甲醇与SDS对日本鳗鲡肠道蛋白酶催化活性的影响机理

【目的】探讨甲醇和十二烷基磺酸钠(SDS)对日本鳗鲡(Anguilla japonica)肠道蛋白酶催化活力的影响,揭示甲醇和SDS对蛋白酶催化活性的影响机理.【方法】利用酶促反应动力学方法,研究甲醇和SDS对蛋白酶催化活性的影响机理;通过对蛋白酶荧光发射光谱的测定,研究蛋白酶经甲醇和SDS溶剂微扰后的分子构象变化.【结果】甲醇和SDS对日本鳗鲡肠道蛋白酶均表现为失活作用,且失活作用都是可逆的;甲醇对蛋白酶的失活作用是属于非竞争性类型,而SDS的失活效应则表现为竞争性类型.蛋白酶经甲醇作用后荧光发射强度呈现减小现象,而经SDS作用后蛋白酶荧光发射强度呈增大现象,但荧光发射光谱的波长均没有发生变化.【结论】甲醇和SDS对日本鳗鲡肠道蛋白酶均具有失活作用,都是通过影响酶蛋白的空间构象而使酶失去催化活性的.     

Application of Atomic Force Microscopy in the Study of Polysaccharide

This paper gives a brief introduction to basic principle and working mode of atomic force microscope （AFM）. Sample preparation methods and factors that affect the AFM imaging of polysaccharide are described in detail. Advance in using AFM for morphological observation and quantitative study on polysaccharide molecules are reviewed. Research on single molecule force spectroscopy of polysaccharide and determination and adjustment of conformational change of sugar residue are introduced. Perspective on further application of AFM in polysaccharide investigation is presented.     

牛血清白蛋白与Indo-1相互作用时构象变化的荧光光谱法分析

系用荧光光谱及吸收光谱法证明了牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)与荧光探针Indo-1共存时二者能够发生相互作用,并用同步扫描荧光光谱法研究了BSA与Indo-1相互作用时构象变化的情况,考察了溶液的酸度对二者相互作用的影响.结果表明,荧光探针Indo-1在与BSA相互作用时未引起该蛋白质构象的变化,认为Indo-1可作为荧光探针用于诸如BSA这样的蛋白质与其它配体相互作用的荧光光谱法研究.     

二甲亚砜对中国鲎NAGase的抑制作用

节肢动物的周期性蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。从中国鲎内脏分离提取N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶，利用酶抑制作用动力学方法研究二甲亚砜对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响。试验结果显示：二甲亚砜对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶有较强的抑制作用，0.1 mol/L二甲亚砜可使酶活性下降38.0%,该抑制作用为可逆过程；动力学研究显示，二甲亚砜对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的抑制作用是属于竞争性-非竞争性混合型抑制，二甲亚砜对游离酶(E)的抑制常数(K_I)和对酶-底物络合物(ES)的抑制常数(K_IS)分别为0.200 mol/L和1.063 mol/L,K_IIS,表明底物对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在二甲亚砜溶剂中的失活具有保护作用，随着底物浓度增大，二甲亚砜对酶的失活作用降低；酶蛋白的紫外吸收光谱和内源荧光发射光谱显示，随着二甲亚砜溶剂浓度升高，N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶蛋白紫外吸收值亦在升高，但其...