串联的人胸腺素α1基因在番茄中的高效表达

 【目的】提高免疫活性多肽人胸腺素α1（Tα1）在番茄中的表达量。【方法】根据植物偏爱密码子对Tα1基因进行优化,并将其顺式串联成四联体,同时在单体基因间插入肠激酶剪切位点基因序列,以便表达的融合蛋白可以被肠激酶切割成单体。利用农杆菌介导法将单体Tα1基因和四联体Tα1基因分别转化进入番茄。【结果】两个基因转化番茄后分别得到卡那霉素抗性再生植株19株和10株,PCR和Southern杂交检测证明,部分番茄基因组中整合了外源基因。经过Western和ELISA分析,串联的Tα1基因已经在番茄果实中表达,表达量最高相当于20.2 μg Tα1?g-1果实鲜重,高于单体基因的表达量。【结论】基因串联的方式提高了Tα1基因在番茄中的表达量。     

胸腺素α_1对墟岗黄鸡免疫器官组织学结构的影响

本试验研究了不同剂量的胸腺素α1(Tα1)对墟岗黄母鸡免疫器官指数和组织学结构的影响。结果表明:0.015mg/kg体重剂量的Tα1可显著提高鸡免疫器官指数,可使胸腺皮质增宽,髓质胸腺小体数和胸腺细胞数增加;脾脏胸腺依赖区和法氏囊依赖区细胞增殖;高剂量Tα1则引起法氏囊髓质局部细胞变性和坏死。     

胸腺肽基因对胡萝卜的遗传转化

胸腺肽(thymosin)是一种由胸腺分泌的促进淋巴细胞合成和成熟的多肽激素,对于淋巴系统的发育和维持免疫系统的平衡起重要作用(李金屏,1999;张符光和刘佃辛,1996)。市场上广泛使用的胸腺肽主要是从小牛胸腺和猪胸腺中提取制备的。从小牛胸腺和猪胸腺中进行胸腺肽的提取,生产成本     

鸡胸腺肽的提取及其生物学活性的初步研究

采用两种不同的方法提取鸡胸腺肽,计算胸腺肽得率,鉴定和比较提取物的生物学活性。结果显示,两种方法的提取物在体外不仅能使脱E受体的淋巴细胞恢复其E受体的功能,并能促进体外培养的淋巴细胞增殖;而且能增强鸡的淋巴细胞增殖能力,增加鸡外周血中γ-干扰素的含量。除了E玫瑰花环实验,各项体内外的活性检测均显示第二批鸡胸腺肽具有较高的活性,并且与购买的人用胸腺肽相当。本研究的结果表明,提取方法二操作简便,产率高,其提取物生物学活性较高,可用于兽医临床研究。     

胸腺肽αl原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

构建胸腺肽αl（Thymosin αl,Tαl）基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,为大量获得胸腺肽αl打下基础。将人工合成的Tαl三串体基因插入到表达载体pET32a后,CaC12法转化大肠杆菌BL21,经氨苄青霉素筛选后用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测BL21中胸腺肽αl的表达。大肠杆菌中检测到与目的蛋白相对分子量(31kD)相符的条带。成功构建了Tαl原核表达载体,该蛋白能在大肠杆菌中表达。     

胸腺肽对幼龄雌性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响

研究了胸腺肽对幼龄雌性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响.以幼龄雌性小鼠为试验动物,连续30d皮下注射不同剂量的胸腺肽,观察各剂量胸腺肽处理对幼龄雌性小鼠卵巢、子宫脏器指数的影响,并检测血清中促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_2)的含量.结果表明,与正常饲养对照组比较,各剂量胸腺肽处理的小鼠卵巢指数、子宫指数降低,差异显著或极显著(p<0.05,p<0.01).其中,0.30mg·mL~(-1)胸腺肽处理组小鼠卵巢指数最低,比正常饲养对照组下降了 36.07%.0.60mg·mL~(-1)胸腺肽组小鼠子宫指数最低,比正常饲养对照组下降了38.08%.与正常饲养对照组相比,各剂量胸腺肽处理小鼠FSH、E2水平降低,差异显著或极显著(p<0.05,p<0.01).其中,0.60mg·mL~(-1)胸腺肽组FSH和E2含量都为最低,分别比正常饲养对照组下降14.48%和17.59%.可见,胸腺肽能降低幼龄雌性小鼠生殖器官指数及血清中性激素水平,从而影响幼龄雌性小鼠的生殖内分泌系统.     

胸腺肽αl原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

 构建胸腺肽αl（Thymosin αl,Tαl）基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,为大量获得胸腺肽αl打下基础。将人工合成的Tαl三串体基因插入到表达载体pET32a后,CaC12法转化大肠杆菌BL21,经氨苄青霉素筛选后用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测BL21中胸腺肽αl的表达。大肠杆菌中检测到与目的蛋白相对分子量(31kD)相符的条带。成功构建了Tαl原核表达载体,该蛋白能在大肠杆菌中表达。     

胸腺肽对幼龄雄性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响

为了探讨胸腺肽对幼龄雄性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响,将100只幼龄雄性小鼠随机分为5组,第1组为正常饲养对照组,不做任何处理;第2组为生理盐水对照组,注射生理盐水;其余3组为试验组,每日分别背部皮下注射低剂量胸腺肽(0.30mg.mL-1)、中剂量胸腺肽(0.60mg.mL-1)和高剂量胸腺肽(1.20mg.mL-1),连续30d后测定睾丸指数、附睾指数、精囊腺指数和血清中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平。试验结果表明:与生理盐水对照组相比,高剂量胸腺肽小鼠睾丸指数、附睾指数、精囊腺指数及LH水平均显著性升高(p<0.05);低胸腺肽组精囊腺指数显著性升高(p<0.05)。与正常饲养对照组比较,高剂量胸腺肽组小鼠T水平显著性升高(p<0.05)。可见,胸腺肽能提高雄性小鼠生殖器官指数和性激素水平,从而调节雄性小鼠生殖内分泌系统。     

胸腺肽制备与纯化方法的研究

分析了近年来对胸腺肽提取纯化技术的科研成果,阐述了胸腺肽提取纯化技术的研究进展,以期为提高胸腺肽制备水平提供参考。     

3拷贝鸡胸腺素α1基因在大肠杆菌中的融合表达及活性分析

为表达鸡胸腺素α1(Thymosin alpha 1,Tα 1),并对其进行纯化及生物学活性分析,本研究根据大肠杆菌基因密码子偏嗜性对Tα 1基因进行优化,人工合成了Tα1三拷贝融合基因.并将其克隆至原核表达载体pET-30a中,转化至BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达和镍柱纯化,获得融合蛋白.融合蛋白经羟胺切...