犬胚胎移植技术的研究进展

随着生物技术和生命科学的飞速发展，克隆牛、克隆羊的相继问世，动物繁殖生产的第二次技术革命时代已经到来。从繁殖育种学的角度讲，人工受精技术的应用，大大开发了优良种公犬的繁育性能，是提高公犬种用价值和配种效率的有效方法。胚胎移植是采用“超排”技术从母犬体内获得大量卵子，在体内或体外受精而得到大量胚胎，这样不仅     

牛冷冻精液的保存及使用应注意的问题

精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。通常采用生物液氮极低温保存。其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。可充分提高公牛的利用率。现将冷冻精液保存和解冻及使用应注意的问题介绍如下：     

波尔山羊冷冻精液的研制

试验选用两种衡释保护剂配方，通过6批次460支冷冻精液的制作，获得了较为理想的乙二醇稀释保护剂。经解冻试验，角发冻后乙二醇稀释剂的精子复活力为0.39-0.40（对照组为0.29-0.30），精子存活率为49.38%-52.56%（对照组为36.25%-38.0%）。     

牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存

利用牛皮肤组织块直接培养法，得到牛皮肤细胞的原代培养物，再用酶消化法和反复贴壁法处理，能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用6种分别含有二甲基亚砜（DMSO）、甘油（GL）及乙二醇（EG）的保护液，以相同的冻前处理方法，对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻，冰箱预冷平衡1－2h，逐步投入液氮（－196℃）中保存，再经37℃水浴解冻，Hanks液脱保护剂，以贴壁率评价冻存效果。结果表明，20％DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果，其平均贴壁率达87．9％。     

绵羊卵母细胞的玻璃化冷冻保存

玻璃化法是近几年才建立起来的一种细胞、胚胎及卵母细胞的冷冻保存技术。Nekagata和Shaw分别于1989年和1991年用此化法冷冻保存小鼠成熟卵母细胞,取得理想结果。本实验对玻璃化法冷冻保存绵羊卵巢内卵母细胞作了尝试。1 材料与方法从屠宰后东北细毛羊取出卵巢,用注射器从直径2～6mm的卵泡中抽取卵丘—卵母细胞复合体,选择正常的用成熟培养液(M199+10%FCS)洗2次后,转入VS_1(20.5%(w/v)二甲基亚砜,     

影响精液冷冻和人工授精效果的因素

通过对精液冷冻保存的细胞反应原理的阐述 ,指出冷冻保护剂甘油对精液保存具有利弊效应 ,提出精子膜脂组成的差异使得不同品种的精子对冷冻损伤的易感性不同。雌性生殖道解剖结构的品种差异 ,精子形态 ,精子运行机制的细微差异 ,人工授精时间及精子的运行能力 ,采精方式等因素对精液冷冻保存和人工授精的成功有决定性作用。研究精子质膜的生物学特性可解决低活力精子的问题 ,然而这并不能解决冷冻后精子质量的个体差异。对精细胞基因组的研究可以找出这些个体的遗传差异。因此 ,冷冻精子和精原细胞 (用于细胞外注射 )的差异已经成为完整基因组问题。     

热滞蛋白在低温冷冻保存卵母细胞和胚胎中的作用

近来一些短期或长期保存卵母细胞和胚胎的研究结果表明，热滞蛋白或称抗冻蛋白，在低温和超低温下，能与细胞膜相互作用，保护卵母细胞和胚胎，热滞蛋白的这种保护作用与其浓度和种类有关，在玻璃化快速冷冻中，所需ＴＨＰｓ的最低浓度为４０ｍｇ／ｍｌ，而在慢速冷冻或低温短期保存（１－４天）胚胎中，其适宜浓度范围为０．１－１ｍｇ／ｍｌ，所需浓度取决于ＴＨＰｓ的咎类。ＴＨＰｓ与玻璃化液相互作用，稳定玻璃化液；同时也与细