小兴安岭凉水自然保护区枫桦红松林土壤真菌

2001年5～9月，在黑龙江省小兴安岭凉水自然保护区枫桦红松林设立临时标准地，采用“之”字形路线及土壤剖面取样法多点取土壤样品。利用稀释平板法和植物残渣法，选用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、查氏琼脂培养基(CzA)分别进行菌株的分离、培养、纯化。将纯化出的菌株转接到PDA、CzA上，观测菌落形态、生长速度、颜色变化等因子。经过显微观察菌丝体、孢子以及子实体的形态、结构等，初步鉴定出18个不同属的土壤真菌，其中，包括2个中国新纪录属、新记录种：桦链二孢Bispora betulina、黄褐拟毛孢Chaetopsina fulva。     

Bispora sp. MEY-1 来源嗜酸果胶甲酯酶性质分析及其应用研究

食品加工副产物富含果胶类物质，果胶酶可以将其降解为果胶低聚糖，不仅可以有效控制果胶低聚糖的聚合度及结构，还能实现食品加工副产物废弃资源的再利用，创造新的经济效益。从嗜酸真菌Bispora sp. MEY-1克隆获得一个碳水化合物第8家族的果胶甲酯酶基因Pem8A，将其连接到表达载体pPIC9上，在毕赤酵母 GS115 中实现高效异源表达。对纯化后的重组蛋白PME8A的酶学性质进行测定，发现其最适温度为60 ℃，在55～80 ℃可保持80%以上的酶活；最适pH为3.5，在pH 2.5～5.0范围内维持50%以上的酶活，是真菌来源中少数的嗜酸果胶甲酯酶。用PME8A处理苹果渣、橘皮果胶粗提物后，去甲基化效果明显，使得Achaetomium sp. Xz8来源的内切多聚半乳糖醛酸酶PG8fn酶活分别提高了8.5倍和1倍，表现出很好的协同效应。研究证明果胶甲酯酶PME8A可以应用于从食品加工副产物生产果胶寡糖，为果胶低聚糖的获取提供了新的方法。     

一种来源于Bispora betulina的酸性木聚糖酶基因克隆及其酶学性质研究

利用简并PCR和TAIL-PCR技术从嗜酸性真菌Bispora betulina中克隆得到一个酸性木聚糖酶基因xyn11BB。该基因全长1 207 bp,含有三段内含子、一段外显子和一个终止密码子,编码由297个氨基酸组成的蛋白质,推测蛋白质含有一个CBM1结构域。将不带原基因信号肽编码序列的cDNA基因以正确阅读框架克隆到表达载体pPIC9上,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中诱导表达,其表达活性达121.15 U/mL。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为4.5,在酸性条件下具有良好的活性和稳定性,可作为饲料用酶的备选。     

Bispora sp.MEY-1来源的新型嗜热多聚半乳糖醛酸酶的酶学性质研究及其应用评估

果胶酶作为添加剂广泛应用于食品行业的果汁澄清工艺中,发现和挖掘适用于工业应用的优质果胶酶,能够为工业应用提供更多的选择。从嗜酸的Bispora sp.MEY-1基因组中克隆得到一个多聚半乳糖醛酸酶基因Bspg28b,并在毕赤酵母GS115中实现高效异源表达。对重组蛋白纯化后进行酶学性质的测定,其最适pH 3.5,最适温度为65℃,在酸性至中性的环境中具有很好的pH稳定性,完全满足果汁澄清工艺的需求;BsPG28b在55℃下保持高度稳定,在65℃中保温10 min后仍能剩余50%的酶活,是真菌来源中少见的耐高温优质果胶酶。对BsPG28b的应用效果进行评估发现,可显著提高葡萄汁的澄清度,体现巨大的应用潜力。     

Bispora sp.MEY-1来源的嗜酸海藻糖酶TreA酶学性质研究

酸性海藻糖酶作为生物催化剂在生物工业中广泛应用,挖掘酶学性质优良的酸性海藻糖基因具有重要意义.从Bispora sp.MEY-1 中成功克隆出一个酸性海藻糖酶基因TreA,并在毕赤酵母GS115 中实现高效表达.对纯化后的酸性海藻糖酶TreA进行酶学性质鉴定,其最适pH 为4.0,在pH 2.2～5.0范围内,该酶能够...