无花果蛋白酶的制备

无花果蛋白酶属于蛋白水解酶，主要存在于无花果树树胶、无花果青果和叶中。无花果蛋白酶是含多种组分的复合酶。无花果蛋白酶与木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶类似，属于巯基蛋白酶，其活性中心部位含有必需的巯基，能为半胱氨酸等多种还原剂激活。     

真菌漆酶的研究进展及其应用前景

漆酶生产菌株多为白腐真菌,常用的漆酶活性测定方法有分光光度法、ABTS法、微量热法等,其降解工业"三废"中的有毒有害物质被认为是一种效率较高,成本较低的且最有前途的方法,其对环境保护的研究以逐渐成为国内外研究的热点,本文阐述漆酶的性质、活性中心、结构特点以及其在环境治理方面的应用。     

番麻蛋白酶活性中心基团的初步研究

在不引起酶变性的条件下,用半胱氨酸(Cys)专一性化学修饰试剂碘乙酸、对氯汞苯甲酸(?)(CMB),5,5′-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)对酶分子进行化学修饰后,酶活性显著下降。发现酶的失活程度与修饰剂浓度间存在着化学计量关系,同时底物(酪蛋白)对酶活性有明显的保护作用。说明被修饰的部位(Cya残基)是酶的活性中心基团。Cys对酶有明显的激活作用;同时,(?)CMB、DTNB、碘乙酸对酶活性有明显的抑制作用(?)CMB抑制或O_2氧化而失活的酶溶液,又可被Cys重新激活,而恢复其活力,进一步证明其活性中心存在着Cys残基。以上事实均与典型的植物巯基蛋白酶——木瓜蛋白酶一致,说明番麻蛋白酶是一种巯基蛋白醇,其活性中心存在着Cys。     

鸡端粒酶催化亚基活性中心结构的预测与定位

研究利用已知脊椎动物端粒酶催化亚基及其活性中心的结构,依据比较基因组学理论,通过序列比对和同源性分析,对鸡端粒酶催化亚基(chTERT)活性中心序列进行预测与定位。结果表明,chTERT活性中心序列为长1813bp,位于鸡chTERT全序列的2013～3825bp位置。chTERT活性中心的确定为今后以鸡端粒酶催化亚基为靶标的抗肿瘤研究奠定基础。     

β2肾上腺素能受体的研究进展及其在兴奋剂残留检测中的应用

β肾上腺素能受体属于G蛋白偶联受体的1种,能够与一系列内源或外源性肾上腺素能物质相互作用,激活受体并引起信号转导从而引发机体的生理化学反应。目前已经研究了β2肾上腺素能受体的结构活性、蛋白表达和检测应用,但是仍然因为7次跨膜结构的蛋白表达量低等特点,造成该受体的发展进程缓慢。本文重点叙述了β2肾上腺素能受体的结构以及活性氨基酸残基,分析目前该受体蛋白在真核和原核细胞表达的现状以及在β兴奋剂药物的残留检测中的应用,总结在β2肾上腺素能受体研究方面存在的问题和发展趋势。     

嗜热真菌耐热木聚糖酶的活性中心

应用NBS ,WRK ,DTNB ,PMSF ,Phenylgloxalhydrate,DEPC等化学修饰剂对嗜热真菌所产的耐热木聚糖酶进行了化学修饰。分别作用于色氨酸残基和谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基的NBS和WRK可使耐热木聚糖酶活性显著降低 ,而其他几种修饰剂无明显作用。木聚糖对NBS的修饰有抑制作用 ,3 0mg·mL-1的桦木木聚糖底物可完全阻止NBS对耐热木聚糖酶的修饰作用 ,但木聚糖底物不能阻止WRK对耐热木聚糖酶的失活作用。实验结果表明 ,色氨酸残基和谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基位于酶的活性中心 ,且色氨酸残基位于酶的底物结合中心 ,而谷氨酸(或天冬氨酸 )残基可能位于酶的催化中心。     

端粒酶催化亚基活性中心hTERT的克隆及其真核表达

本实验采用RT—PCR技术,应用高保真DNA聚合酶从人喉癌细胞中扩增端粒酶催化亚基活性中心基因片段,将克隆载体上hTERTcDNA用EcoR I和HindⅢ双酶切,连入真核表达载体pCR3．1,利用pCR3．1载体上带有强的CMV启动子,高效表达活性中心蛋白,采用RT—PCR检测hTERT mRNA的表达情况,结果表明,在细胞内检测到了mRNA,证明该cDNA在细胞内确实得到了表达,并采用TRAF-ELISA方法检测端粒酶活性。     

植物漆酶的研究进展

叙述了植物漆酶的来源、结构，并讨论了植物漆酶的酶促反应机理和生物学功能，包括其在木质素的形成、抗病、抗逆以及种皮颜色中的作用。     

人端粒酶催化亚基hTERT活性中心基因的克隆及其真核表达载体的构建

人端粒酶催化亚基是端粒酶活性所必须的组分，通过提取端粒酶活性癌组织的mRNA，反转录获得端粒酶活性中心基因的cDNA片段，PCR扩增获得端粒酶催化亚基活性中心基因，并将扩增产物连入真核表达载体pCR3.1，利用pCR3.1载体的自身特点即具有T7启动子，可在真核细胞内启动基因的转录与表达，为将来获得端粒酶酶活性中心蛋白，研究其结构与功能奠定了基础，从而为解决肿瘤问题提供新的思路。