锯缘青蟹苗池微生态环境影响因素的初步探讨

通过对锯缘青蟹苗池微生态环境和水质环境的全过程检测,探讨了总菌数、弧菌数及弧菌数/总菌数的消长规律,并对苗种培育阶段涉及的各种外源因素及控制苗池微生态环境的相关手段的有效性作了初步的探讨。结果表明:苗池水体中总菌数在Z1~Z2少量添加水不换水阶段,呈相对稳定状态,进入Z3后总菌数逐渐增加,最高达3.5×106cfu/m l;弧菌数在Z1培育阶段出现2×102cfu/m l激增至5×104cfu/m l的峰值,第二峰值出现在Z5阶段,达6×105cfu/m l;弧菌数/总菌数比值在育苗起始时仅为0.4%,之后迅速升至30%~40%,在Z5阶段,由于弧菌数量急剧上升,达到50%的高比值;NH4-N与COD检测值在育苗过程中变动较大,两者与弧菌数/总菌数比值呈正相关关系。现行育苗方式中对苗池微生态环境产生影响的主要因素是苗种培育密度,海水、饵料的处理方式和抗生素;净化功能菌和蛭弧菌应用于育苗水体具有抑制弧菌繁殖的效果。     

Assessment of dietary lecithin and cholesterol requirements of mud crab, Scylla serrata, megalopa using semi-purified microbound diets

The effects of varying dietary lecithin and cholesterol levels on growth, development and survival of mud crab, Scylla serrata, megalopa were evaluated using six semi‐purified, microbound diets formulated to be iso‐energetic and containing three levels of supplemental lecithin (0, 20 and 40 g kg⁻¹ diet dry weight) and two levels of supplemental cholesterol (0 and 7 g kg⁻¹ diet dry weight). Fifteen megalopa were reared individually in each treatment and the nutritional value of diets was assessed on basis of mean dry weight and mean carapace width of newly settled first crab stage, as well as development time to the first crab stage and overall survival. A significant interaction between supplemental dietary lecithin and supplemental dietary cholesterol was found for final mean dry weight of newly settled crabs, and highest survival (60%) was recorded for megalopa fed diets containing the highest levels of dietary lecithin (39.7–44.1 g kg⁻¹) (diet 5 and 6) regardless of whether diets were supplemented with cholesterol; this rate of survival was identical to that of megalopa fed live Artemia nauplii. The results indicate that supplemental dietary cholesterol may not be essential for mud crab megalopa when fed diets containing sufficient levels of supplemental dietary phospholipids.     

青蟹的营养需求研究及其配合饲料研制

青蟹属（Scylla）有锯缘青蟹（Scylla serrata），拟穴青蟹（S．paramamosain），紫螯青蟹（S．tranquebarica）和榄绿青蟹（S．olivacea）等4个种。我国以拟穴青蟹占绝对优势，它有个体大、生长快、适应性强、肉味鲜美、营养丰富等特点，已成为具有重要经济价值的海水养殖蟹类之一。     

江蓠与新对虾、青蟹混养试验

细基江蓠繁枝变种与新对虾，青蟹混养试验结果表明：（１）细基江蓠繁枝变种生长的最适温，盐度分别为１７－３０℃和１７－２９‰，这一温，盐度范围也适合新对虾和青蟹的生长；鱼塘海水的温，盐度变化与沿海不同，因此，移植野生江蓠到鱼塘养殖时要考虑这一特点。（２）江蓠在不同的生长季节的最适生长水层是不同的。（３）江蓠的主要有效氮是ＮＨ４＾＋，而新对虾，青蟹的排泄物可分解出大量的ＮＨ４＾＋。这样，江蓠与新对虾，青     

拟穴青蟹Cactus基因的cDNA克隆、序列及生物学功能

为获取拟穴青蟹Cactus基因cDNA全长、分析基本生物学信息,并初步探索其在病原物刺激下的免疫反应,实验采用RACE技术获得了拟穴青蟹Cactus(SpCactus)基因的cDNA全长序列,其cDNA全长为2035 bp,开放阅读框(ORF)1311 bp,编码436个氨基酸,分子量为46.01 ku。对蛋白理化性质进行预测发现,SpCactus为亲水性蛋白,等电点pI为4.91。经预测,SpCactus与其他物种的IκB蛋白具有相似的功能结构域。同源性比对结果显示,SpCactus与凡纳滨对虾和中国明对虾的Cactus蛋白同源性均高达62%,相似度为73%。系统进化树分析显示,SpCactus与甲壳动物聚为一支,与无脊椎动物聚为一大支。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测发现,SpCactus基因在拟穴青蟹不同组织中均有表达,肌肉中的表达量最高,其次为心脏、眼柄、血液和鳃,肝胰腺中的表达量最低。LPS和金黄色葡萄球菌刺激均能显著诱导SpCactus基因的表达。本实验成功扩增了SpCactus基因全长,并进行了生物信息学分析、理化性质预测,初步探讨了其生物学功能,为进一步研究其在免疫反应中的生物学功能提供参考依据。     

锯缘青蟹死亡的组织病理学初步观察

对2008年8月福建省泉州市某海水场养殖锯缘青蟹中发生的死亡现象,开展锯缘青蟹的组织病理学研究。解剖可见肌肉明显坏死、溶解;头胸甲储积大量暗黄色体液,经福尔马林固定成固态物质;光镜下发现病蟹的中肠腺上皮细胞坏死、细胞质中出现大型的包涵体;电镜下发现病蟹的细胞质中有长约为500hm、宽约为200hm杆状结构的疑似杆状病毒存在。     

锯缘青蟹大眼幼体与凡纳滨对虾混养试验

利用3口池塘共1.14 hm2进行锯缘青蟹大眼幼体与凡纳滨对虾的混养试验,投放锯缘青蟹大眼幼体8500只,凡纳滨对虾苗2.03×105尾,经96~129 d的养殖,收获锯缘青蟹729.1 kg,凡纳滨对虾2804.3 kg;锯缘青蟹平均312 g/只,凡纳滨对虾57.5尾/kg;锯缘青蟹大眼幼体成活率27.5%,凡纳滨对虾成活率79.4%。试验结果表明,锯缘青蟹大眼幼体可以直接投入池塘中与凡纳滨对虾混养,将为今后大规模发展锯缘青蟹养殖摸索出一条有效途径。     

锯缘青蟹促雄腺发育的组织学研究

采用组织切片技术，以OlympusBH-2型显微镜对锯缘青蟹(Scylla serrata)促雄腺的发育进行观察。结果显示，促雄腺附着于射精管近末端，发育过程可分为4期：Ⅰ期促雄腺短小，腺细胞数量少；Ⅱ期促雄腺呈明显的索状；Ⅲ期促雄腺体积达到最大，一些部位膨大增生；Ⅳ期促雄腺不再生长，腺体急剧退化。腺细胞具有2种类型：A型细胞，核圆、异染色质少、胞质染色浅；B型细胞，核扁平、异染色质多，细胞染色深、界限不清晰，有时细胞质消失。促雄腺发育过程中，A、B型细胞数量、比例发生变化。B型细胞为A型细胞完成分泌后的存在形式，B型细胞比例反映了促雄腺分泌活动的状况。锯缘青蟹促雄腺发育和精巢成熟具有一定的相关性。     

拟穴青蟹卵泡抑素相关蛋白基因的克隆和表达分析

卵泡抑素相关蛋白(follistatin related protein,FRP)是一种细胞外基质糖蛋白,该蛋白参与细胞增殖、迁移、组织重塑、胚胎发育、细胞间相互作用等多种生理过程。迄今甲壳动物FRP的研究尚未见诸报道。实验采用RACE技术首次克隆了拟穴青蟹FRP基因部分cDNA序列。该序列长度1 948 bp,FRP肽段含有484个氨基酸残基,包括KAZAL-FS结构域、EFh结构域和两个Ig结构域。系统进化树显示拟穴青蟹FRP基因的分子进化地位与其生物学分类地位一致。半定量PCR及荧光定量PCR结果表明,FRP基因在拟穴青蟹的胸神经团、脑和卵巢中表达。FRP基因在卵巢发育各期的表达量各不相同,卵巢未发育期最高,据此我们推测FRP具有抑制卵巢发育的作用。     

锯缘青蟹卵巢发育的组织学观察

根据锯缘青蟹卵巢的外部形态和内部组织学特征,卵巢发育可以划分为六个时期:未发育期、发育早期、发育期、将成熟期、成熟期和排卵后期。在发育早期,多数卵母细胞胞质中有多个嗜酸性液泡,这种结构在其他十足类卵母细胞中较少见。少数个体在发育早期发生卵母细胞全面退化,这种现象可能是缺乏交配或饥饿造成的。