甘蔗热带种金属硫蛋白家族基因的克隆及响应重金属胁迫的表达分析

金属硫蛋白是一类富含巯基的低分子量蛋白,在植物的重金属解毒及细胞氧化还原调控等方面起重要的作用。本研究以甘蔗热带种Badila组培苗为材料,分别测定了其在CdCl2、ZnSO4和CuCl2水溶液培养条件下地上部和地下部的重金属含量,结果显示其对上述3种重金属有较强的耐受与富集能力。继而克隆了ScMT1(登录号为KJ504373)、ScMT2-1-5(登录号为MH191346)和ScMT3(登录号为KJ5043704)3个金属硫蛋白家族基因,它们分别属于植物MT亚家族中的MT1、MT2和MT3型基因。ScMT1含有1个内含子和2个外显子,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长228 bp,编码75个氨基酸;ScMT2-1-5含有2个内含子和3个外显子,ORF长246 bp,编码81个氨基酸;ScMT3含有1个内含子和2个外显子,ORF长198 bp,编码65个氨基酸。RT-qPCR显示,Cd2+胁迫下,在甘蔗地上部和地下部,ScMT2-1-5均连续显著上调表达,而ScMT1的上调应答出现延迟。ScMT3在地上部的上调应答出现延迟,在地下部呈“扬-抑”趋势,提示甘蔗响应Cd^2+胁迫过程中ScMT2-1-5起更积极的作用,ScMT1参与胁迫后期的分子响应,而ScMT3不起主导作用。Cu^2+胁迫下,地上部ScMT1连续显著上调表达,ScMT2-1-5和ScMT3呈总体上调的表达趋势;地下部,ScMT1和ScMT2-1-5的上调表答均出现延迟,仅在胁迫后期显著上调表达,而ScMT3仅在胁迫前期显著上调表达。该结果提示了ScMT1、ScMT2-1-5和ScMT3在Cu2+胁迫响应过程中的协作关系,三者共同参与了地上部的胁迫响应,其中ScMT1起更积极的作用;此外三者还先后参与了地下部对Cu^2+胁迫的分子响应。Zn^2+胁迫下,ScMT1和ScMT3分别仅在地上部和地下部显著上调表达;ScMT2-1-5在地上部和地下部均呈“扬-抑”的应答趋势;提示了在甘蔗响应Cd^2+胁迫应答过程中ScMT1和ScMT3分别在地上部和地下部起主要作用,ScMT2-1-5参与了胁迫前期的分子响应。ScMT1、ScMT2-1-5和ScMT3在甘蔗不同组织中及在重金属(Cd^2+、Zn^2+或Cu^2+)不同累积水平下呈现出相似或互补的应答特性,提示上述甘蔗MT家族不同成员在重金属解毒及细胞氧化还原调控等方面产生了功能分化,且三者在应对过量Cd^2+、Zn^2+或Cu^2+对甘蔗组织造成伤害的过程中存在时空上的协同作用。该研究为深入理解多倍体植物甘蔗中MT家族各成员基因在重金属耐受过程中的协同作用机制奠定了基础。     

鹿茸及鹿血中布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立可应用于快速检测鹿茸及鹿血中布鲁氏菌的方法,保证鹿产品的药用、食用安全,试验根据布鲁氏菌特异性基因IS711设计合成引物和探针,建立实时荧光定量PCR方法,对反应条件进行优化,并绘制标准动力学曲线,Y=-3.14X+37.62,R2=0.997.结果 表明:该方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,组内、组间重复性试验Ct值标准差小于0.5,变异系数均小于2％,最小检测拷贝数为2.65× 101 Copies/μL.该方法对目的 基因检测灵敏度高,可用于鹿茸及鹿血相关样本的检测,也可用于布鲁氏菌的定性和定量检测,为相关鹿产品的质量安全评估提供重要技术保障.     

旋毛虫Serpin基因在不同发育时期的mRNA表达水平变化及虫体表达特性

为研究旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin),基因在不同发育时期的mRNA表达水平变化,本研究应用实时荧光定量PCR技术对不同发育时期的虫体的Serpin在mRNA表达水平进行检测。同时利用鼠抗重组蛋白血清对Serpin在旋毛虫成虫、新生幼虫、成囊前期幼虫及肌幼虫中进行定位,以鉴定该Serpin基因的表达特性。研究结果显示,在成虫时期,3 d时表达量明显高于6 h和5 d的表达量(P﹤0.05);成囊前期表达量很低,其中18 d时表达量最低(P﹤0.05);肌幼虫时期在26 d、38 d和48 d均有大量表达(P﹤0.05)。免疫荧光染色结果表明,Ts Serpin蛋白在5 d成虫期的体表表达;在新生幼虫和14 d成囊前期幼虫的体内体表均有表达;38 d肌幼虫时期明显可见表皮及体内均有表达。本实验为探究旋毛虫在宿主体内免疫逃避机制奠定基础。     

感官分析技术及其在食品工业中的应用

食品的质量最直接地表现在它的感官性状上，所以可以通过食品的色泽、风味、组织状态的变化来鉴别食品质量的好坏。采用感官技术对产品进行分析，与采用各种仪器设备相比，该方法简便易行、灵敏度高、直观，因而它是从事食品生产、销售、管理人员所必须掌握的一门技能。     

油门的巧用

机手在操作拖拉机时，合理地使用油门是提高作业机组生产率、经济性及保证机车有良好的技术状态和灵活性的重要技能。所以机手除了应掌握正确使用油门的技术外，还应学会巧用油门。     

园林花境种植设计要点

花境是指利用地块边缘、园林景观重要节点等区域，混合种植花卉、花灌木，形成一种狭长的半自然式园林景观。它的原理是以模拟自然状态下的森林边缘地带景观多样性，创造一种“源于自然，高于自然”的景观意境。目前，花境在公共绿地、道路美化、居民小区及家居庭院等广泛应用。花境设计是一项技术比较复杂的工作，在具体实践中要把握好几个要点。     

农机闹 毛病 可用小窍门

1三做到 一是入冬之前，对拖拉机作一次全面的维护保养，并彻底排除发动机难以起动的隐患，使拖拉机保持良好的技术状态。二是冬季气温低，要选用0号柴油和流动性能好、黏度较小的冬季用的机油。三是坚持科学的方法起动发动机。即加热水预热发动机等方法。     

鸡的热应激反应及防治措施

应激反应是机体在长期进化过程中形成的一种扩大适应范围的生理反应,是一种特殊的生理状态。热应激是指动物在高温的环境条件下所表现出来的一系列异常反应。在夏季持续的高温、高湿环境下,鸡群受热应激的影响,采食量减少,体重下降,肉鸡生长缓慢,蛋鸡产蛋下降,给养鸡业带来一定     

夏季猪场的管理

炎炎的夏日将要来临,这是养猪生产者又将面临的一大难题,如果猪只的饲养环境恶劣,就会出现猪舍内及运输过程中猪只死亡率升高、生长性能下降、母猪的分娩率下降、发情延迟、胚胎死亡率上升、公猪的精液品质下降、窝产活仔数下降等问题。关于这方面,美国家畜养护协会给出了一些推荐的指标,指标指出,高于24℃为警戒状态;高于37℃为危险状态;温度高于37℃的同时湿度达到85%则为紧急状态。这就要求我们在生产管理中采取相应的措施预防和控制高温带来的危害。一、高温对繁殖性能的影响机理一般认为应激是机体对应激原所做出的非特异性应答,通过下…     

浅析新品种不等于良种

一、目前种苗市场存在的问题 目前，林木种苗市场中存在问题较多，尤其是有些经销商随意命名苗木品种和在媒体发布不实广告，以“加收苗木方式”帮助农民脱贫为诱饵，大量销量所谓“新品种”高科技种苗，导致一些树种苗木生产处于无序状态，破坏了正常的种苗生产计划，造成个别树种苗木大量积压。如果经销商兑现不了承诺，不但给育苗单位带来经济损失，而且在社会上造成不良影响。