猪MAVS基因原核表达载体的构建及其多克隆抗体的制备

通过RT-PCR从PK-15细胞系中扩增克隆MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,构建原核表达载体p ET-MAVS220,转化感受态细胞Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达,重组MAVS经纯化后免疫4周龄昆明系小鼠制备抗线粒体抗病病毒信号蛋白(MAVS)多克隆抗体。诱导表达的最佳条件为IPTG 0.05 mmol/L,37℃诱导6 h,重组MAVS以可溶性蛋白和包涵体两种形式表达。应用该重组蛋白免疫小鼠获得的抗MAVS多克隆抗体与纯化的重组MAVS蛋白反应效价可达1∶16 000;该抗体与Poly(I∶C)刺激PK-15细胞产生的MAVS及与转染了重组MAVS基因真核表达载体pcDNA3.0-MAVS的BHK-21细胞表达的MAVS蛋白发生特异性反应,效价可达1∶1 000,特异性良好。     

姜曲海猪ATP2B1基因克隆、生物信息学及组织表达分析

克隆姜曲海猪质膜钙转运ATP酶1(ATPase Plasma Membrane Ca²⁺Transporting 1,ATP2B1)基因CDS区序列，对其进行生物信息学分析，并探究ATP2B1基因在不同日龄姜曲海猪子宫组织的表达水平，以期为研究ATP2B1基因在姜曲海猪繁殖性能方面的作用提供参考依据，采用RT-PCR技术扩增姜曲海猪子宫ATP2B1基因CDS区序列，利用生物信息学软件对其进行分析，利用实时荧光定量PCR检测ATP2B1基因在1月龄和8月龄姜曲海猪子宫组织中的表达量。结果显示，姜曲海猪ATP2B1基因CDS区全长3 663 bp,编码1 220个氨基酸，与野猪同源性最高、亲缘关系最近。姜曲海猪ATP2B1蛋白分子质量约为134 737.94 u,原子总数为19 102个，理论等电点(pI)为5.63,带正电荷、负电荷的氨基酸数分别为141、161个。该蛋白最可能位于细胞膜上，为跨膜、非分泌型疏水蛋白质，有159个磷酸化位点和5个N-糖基化位点，无规则卷曲在预测的二级结构中占比最大。实时荧光定量PCR结果显示，ATP2B1基因在8月龄姜曲海猪子宫组织中...     

禽安卡拉病毒Hexon蛋白多克隆抗体的制备

为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FADV-4)的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白(Hexon)基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。     

抗脂肪细胞膜蛋白抗体及其对动物生长的调控

介绍了脂肪细胞膜蛋白及其抗体的研究进展,以及用脂肪细胞膜蛋白抗体免疫动物的作用机制和效果,并阐述了它在动物生产及人的肥胖症等方面的应用前景。     

无角道赛特羊与藏系羊杂交后代生长发育观察研究

为增加牧区养羊经济效益，充分利用全省草地资源，促进养羊业的发展，必须合理组织杂交生产。2001年青海省畜牧兽医总站从全国畜牧兽医总站引进无角道赛特羊，在刚察县项目区进行适应性观察，并开展与藏羊杂交组合同藏羊的对比试验，生产道藏F1 3600只，均表现明显的杂交优势，各阶段年龄体尺及体重比藏羊有不同程度的提高。此次试验着重对无角     

雪岭云杉扦插成活影响因素分析

林木繁殖，通常采用播种、嫁接、扦插等技术方法。播种繁殖因其遗传基因杂合程度高，实生后代性状分离严重，不易保持原有的优良特性；嫁接繁殖比较麻烦、费工费时、季节性强、繁殖系数较低；而扦插繁殖则既可以保持原有优良遗传性状的稳定，后代个体表现均一，又可以在较短的时间内繁殖出较大数量的苗木，操作简便，宜繁期长，是其他繁殖方法不可替代的好方法之一，在生产上广泛应用。     

着手办实事 造福后代人——记林州市合涧镇万羊坡村党支部书记王林吉

2009年1月6日，记者一行深入林州市合涧镇万羊坡村，对新一届村党支部书记王林吉进行了实地采访。面对记者的提问，王林吉书记侃侃而谈。当谈到2008年村两委所做出的成绩时，其眉宇间流露出自豪，当他详细讲述2009年的具体任务以及所要达到的目标时语气中充满了自信。谈及新农村建设的发展规划时，     

乙型脑炎病毒SA14-14-2株prM基因的克隆与测序

以我国乙型脑炎病毒疫苗株SA14-14-2的基因组RNA为模板,设计1对包含prM基因完整编码区的引物,采用一步法RT-PCR技术扩增其prM基因,扩增出大小约558 bp特异性带.将其克隆到pMD18-T载体中,用双脱氧末端终止法进行全序列测定,序列分析表明我国疫苗株SA14-14-2的prM基因核苷酸序列与GenBank收录的完全一致.prM基因的获得为进一步研究该基因的免疫原性以及乙型脑炎病毒基因工程疫苗奠定了基础.     

动脉炎病毒属病毒的传染性cDNA克隆及其作为疫苗载体的研究进展

作者根据病毒反向遗传学的基本原理、动脉炎病毒的基因结构和亚基因mRNA的合成，就动脉炎病毒传染性cDNA克隆的构建及基因工程操作的研究进展作一综述。以期利用传染性cDNA克隆作为工具，构建出安全、有效的新型疫苗。     

几种分析方法对杂种棉后代综合评价的比较研究

为了明确几种分析方法对杂种棉后代综合评价的异同，于2002-2003年通过聚类分析、关联度分析以及多目标综合值评定分析原理对10个杂种棉后代在不同生态点的主要农艺及经济性状进行了分析．结果表明：3种分析方法对杂种棉后代的综合评价趋势基本上一致．从纤维品质来看，以湘Z-010，湘Z-004，湘Z-008，湘Z-007纤维品质较好．从产量性状来考虑，以湘Z-001，湘Z-002，湘Z-004产量较高．从湖南定位50-60支纱区划方针和产量性状来看，以湘Z-004表现最好，属于高产优质品种．