定量分析柑橘黄龙病菌在沙糖橘中的分布

柑橘黄龙病是由难培养的革兰氏阴性菌“Candidatus Liberibacter asiaticus”引起的严重为害柑橘的系统性病害。本研究通过实时荧光PCR 检测黄龙病菌在沙糖橘上的分布情况,结果表明不同部位黄龙病病菌浓度存在较大差异。其中果实中橘络部位病菌含量最高,且病原菌在果实中呈现富集的状态。本研究结果可为病原菌在植株体内的转运规律提供参考。     

土霉素对柑橘黄龙病的防治效果及对柑橘产量和品质的影响

为有效防控柑橘黄龙病,于2017年在佛罗里达大学柑橘研究与教育中心的奥本代尔市柑橘试验场进行田间试验筛选黄龙病的防治药剂及其浓度,测定注射土霉素后叶片中柑橘黄龙病菌亚洲种Cadidatus Liberibacter asiaticus、土霉素、淀粉含量、柑橘产量、出汁率、可溶性固形物含量和酸度,显微镜下观察注射土霉素后淀粉粒的分布。结果表明,浓度为1.6g/株土霉素处理180 d后柑橘叶片中黄龙病菌亚洲种含量减少幅度最大,为91.78%;注射浓度为1.6g/株土霉素后7d,叶片中土霉素含量达142.2 μg/kg,注射后11 d叶片中土霉素含量达到最大,为239.8 μg/kg,注射后45 d叶片中土霉素含量低至99.6 μg/kg以下;注射后7~90d,叶片中黄龙病菌亚洲种含量呈波浪形变化,注射90 d后叶片中黄龙病菌亚洲种含量一直处于增长趋势,叶片中黄龙病菌亚洲种含量总体随着土霉素含量的升高而降低;注射浓度为1.6g/株土霉素后,叶片中淀粉含量大幅度下降,60d时达到最低值,为3.3 μg/mm²,90d时达到峰值,为14.5 μg/mm²;单株产量为16.7 kg,与注射浓度为0.8 g/株土霉素处理差异不显著,但均显著高于其它2个处理;柑橘出汁率、可溶性固形物和酸度均与清水对照差异不显著。表明土霉素可有效抑制黄龙病菌亚洲种,减少柑橘叶片内淀粉含量,增加柑橘产量,但对果实品质未产生显著影响。     

庆元甜橘柚黄龙病菌的Real-time PCR检测与分析

为了解庆元县甜橘柚柑橘黄龙病的发生分布情况,为该病害的有效防控提供依据,通过Real-time PCR方法检测了庆元不同地区甜橘柚样品中黄龙病菌的存在情况。结果显示:在所检测的69个样品中,有13个样品表现为柑橘黄龙病阳性,阳性率达18.8%;其中松源街道和屏都街道样品的黄龙病菌检出率最高,可达33.3%。此检测结果表明,柑橘黄龙病已在庆元甜橘柚果园中普遍存在,应加强对该病害的防控。     

黄龙山林业局红脂大小蠹试验防治初报

红脂大小蠹(Dendroctonus Valens Leconte)大面积危害油松，造成油松的大量死亡。2002年5～10月，选用立木薰蒸，虫孔注药、环剥涂药、诱芯诱杀4种措施进行了防治试验，并进行了大面积防治推广，总结出立木薰蒸结合虫孔注药是防治的最佳方法，效果可达97％以上。     

柑橘木虱黄龙病菌携带量与其内生菌群相关性

【目的】分析柑橘木虱（Diaphorina citri）体内可能与黄龙病菌（Candidatus Liberibacter asiaticus）互作的内生细菌,为黄龙病菌的人工培养及其病害防控奠定基础。【方法】首先通过传统分离培养方法比较不同地理来源带黄龙病菌（带菌）和不带菌黄龙病菌（不带菌）的木虱中可培养内生细菌的差异。其次将带菌状况不同的木虱分别分为头、胸、腹3部分,经PCR扩增其16S rDNA的V6-V8区,用变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）方法,比较带菌状况不同的木虱内生细菌的差异和木虱不同部位内生细菌的差异。选择3种差异的内生细菌：Bacillus sp.、Salmonella sp.、Enterobacter sp.,在8份带菌状况不同的木虱样品中通过q-PCR分别对其进行实时荧光定量分析,再以总细菌量为校正计算包括黄龙病菌在内的4种细菌的相对含量,数据经LSD检验,以各种细菌相对含量的-lg值作图,先比较同一样品中3种细菌分别与黄龙病菌的相对含量关系,再比较同种细菌在不同样品中的特性,分析3种内生细菌和黄龙病菌的互作关系。【结果】不带菌木虱中可培养内生菌菌落丰富度和菌落形成单位均大于带菌木虱中。在不带菌木虱中共获得14株形态不同的菌株,分属于芽孢杆菌属（Bacillus,3株）、欧文氏菌属（Erwinia,1株）、克雷伯氏杆菌属（Klebsiella,1株）、葡萄球菌属（Staphylococcus,2株）、节杆菌属（Arthrobacter,1株）、泛菌属（Pantoea,2株）、果胶杆菌属（Pectobacterium,1株）、沙门氏菌属等（Salmonella,1株）、链霉菌属（Streptomyces,1株）、Massilia brevitalea（1株）等10个细菌属。在带菌木虱中分得的4株细菌在不带菌木虱中均分离到,分属于克雷伯氏菌属、芽孢杆菌属、果胶杆菌属。其中Dc-11（嗜气芽孢杆菌属）在带菌木虱和不带菌木虱中分离频率均达到100%,表明其为木虱体内常驻细菌;对木虱不同部位（头、胸、腹）内生细菌16S rDNA的PCR-DGGE图谱显示,带菌与不带菌木虱中细菌种群差别明显,带菌状况相同的木虱不同部位之间差别不明显。其中优势条带10 （Wolbachia sp.）、12（Wolbachia pipientis）、13（Syncytium endosymbiont of Diaphorina citri）、14（Uncultured bacterium）、19（Serratia marcescens）、21和22（均为嗜麦芽寡养单胞菌Stenotrophomonas maltophilia）在木虱体内稳定存在,带菌木虱腹部特有优势内生细菌为Enterobacter sp.,木虱中同样也存在次级内生菌Wolbachia。q-PCR的结果验证了所选的3种细菌在前期传统分离培养和16S rDNA-PCR-DGGE中结果的可靠性,同时表明肠杆菌属在8份样品中与黄龙病菌呈正相关关系。【结论】黄龙病菌进入木虱体内会改变木虱内生细菌菌群种类和结构;嗜气芽孢杆菌（B. aerophilus）在柑橘木虱体内稳定存在,为木虱体内常驻菌群;Enterobacter sp.与黄龙病菌带菌量呈正相关,推测其可能与黄龙病菌互作。     

长春花感染黄龙病菌多酚氧化酶基因的表达及活性分析

【目的】分析长春花Catharanthus roseus受黄龙病菌Candidatus Liberibacter asiaticus侵染后多酚氧化酶(PPO)基因的表达及活性变化。【方法】根据不同作物多酚氧化酶基因PPO序列的相似性,筛选出长春花多酚氧化酶基因Pw PPO引物,PCR扩增得Pw PPO基因片段,运用qRT-PCR和生理生化方法分析长春花嫁接黄龙病芽后,不同时间长春花叶、主茎和根中Pw PPO基因的表达量和酶活性变化。【结果】长春花受黄龙病菌侵染后,叶、主茎和根中Pw PPO基因的表达分别在嫁接后30、35和40 d上调表达4.23、12.64和33.80倍,不同组织中Pw PPO基因上调表达的时间和幅度不同。染病长春花的叶、主茎和根中PPO活性分别在嫁接后30、35和45 d为对照的2.87、2.10和1.89倍。【结论】Pw PPO基因表达量与PPO活性成正比,与长春花抵抗黄龙病菌侵染的能力密切相关。     

斑驳型黄龙病对沙糖桔产量和品质的影响

制订系统、明确的沙糖桔植株斑驳型黄龙病严重度5等级分级标准,按分级标准选取不同严重度斑驳型黄龙病的6年生沙糖桔植株,取叶样进行病原菌“Candidatus Liberibacter asiaticus”的Nested-PCR检测和单株产量测定.结果表明,0级(健康)植株的叶样均扩增不到特征条带,未感染黄龙病；1～4级植株的叶样均能扩增到条带,均感染黄龙病.0～4级严重度沙糖桔的平均株产量分别为61.90、29.75、19.43、14.08和9.70 kg,各级之间的单株产量呈显著性差异(P＜0.05),严重度越高,单株产量越低.比较沙糖桔显症果实(红鼻子果)和健康果的单果重、可溶性固形物和维生素C含量,发现红鼻子果的各项指标极显著(P＜0.01)低于健康果.     

庐山柳杉

今年9月，笔者在庐山与会期间，徒步登庐，从乌龙潭走向上游的黄龙潭，再往上走，见到了黄龙寺。寺前有两棵柳杉，树姿十分雄伟，具苍翠浓密的塔形树冠。相传，这两棵柳杉是明朝万历年间，由黄龙寺的长老彻空补种的。时至今日，两棵柳杉树高41米，胸径分别为1．9米和2．2米，树龄达600年。     

“母子柏”佑护黄龙寺村

河北省保定市满城县黄龙寺村．有两株“母子柏”被人们尊为“神柏”。与其它大树根部生小树的“母子柏”不同．此“母子”相距300米．母树生于靠近村子的山顶上．基围4．85米．胸围2．48米．树高11．8米．形似一把绿色的伞。子柏生在母树对面的峭壁上．树高5．8米，胸围1．57米。根据当地的立地条件分析．母柏树龄在千年以上．子柏在五百年以上。相传母柏为当年黄龙巡游至此．为保此地代代平安所植。数百年后．丹凤飞游至此．见山顶一柏非同寻常．便收翅山顶。看着看着．灵机一动取下一粒种子．选择在隔河的悬崖绝壁上种下了一棵纪念树．形成了遥遥相望的母子二柏。当地百姓把它们看作命根子．自觉地加以保护。     

封山育林对黄龙山林区森林资源的形成与影响

黄龙山林区位于陕北黄土高原东南部 ,是陕西省五大林区之一 ,享有黄土高原“绿色明珠”的美誉 ,其中“封山育林”对黄龙林区森林资源的形成、发展、提高有着极其密切的关系。当前 ,在实施天然林保护工程 ,再造秀美山川工作如火如荼的形势下 ,探讨、研究“封山育林”对黄龙林区森林资源的影响 ,具有十分重要的现实意义和深远的历史意义。1　封山育林的主要措施早在 1 95 1年 ,原黄龙林区管理处 ,就在黄龙林区的崾先等地封山育林 5 375 hm2 ,是陕西开展封山育林最早的地方之一。到 1 998年累计封山育林 7.92万 hm2 ,通过封山育林恢复森林面积 …