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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
3.
Protective efficacy of an H5/H7 trivalent inactivated vaccine produced from Re-11, Re-12, and H7-Re2 strains against challenge with different H5 and H7 viruses in chickens
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ZENG Xian-ying CHEN Xiao-han MA Shu-jie WU Jiao-jiao BAO Hong-mei PAN Shu-xin LIU Yan-jing DENG Guo-hua SHI Jian-zhong CHEN Pu-cheng JIANG Yong-ping LI Yan-bing HU Jing-lei LU Tong MAO Sheng-gang GUO Xing-fu LIU Jing-li TIAN Guo-bin CHEN Hua-lan 《农业科学学报》2020,19(9):2294-2300
We developed an H5/H7 trivalent inactivated vaccine by using Re-11, Re-12, and H7-Re2 vaccine seed viruses, which were generated by reverse genetics and derived their HA genes from A/duck/Guizhou/S4184/2017(H5 N6)(DK/GZ/S4184/17)(a clade 2.3.4.4 d virus), A/chicken/Liaoning/SD007/2017(H5 N1)(CK/LN/SD007/17)(a clade 2.3.2.1 d virus), and A/chicken/Guangxi/SD098/2017(H7 N9)(CK/GX/SD098/17), respectively. The protective efficacy of this novel vaccine and that of the recently used H5/H7 bivalent inactivated vaccine against different H5 and H7 N9 viruses was evaluated in chickens. We found that the H5/H7 bivalent vaccine provided solid protection against the H7 N9 virus CK/GX/SD098/17, but only 50–60% protection against different H5 viruses. In contrast, the novel H5/H7 trivalent vaccine provided complete protection against the H5 and H7 viruses tested. Our study underscores the importance of timely updating of vaccines for avian influenza control. 相似文献
4.
免疫剂量和母源抗体对禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫效力的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
利用表达 H 5亚型禽流感病毒 (AIV)血凝素基因的重组鸡痘病毒 (r FPV- HA)以不同剂量免疫 1日龄 SPF鸡、有或无母源抗体 (FPV、AIV H5)的商品鸡 ,并于免疫后 2 1d利用同亚型 AIV通过肌肉注射进行致死性攻击 ,通过检测免疫后 HI抗体应答、比较攻毒后发病率和死亡率评价免疫剂量和母源抗体对 r FPV- HA免疫效力的影响。结果发现 ,免疫后 2 1d,15 %~ 2 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可检出 HI抗体 ,而含母源抗体商品鸡检测不到 HI抗体。利用H5亚型 AIV致死性攻击后 ,10 3~ 10 6 PFU的 r FPV- HA可保护 95 %~ 10 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡抵御强毒攻击 ,使之免于发病和死亡 ;而不同剂量 r FPV- HA接种的含母源抗体商品鸡有 80 %~ 90 %发病和死亡。结果表明 ,在较宽的免疫剂量范围内 ,r FPV- HA对 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可提供良好的保护 ,显示出一定的应用前景 ;母源抗体影响 r FPV- HA诱导的免疫应答 ,且提高免疫剂量亦不能克服其干扰作用 ,这提示在实际应用中需优化免疫程序 ,避免母源抗体干扰。 相似文献
5.
用免疫荧光、酶标技术检测赭曲霉毒素A的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
该项研究采用本课题组提纯的赭曲霉毒素A(Ochratoxin A·简称OA)和研制的兔抗OA抗体等,进行间接荧光法和ELISA间接法检测OA的试验。通过对不同浓度的OA纯品和含毒饲料浸提液及中毒死亡鸡内脏的间接荧光染色,均能检出分布均匀、大小有别的黄绿色荧光亮点;用OA为被检抗原和兔抗OA抗体与羊抗兔IgG-HRP进行ELISA间接法试验,对含不同浓度OA的试验孔和对照孔的检测,结果均正确稳定。研究结果证明,以上两种检测方法检测OA均具有灵敏、特异、快速等优点。 相似文献
6.
7.
应用5-HT免疫组织化学染色法,对冬春两季的莱芜黑山羊松果体进行了观察比较,以探讨松果体与下丘脑垂体-性腺轴的关系。结果显示,莱芜黑山羊松果体内存在大量5-HT阳性的松果体细胞及5-HT纤维;冬季松果体阳性细胞面积及阳性面积比都明显大于春季(P〈0.01),平均光密度在冬、春季间无明显差异(P〉0.05)。表明莱芜黑山羊松果体的功能活动呈现季节性变化,与羊的繁殖活动关系密切。 相似文献
8.
在MRS平板上,采用琼脂扩散法测定了Nisin对Lactobacillus acidophilus La-5和Bifidobacterium bifidum Bb-12生长的抑制作用。当Nisin浓度≥50ug/ml时,对Lactobacillus acidophilus La-5表现出强烈的抑制作用,而Bifidobacterium bifidum Bb-12则几乎不生长,即使Nisin的浓度仅为25ug/ml,当L.acidophilus La-5和B.bifidum Bb-12单独或两者共同在37℃发酵10%(w/w)还原脱脂奶时,脱脂奶中添加的50ug/ml Nisin对B.bifidum Bb-12表现出杀菌作用,而对L.acidophilus La-5则为抑菌作用。当延长培养时间后。L.acidophilus La-5的存在可以降低Nisin对B.bifidum Bb-12的致死作用。 相似文献
9.
为了研究拮抗细菌Enterobacter cloacae B8在野外水稻叶面上的定殖情况及拮抗作用,由自然选择和Tn5诱变从B8产生了一株抗菌素抗性突变体BX8.BX8能在含利福平达400μg/ml或卡那霉素达300μg/ml的LB培养基中生长.实验表明该抗菌素抗性的产生没有降低BX8的拮抗活性.该抗性比较稳定,在无抗菌素培养基中培养.BX8至少分裂生长60代内抗性不变. 相似文献
10.
Agerholm, J.S., A. Basse and K. Christensen: Investigations on the occurrence of hereditary diseases in the Danish cattle population 1989-1991. Acta vet. scand. 1993, 34, 245-253.– The methods of the Danish Bovine Genetic Disease Programme are outlined, and the results obtained during the first 3 years in function are described. The most common disease reported was spinal muscular atrophy in calves of the Red Danish Dairy breed with 312 reports. Necropsy was performed on 162 cases, and spinal muscular atrophy was diagnosed in 82 of these. Bovine progressive degenerative mye-loencephalopathy, rectovaginal constriction, syndrome of arthrogryposis and palatoschisis, hereditary chondrodysplasia (2 different types), syndactylism, epitheliogenesis imperfecta, and osteogenesis imperfecta was diagnosed with 1 case each. Lethal trait A46 was diagnosed in 4 calves. Some of these diseases have not previously been described in Denmark, and epitheliogenesis imperfecta was for the first time diagnosed in the Hereford breed. Chromosome translocation 1/29 was detected in the Blonde d’Aquitaine (BAQ), Limousine, and Red Danish Dairy breed. The aberration occurred frequently in BAQ. Furthermore, a complex chromosome translocation t(l;8;9)(q45;ql3;q26) was detected in the Red Danish Dairy breed. 相似文献