小麦GAPDH 基因克隆及序列分析

采用Trizol法提取高质量小麦总RNA,并运用RT-PCR方法克隆了小麦GAPDH （甘油醛三磷酸脱氢酶）基因的部分序列(EU022331),长度为604 bp,核苷酸序列比对结果表明,该序列与大麦(M36650)、玉米(AY109397)、番茄(BT012693)GAPDH核苷酸序列的同源性分别为95%、86%和84%。GAPDH基因的克隆为在禾谷类作物研究的应用提供了一个较好的对照基因。     

TMV载体上发生的的前体mRNA基因剪接效应

根据以往的报道,TMV 基因只存在于细胞质中且不发生基因剪接,前体mRNA(Pre-mRNA)的剪接只能发生在细胞核中。本研究应用RT-PCR,DNA序列测定及GUS+INTRON的点突变和荧光检测等研究手段,首次发现TMV载体中GUS基因的表达和前体mRNA的剪接同时发生,证明了GUS基因在TMV载体上的剪接效应。     

病原侵染后杨树叶片中两个关键酶的表达分析

抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase,APX）和S-腺苷甲硫氨酸合成酶（S-adenosyl methionine synthetase,SAMS）在植物胁迫应答中扮演重要角色。为了研究这两个酶与杨树抗病的关系,以杨树高抗无性系“NL895”（P. euramericana CL“NL895”）为实验材料,利用实时定量RT-PCR（Real-time RT-PCR）技术,分析病原侵染不同时间后杨树叶片中这两个酶在mRNA水平上的表达变化,结果显示,这两个酶均差异表达且表达量下调,表明二者与杨树抗病过程是密切相关的。进一步将APX和SAMS在转录组水平上的表达变化与蛋白质组水平上的变化进行比较后发现,二者在两种水平上的表达变化无显著相关性。     

猪LXRα基因的克隆、序列分析及表达研究

采用 RT-PCR 结合克隆测序的方法,从猪的肝脏组织中克隆出了猪基因的 Liver X Receptors α cDNA 序列,编码区长度1344bp,编码447个氨基酸,基于Pfam数据库发现存在一个锌指蛋白和核受体的配体结合区;系统发育分析发现猪的LXRα所在的哺乳动物类群非常保守,与鸡和斑马鱼所构成的类群存在较大遗传距离;在大白猪和杂种野猪的脂肪组织中检测表明LXRα基因的表达随着月龄的增加也不断增加,并日趋稳定,而杂种野猪在9月龄开始高表达,12月龄最高。     

小麦GAPDH 基因克隆及序列分析

采用Trizol法提取高质量小麦总RNA,并运用RT-PCR方法克隆了小麦GAPDH（甘油醛三磷酸脱氢酶）基因的部分序列（EU022331）,长度为604bp,核苷酸序列比对结果表明,该序列与大麦（M36650）、玉米（AY109397）、番茄（BT012693）GAPDH核苷酸序列的同源性分别为95%、86%和84%。GAPDH基因的克隆为在禾谷类作物研究的应用提供了一个较好的对照基因。     

病原侵染后杨树叶片中两个关键酶的表达分析

抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase,APX）和S-腺苷甲硫氨酸合成酶（S-adenosyl methionine synthetase,SAMS）在植物胁迫应答中扮演重要角色。为了研究这两个酶与杨树抗病的关系,以杨树高抗无性系“NL895”（P. euramericana CL“NL895”）为实验材料,利用实时定量RT-PCR（Real-time RT-PCR）技术,分析病原侵染不同时间后杨树叶片中这两个酶在mRNA水平上的表达变化,结果显示,这两个酶均差异表达且表达量下调,表明二者与杨树抗病过程是密切相关的。进一步将APX和SAMS在转录组水平上的表达变化与蛋白质组水平上的变化进行比较后发现,二者在两种水平上的表达变化无显著相关性。