮素诱导下,进行甜菜谷氨酰胺合成酶(GS)活性的测定,筛选出最佳的氮素诱导处理,研究核酸合成抑制剂放线菌素D和蛋白合成抑制剂放线菌酮对GS在酶活水平上的表达调控。结果表明,NO3-:NH4+=80:20处理时,GS活性最高,并且在此处理下放线菌素D和放线菌酮均能抑制GS活性。说明甜菜GS的表达可能在转录水平和翻译水平上均受到调控。 相似文献
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水牛卵母细胞孤雌激活方法研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对体外成熟(IVM)27 ̄28h的水牛卵母细胞经7%酒精(EH)激活处理5min后,置入不同浓度的(0,0.625μg/ml,1.25μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml)放线功酮(CHX)培养10h,而后固定染色或在胚胎培养液(CM)中继续培养检查激活分裂率。结果培养在0.625μg/ml和1.25μg/ml CHX的卵母细胞的激活分裂率和总原核形成率明显高于对照组(P〈0.05),而培养 相似文献
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为构建CHX-GFP融合基因并将其在胡萝卜愈伤组织中瞬时表达。采用融合PCR方法,将属于CAP2家族的Na+/H+反向转运蛋白基因CHX和GFP基因相融合,利用中间载体,采用DNA重组技术将CHX-GFP融合基因插入到p1301植物表达载体中,采用冻融法将重组质粒导入到农杆菌中,遗传转化时所用侵染液为1/2MS+AS 100μmol/L,共培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+琼脂6 g/L+蔗糖30 g/L+葡萄糖10 g/L+AS 50μmol/L,共培养时间为4 d。成功构建了p1301-35S-CHX-GFP-Nos植物表达载体,CHX-GFP融合基因在胡萝卜愈伤组织中得到瞬时表达,表达效率为75%。采用融合PCR获得CHX-GFP融合基因的方法比较简单,无须知道DNA序列的酶切位点,省时省力,CHX-GFP融合基因及其表达载体的成功构建将为进一步探查CHX亚细胞定位及CHX基因的功能奠定了基础。 相似文献
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