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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
4.
鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。 相似文献
5.
6.
7.
王岩宇 《林业机械与木工设备》2004,32(12):59-60
我国加入WTO以后,国外大批有竞争实力的企业涌入我国,行业竞争日趋激烈。作为行业核心竞争因素的时间、质量、成本目标的受重视程度得到了前所未有的加强。在确保质量的前提下,用最短的时间,花费最少的成本完成开发项目,成为企业提升竞争实力的关键。PMBOKAGuidetotheProjectManagementBodyofKnoledge所提出项目管理九大知识领域作为大量项目实践和现代管理理论科学融合的产物,为实施科学的项目管理奠定了坚实的基础,在项目开发中得到了广泛的应用,发挥了非常积极的作用。但在企业项目管理知识体系的应用过程中存在一个非常普遍的问题… 相似文献
8.
河蟹是我国淡水水产品中特有的优质产品,养蟹已成为各地农业开发的重头戏。我省是河蟹生产的大省,近几年,虽然养蟹面积和产量有突飞猛进的发展,但蟹质量却在持续下降。90年代初期,3两和3两以上的蟹可占到总产量的60-70%。近几年3两和3两以上的只占到30-40%,极大部分河蟹在1.5—2两之间,外壳变厚,味道差,成熟早,这严重制约了河蟹业的发展。 相似文献
9.
胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)于1978年被正式命名,并且明确了它由IGF-1和IGF-2两部分组成。IGF-1是一种受生长激素调节的单链多肽,由70个氨基酸组成,分子量为7649,其结构有45%与胰岛素相似。IGF-1有种系稳定性,所有哺乳类动物的IGF-1结构与组成基本相同。人类IGF-1的基因位于第12号染色体上,由6个外显子和多个内含子构成,可在全身各处表 相似文献
10.