Ghrelin在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对BCL-2、BAX的mRNA表达的影响

为了探讨Ghrelin在绵羊卵母细胞体外成熟过程中与BCL-2、BAX的相关性及Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中可能的作用机理,试验在绵羊卵母细胞成熟液中添加500 ng/mL Ghrelin,采用实时荧光定量PCR分别在0,8,16,24小时时检测卵母细胞BCL-2、BAX的表达量。结果表明:试验组添加Ghrelin后8,16小时时卵母细胞BCL-2 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),但成熟后16,24小时时较8小时时有下降趋势;下降到24小时时,其表达量与0小时时没有显著变化(P>0.05);8,16小时时试验组与对照组比较差异显著(P<0.05),0,24小时时差异不显著(P>0.05)。试验组添加Ghrelin后8,16,24小时卵母细胞BAX mRNA相对表达量较0小时时下降,且差异显著(P<0.05),但成熟后16,24小时时与8小时时比较有上升趋势;在8,16小时时试验组较对照组BAX mRNA相对表达量均有所下降,且差异有显著性(P<0.05),而在0,24小时时差异不显著(P>0.05)。说明Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中与BCL-2和BAX的表达存在相关性,推测Ghrelin在卵母细胞成熟过程中存在积极调控作用。     

干扰素通过上调BAX蛋白表达诱导肝癌细胞凋亡的研究

[目的]探讨干扰素(IFN)体外诱导肝癌细胞凋亡及其相关基因表达的作用。[方法]不同浓度的干扰素(IFN)处理肝癌细胞系CBRH-7919细胞不同时间后,光学显微镜下观察其形态学改变,用琼脂糖凝胶电泳检测作用不同时间干扰素对其细胞凋亡的影响,利用细胞免疫组化技术检测不同作用时间下BAX蛋白表达量的变化。[结果]干扰素作用肝癌细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡形态学变化:细胞体积缩小,变形,细胞膜完整;细胞核固缩,染色质凝集,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。琼脂糖凝胶电泳测得随着干扰素浓度的增高,出现典型的DNA LADDER。随着时间的增加BAX蛋白表达量出现增加,尤以48 h较明显。[结论]IFN可以诱导肝癌细胞凋亡,可能是由于IFN上调了BAX蛋白的表达,从而增强了自身对肝癌细胞的凋亡作用。     

复方苦芩对感染猪传染性胃肠炎病毒的PK-15细胞中Bcl-2/BAX mRNA转录的影响

【目的】探讨中药复方苦芩对感染猪传染性胃肠炎病毒 (transmissible gastroenteritis virus of swine, TGEV)的猪肾细胞（PK-15）中凋亡基因Bcl-2/BAX mRNA转录的影响。【方法】体外扩增TGEV,用TGEV感染PK-15细胞的模型进行体外试验研究,试验中设有复方苦芩组、空白组、模型组及黄芪多糖组,在测定了病毒半数感染细胞量（TCID50）,复方苦芩及黄芪多糖药液对PK-15细胞的最大无毒浓度后,制作细胞爬片采用瑞士染色法染色观察PK-15细胞的形态变化;按试剂盒操作提取各试验组RNA并及时反转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中Bcl-2和BAX mRNA转录情况。【结果】与空白组相比,模型组的PK-15细胞发生了明显的细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）,细胞变细长,细胞间成网状,细胞核着色较浅,出现核浓缩、固缩、碎裂等现象;与模型组比,复方苦芩组与黄芪多糖组细胞病变得到改善,而复方苦芩组效果更加明显,大部分细胞核结构清晰,染色质着色均一,少部分细胞核变大或碎裂;与空白组相比,模型组Bcl-2 mRNA转录量减少（P＜0.01）,复方苦芩组Bcl-2基因转录量增加,为模型组的1.403倍（P＜0.01）、黄芪多糖组的1.078倍（P＞0.05）;与空白组相比,模型组BAX mRNA转录量明显升高,而其他3组BAX基因转录差异不明显（P＞0.05）,模型组BAX基因转录量为空白组的1.440倍、复方苦芩组1.290倍、黄芪多糖组的1.490倍,差异极显著（P＜0.01）,复方苦芩组、黄芪多糖组BAX基因转录量分别为空白组的1.116倍、0.966倍,差异不显著（P＞0.05）;与空白组相比,模型组Bcl-2/BAX mRNA转录比值降低,差异极显著（P＜0.01）;与模型组相比,复方苦芩组、黄芪多糖组Bcl-2/BAX mRNA转录比值均增加,分别为模型组1.809倍和1.940倍,差异极显著（P＜0.01）,复方苦芩组Bcl-2/BAX mRNA转录比值分别为空白组的0.749倍（P＜0.01）、黄芪多糖组的0.933倍（P＞0.05）。【结论】复方苦芩可通过上调PK-15细胞Bcl-2 mRNA转录,下调BAX mRNA的转录,从而抑制TGEV引起的PK-15细胞凋亡。     

单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果讨论

为了提升实验室食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力,增强实验室竞争力,实验室参加了中国检验检疫科学研究院测试评价中心组织的单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证活动。利用BAX System Q7全自动病原微生物快速检测系统快速筛查了此次能力验证中的2个样品,根据单核细胞增生李斯特氏菌检验的国家检测标准中的鉴定方法对筛选出的疑似菌进行了鉴定。结果表明:编号样品18-C660检出单核细胞增生李斯特氏菌,顺利完成能力验证,结果为满意。