马蓝高产栽培技术研究

[目的]探索马蓝高产栽培方法。[方法]收集云南、贵州马蓝与四川芦山县马蓝对比，并从种植密度、栽种期和追肥方面开展研究。[结果]（1）芦山县马蓝在株高、茎基直径、叶长、叶宽、分枝数、产量和含量上优于云南、贵州马蓝；（2）种植密度以30cm×40cm为宜；（3）适宜栽种时间为9月～11月；（4）三次追施复混肥40kg/亩、50kg/亩、50kg/亩，马蓝产量高。[结论]在9～11月，采用30cm×40cm的密度种植，并于3月底4月初、5月中下旬、7月中下旬分别追施复混肥（尿素：复合肥=1:1）40kg/亩、50kg/亩、50kg/亩，芦山县马蓝能够获得高产。     

马蓝IGPS基因的克隆、表达分析及原核表达

吲哚-3-甘油磷酸合酶（indole-3-glycerol phosphate synthase,IGPS）是广泛参与生物体内色氨酸、生长素等吲哚化合物合成途径中重要的关键酶之一。为了研究BcIGPS在马蓝吲哚类生物碱合成中的作用,基于马蓝转录组数据,通过RT-PCR技术从马蓝中克隆得到IGPS基因序列,命名为BcIGPS;利用生物信息学分析BcIGPS序列特性;运用qPCR分析BcIGPS在马蓝不同器官及外源诱导处理下的时空表达情况;构建pET-32a-BcIGPS原核表达载体,并优化诱导表达条件。结果表明：BcIGPS（GenBank登录号：MT210517）全长为1176 bp,包含1个开放阅读框（ORF）,编码392个氨基酸,具丝氨酸（Ser）、苏氨酸（Thr）、酪氨酸（Tyr）磷酸化位点31个,无跨膜结构,无信号肽,亚细胞定位于叶绿体中。BcIGPS含有product（indole）活性结构域和IGPS、TrpC特异性位点。qPCR分析结果显示,BcIGPS基因在不同器官的相对表达丰度依次为：叶>茎>花>根;其响应茉莉酸甲酯（MeJA）、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）、乙烯利（ETH）外源诱导信号的诱导,经MeJA和ETH处理后,分别在24 h和36 h最高,为初始水平的5.53、6.87倍;在SA处理下,BcIGPS表达响应最为强烈,呈先骤升后骤降的变化趋势,在12 h最高达初始水平的33.13倍;ABA处理后,其表达量变化不显著。所构建的pET-32a-BcIGPS原核表达载体在大肠杆菌BL21中表达,其最适条件为37 ℃、0.4 mmol/L IPTG培养3 h,BcIGPS重组蛋白主要以包涵体形式存在,且蛋白分子量与预测相符。     

芦山县玉米-马蓝高光效间作栽培技术

为响应国家保护粮食安全的号召,在稳定粮食生产的同时,又能增加土地的经济效益,在雅安芦山试验喜光的玉米与半喜阴经济作物马蓝的间作种植。经过多年摸索,形成了一套玉米-马蓝高光效间作栽培技术。文章从整地、栽植、除草、施肥、病虫害防治、收获等方面总结了该技术的要点。同时也从光能互补利用,水分、肥料、用工季节、病虫害防治方便统一管理,马蓝市场前景等方面上介绍了该技术的优势。本栽培技术采用了适宜雅安山区的一种粮经复合栽培模式,可以显著增加山区的玉米种植效益。     

马蓝红外指纹图谱的鉴别

利用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)对不同部位、不同产地的马蓝药材进行红外指纹图谱鉴别研究,找出根、茎、叶的指纹特征及其差异.结果表明:根、茎在1260 cm-1处存在共吸收峰,而叶在此处不存在吸收峰(或者不明显);经一阶、二阶导数光谱,傅里叶去卷积分析后发现有更多的差异峰.不同产地马蓝茎、叶的指纹图谱很相似,但茎与叶平均图谱的相似度有较大差异,10批产地马蓝茎的红外光图谱与茎平均图谱的相似度为94.29-98.72,与叶平均图谱的相似度为85.74-90.90;10批产地马蓝叶的红外光图谱与叶平均图谱的相似度为93.30-97.46,与茎平均图谱的相似度为82.16-89.03.FTIR法具有方便、快速、高效、无污染、前处理简单的优点,可用于马蓝药材的鉴别和质量控制.     

荔波县气候因子与马蓝生长气候因子对比分析

[目的]比较分析荔波县气候因子和马蓝[Strobilanthes cusia （Nees） O.Kuntze]生长所需气候条件。[方法]利用荔波县历史气象资料,对比马蓝生长所需的气候因子,探讨该地区对马蓝栽培的适宜性。[结果]荔波县气候因子能满足马蓝生长所需的气候条件。[结论]荔波的气候条件完全适合大面积推广种植药用植物马蓝,而且可以培育出药性好、药物产量高的优良马蓝植物品种。     

马蓝高产栽培技术

从育苗、种植到管理各环节对马蓝的传统栽培技术进行了改良,形成了一套新的更适应生产需要的马蓝高产栽培技术体系。为提高马蓝的规模化高产栽培提供了科技支撑。     

马蓝基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

以马蓝为研究材料,对马蓝基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化.结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量的马蓝基因组DNA.电泳检测结果表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要.同时对马蓝RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合马蓝RAPD分子标记的最佳反应体系,即20 μl反应体系中含有1.25 U TaqDNA聚合酶,0.25 mmol/LdNTP,2.5mmol/L Mg2+,50 ng模板DNA,1.0 μmol/L引物;反应程序中最佳退火温度为38℃.     

野生地被植物——少花马蓝的园林应用初探

于2012年在南京中山植物园区域内的紫金山林下和林缘地区进行资源调查时,发现少花马蓝(Strobilanthes oligantha Miq.)野生居群的分布。此后,对少花马蓝作为野生地被植物在园林中应用的绿期、高度等重要评价指标进行了初步评价。结果表明:少花马蓝的绿期可达半年;成坪高度50~80cm;花朵密集、花型优美,叶片舒展、叶色特别,具备观花观叶地被的功能,并具备药用价值;具有发达的根状茎,覆土能力强;耐荫喜湿,抗逆性强。认为少花马蓝是较有园林应用前景的林下耐荫湿野生地被植物。     

光强对福建马蓝光合特性的影响

以药用植物福建马蓝(Strobilanthes cusia)为材料,研究不同光强对福建马蓝光合特性的影响。结果表明,不同光强(100%自然光照、30%自然光照、6%自然光照)处理下,马蓝叶片的光合速率日变化均呈双峰型曲线。3种光强处理中,以30%自然光强下光合速率最高。与自然光照相比,遮荫条件下(30%自然光照、6%自然光照)马蓝具有较高的初始荧光(Fm)、PSⅡ的光化学活性(Fv/Fo)、原初光能转换效率(Fv/Fm)、光化学量子产额(Yield)、光化学淬灭系数(qP)和较低的非光化学淬灭系数(qN);遮荫条件下,马蓝是通过提高叶片叶绿素a/b含量,降低光补偿点,提高光系统中光反应中心光化学活性,增强系统的光能转换效率来提高光合速率,以弥补弱光条件下光能的不足。试验发现遮荫条件下,光合速率和气孔导度相关度较低,非气孔因素应是遮阴影响马蓝光合的主要因子,同时发现遮荫使得马蓝气孔对于光照强度响应的敏感度显著增加。光强对马蓝叶片药效学成分靛蓝、靛玉红中靛蓝含量影响不显著,100%自然光处理的靛玉红含量大于两个遮荫处理。福建马蓝适宜于30%自然光照条件下的间作套种或林下栽培,对其生长有利。     

马蓝染色体制片技术优化

以莆田地区马蓝分生组织为材料,采用压片技术,探讨马蓝不同取材部位、不同取材时间、不同预处理试剂处理、不同解离时间等对马蓝染色体制片的影响,并进行核型分析.结果 表明:以根尖分生组织为材料,在上午8:00、8:30取材,用0.1％秋水仙素溶液室温预处理0.5 h,用卡诺液固定4h,然后用1 mol·L-1盐酸在60 C水...