人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。     

家畜血液资源的开发利用

家畜血液占畜体活重的4%～9.8%。牛体内血液含量占体重的8%,羊占4.5%,猪占4.6%。目前,绝大多数肉类屠宰加工中,家畜血液资源利用甚少,尤其是牛(牦牛)、羊、兔的血液,除极少量用于制作血豆腐外,大部分作为肥料。近年来,随着加工技术的进步,血液制品以其独特的保健作用越来     

猪凝血酶的分离纯化及部分性质研究

经等电点沉淀,ＤＥＡＥ离子交换纤维素柱层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析从猪血浆中纯化得到到猪凝血酶,酶比活力为２０００Ｕ／ｍｇ,纯化倍数为１００,酶活力回收为５６％,酶反应的最适ＰＨ和温度分别为７．０和３７℃,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００层析测得酶分子量为３６０００。猪凝血酶的稳定性较差,４０℃保温２７ｈ,酶活力下降８４％。高浓度的盐对酶稳定性有较大的影响,在２ｍｏｌ＝／ＬＮａＣｌ下放置３     

猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂，ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ为载体。采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

凝血酶治疗新生儿上消化道出血疗效观察

目的：观察凝血酶治疗新生儿上消化道出血的疗效。方法：对住院的48例上消化道出血新生儿随机分为治疗组和对照组，治疗组在对照组常规治疗基础上给予凝血酶治疗。结果：治疗组的止血有效率高于对照组(P＜0.01)，平均止血有效时间也短于对照组(P＜0.01)。结论：凝血酶治疗新生儿上消化道出血疗效显著，使用安全、方便，未见明显毒副作用。     

关于欧洲议会两项议案的启示

欧洲议会反对批准使用肉凝血酶添加剂的启示 2010年6月7日，欧洲议会表决阻止对猪和牛凝血酶作为肉凝胶添加剂的授权。根据欧委会的提议，使用凝血酶制成的再生肉制品应使用标签标识，且不得在餐厅使用。但欧洲议会环境委员会提交了一项议案阻止批准使用该添加剂，且该议案已被表决通过。     

猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂、ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为载体，采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

槲皮素单硫酸酯和5’-氯-5’-脱氧腺苷单用与合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的：研究槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：用比浊法检测血小板聚集。结果：槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷对凝血酶诱导的兔血小板聚集都有抑制作用，两者合用作用增加。结论：槲皮素单硫酸酯与5’-氨-5’-脱氧腺苷具有协同抗血小板聚集的作用。     

获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症31例临床分析

[目的]分析青海地区获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症(VKCFD)的临床特点及其治疗转归.[方法]回顾性分析31例获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症患者发病原因、临床特点及治疗转归,监测维生素K1及新鲜冰冻血浆治疗前后凝血酶原时间(PT)及纠正实验、活化部分凝血酶时间(A]PTT)及纠正实验、凝血因子Ⅷ和Ⅸ的活性、凝血酶时间（TT）及纤维蛋白原(Fg)变化情况.[结果]31例患者PT、APIT明显延长,凝血因子Ⅸ活性显著降低,IT、Fg及Ⅷ因子活性正常.补充维生素K1 20～40 mg/d、新鲜冰冻血浆等治疗后PT、APTT较入院时明显降低(P＜0.01),凝血因子Ⅸ活性较入院时增加(P＜0.01).[结论]监测PT、APIT及凝血因子Ⅸ活性对获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症的诊断及疗效评估具有重要价值.静点维生素K; 20～40 mg/d、间断输注新鲜冰冻血浆对该病治疗疗效确切.     

四种槲皮素水溶性衍生物对凝血酶诱导兔上板聚集的影响

目的：研究四种人工半合成槲皮素水溶性衍生物,即乙氧基槲皮素、槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：用比浊法检测血小板聚集。结果：乙氧基槲皮素对血小板聚集无影响;槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对血小板聚集有抑制作用,ＩＣ５０分别为８０μｍｏｌ／Ｌ、９５μｍｏｌ／Ｌ和１８５μｍｏｌ／Ｌ。结论：槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯具有抗血小板活性。