植物胰岛素提取技术与产品制备方法

胰岛素是哺乳动物胰岛β细胞分泌的蛋白性激素，分子中含有以二硫键相连接的两条多肽链。晶形的胰岛素还含有少量的金属元素，如锌、镍、钴等，其熔点为232℃～235℃。胰岛素可溶于80％以下的稀醇、稀丙醇及酸、碱中，不溶于90％以上的乙醇及其他有机溶剂，在PH值为2～4时较稳定，遇蛋白酶、强酸、强碱易被破坏，加热易变性。     

光照对“星布罗”肉用仔鸡的生长发育及胰腺内分泌细胞结构和功能的影响

将72只日龄为14d的“星布罗”肉用仔鸡随机分为实验和对照两组,每组36只。实验组接受强度为151x的1L:3D间歇性白炽灯光照,对照组为自然光照。两组的饲喂条件相同。结果:与对照组相比,实验组体重略高而料肉比略低,实验组鸡胰腺A、B细胞的内分泌颗粒减少,A颗粒粒芯周围出现大致均匀的晕轮,B颗粒粒芯呈现不典型的针状、棒状或环状,PP细胞的内分泌颗粒明显增大、增多,胞浆中的粗面内质网、高尔基复合体和线粒体等数量增多。两组鸡的D细胞无明显差异。34日龄的实验组鸡血浆胰岛素含量明显高于对照组,且与体重呈正相关。     

赖氨酸采食量对早期断奶仔猪生长发育及胰腺内分泌机能的影响

将55头21日龄断奶的雄性仔猪随机分为5组，各组仔猪饲喂赖氨酸含量为0．60％、0．80％、1．00％、1．20％和1．40％的试验日粮21d。42日龄结束饲养试验时进行葡萄糖灌注试验，观察赖氨酸采食量对早期断奶仔猪生长发育和胰腺内分泌的影响。结果表明：早期断奶仔猪体增重与赖氨酸采食量为强正相关，根椐体增重指标，21～42日龄阶段，仔猪的赖氨酸采食量不应低于3．16g／d，日粮赖氨酸含量不应低于1.40％。赖氨酸严重缺乏(采食量小于1．45g／d)时，胰岛素的分泌量下降，对高血糖应激的反应能力降低。     

65例代谢综合征动脉弹性检测及胰岛素敏感指数结果分析

目的检测代谢综合征动脉指数和胰岛素敏感指数的检测及结果分析。方法采用CVProfilor DO2020动脉脉搏分析仪测量代谢综合征组(65例)及对照组(54例)大动脉弹性指数(C1)、小动脉弹性指数(C2)和胰岛素敏感指数(ISI)并比较。结果代谢综合征组C1、C2分别为(13.66±3.42)、(4.61±1.23),低于对照组的(15.32±3.44)、(5.55±1.76),(均P<0.01);代谢综合征组C1和C2与ISI呈正相关(r=0.38、0.47,P<0.01)。结论代谢综合征C1、C2与ISI存在相关关系。     

茶色素对胰岛素抵抗大鼠胰岛素受体的影响

探讨茶色素对胰岛素抵抗大鼠红细胞胰岛素受体的影响。将50只清洁级SD大鼠随机分成对照组、高脂组和低中高剂量茶色素干预组。高脂组和茶色素干预组以高脂饲料饲喂8周诱发肥胖致胰岛素抵抗模型,茶色素干预组再给予0.1、0.2g/(kgbw·d)和0.4g/(kgbw·d)剂量茶色素灌胃8周,实验结束后采血测定红细胞胰岛素受体水平,同时测定血糖、血胰岛素、血FFA及血痩素。与对照组相比,高脂组空腹胰岛素、痩素和FFA明显升高(P<0.05),而红细胞高亲和力受体数目明显降低(P<0.05),与高脂组相比,中高剂量茶色素干预组空腹胰岛素、痩素和FFA明显降低(P<0.05),而红细胞高亲和力胰岛素受体数目明显升高(P<0.05)。说明茶色素干预可提高胰岛素抵抗大鼠胰岛素高亲和力受体数目,其机制可能与降低痩素和FFA水平间接提高受体数目或直接作用于受体基因调节元件有关     

口服和静脉注射重组hGLP-1类似物对糖尿病大鼠的影响

目的观察口服和静脉注射重组hGLP-1类似物对糖尿病大鼠血糖、胰岛素及胰岛组织病变的影响。方法用链脲佐菌素（STZ）建立SD大鼠糖尿病模型,随机分为模型组、灌胃组和注射组,每组10只,分别给予生理盐水灌胃、重组hGLP-1类似物多肽灌胃、hGLP-1类似物基因重组载体尾静脉注射,观察4周内各组大鼠血糖、胰岛素、胰岛组织病理变化。结果与模型组比较,灌胃组和注射组的血糖水平在给药后1～4周明显下降,而血清胰岛素水平显著升高（P〈0.01）。灌胃组在各时间点的血糖、胰岛素水平与注射组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。HE染色发现,灌胃组和注射组大鼠的胰岛组织病变有所改善。结论重组hGLP-1类似物可降低糖尿病大鼠的血糖、提高血清胰岛素水平。     

猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2基因扩增及在前脂肪细胞3T3-L1中的表达

KLFs(Kruppel-like factors)家族和Egr2(Early growth response factor 2)是真核生物中广泛存在的锌指类基础调控因子,在各类细胞的增殖分化和组织发育中起关键作用,在此研究它们在3T3-L1前脂肪细胞中的表达差异。以肝脏cDNA为模板,扩增猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2部分编码序列,通过半定量RT-PCR进一步检测它们在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激下的前脂肪细胞3T3-L1细胞中的表达差异。结果表明,试验扩增到了长度分别为1 387bp、767 bp、518 bp和959 bp的猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2的部分编码序列,并通过与GenBank序列比对加以确认,在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激的3T3-L1前脂肪细胞中检测到了它们部分表达,胰岛素刺激Klf4的表达,而抑制Klf5和Egr2的表达;盐酸克伦特罗刺激Klf5的表达,抑制Egr2的表达,对Klf4表达影响则随着浓度的升高由刺激变为抑制;而Klf7在3T3-L1前脂肪细胞中则检测不到有效表达。     

利用烟草表达重组人胰岛素原的初步研究

按植物偏爱密码子设计合成了228 bp带his-tag(6×his)人胰岛素原基因(hmins),随后构建了植物双元表达载体p35S::hmins(骨架质粒是pCAMBIA2300),通过冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105制备工程菌,用农杆菌介导法转化烟草叶盘.经卡那霉素(50 mg·L-1)筛选获得98株抗性植株,PCR和southern blotting分析确认获得了6株独立转基因烟草,hmins在转基因烟草基因组中的拷贝数介于2-4;RT-PCR和western blotting分析结果表明,hmins在转基因烟草中成功表达(转录和翻译水平);ELISA结果显示,hmins在转基因烟草叶片中表达量为0.5～1.1μg·g-1·FW.该研究为植物源胰岛素研制做了必要的前期准备.     

添加胰岛素对胎儿宫内发育迟缓新生仔猪胃生长发育的影响

为研究添加胰岛素对IUGR新生仔猪胃生长发育的影响,试验选择初生IUGR仔猪共15头,分为新生对照组(N)、牛乳组(M)和试验组即牛乳添加胰岛素(60IU/L)组(I),人工饲喂3天后宰杀取样。结果显示,与N组相比,饲喂3天后,M组和I组仔猪胃重量、胃重/体重、胃壁总厚度及各层厚度、蛋白质含量、DNA含量、RNA含量、胃蛋白酶总蛋白水解活性均不同程度提高,而胃酶总凝乳活性极显著降低;与M组相比,I组胃重/体重、胃壁总厚度及各层厚度均略高于M组(P0.05),胃黏膜损伤较轻,胃蛋白质含量提高了11.52%(P0.01),胃DNA、RNA含量以及蛋白质/DNA比值、胃酶总蛋白水解活性分别提高4.11%、7.73%、7.53%、7.24%(P0.05),胃酶总凝乳活性略低(P0.05)。表明IUGR仔猪生后胃生长发育较迅速,添加胰岛素能在一定程度上刺激IUGR仔猪胃细胞增殖和增大,能显著促进IUGR仔猪胃蛋白质合成,有提高胃酶总蛋白水解活性的趋势,对IUGR仔猪出生后胃的生长具有一定的补偿作用。